肝癌实验性动物模型的研制方法

肝癌的治疗目前尚无很有效的手段,鉴于医德和伦理的约束,利用肝癌实验性动物模型开展肝癌的实验性治疗研究日益受到重视。自1934年Yoshida首先用邻位氨基偶氮甲苯(OAAT)成功地诱发了大鼠肝细胞癌,其后40～60年代,各种化学物(二乙基亚硝胺、黄曲霉毒素B_1等)诱发的及移植性大小鼠肝癌模型不断问世。70年代后期相继出现了裸鼠人肝癌移植模型的报道。我国肝癌模型的研究在50年代后期开始,60年代陆续开展了奶油黄(DAB)、亚硝胺及黄曲霉毒素饲料的诱癌实验,1978年强家模等建立了我国第1株移植性大鼠肝癌模型,1981年汤钊猷等首先将1例人肝癌标本移植于裸鼠获得成功。目前采用多种方法制做的肝癌动物模型正广泛用于各种形式的实验研究。

Ⅱ型糖尿病实验性动物模型和转基因动物模型的研究与应用

近年来,糖尿病发病率上升很快,其中Ⅱ型糖尿病(NIDDM)的发病率占糖尿病发病率的90%以上,合适的糖尿病模型无疑可对糖尿病研究提供重要的作用。本文对实验性Ⅱ型糖尿病模型研究的现状及相关资料综述如下。1 实验性Ⅱ型糖尿病动物模型实验性糖尿病动物模型(experimental dia-bete animal model)是指通过物理、生物、化学等致病因素人工诱发出的具有糖尿病特征的动物模型,具有耗时短方法简便、易于掌握、复性好的特点,短期内可诱导出大量模型。

实验性心脏挫伤动物模型的建立

本研究应用自制机械式弹性拉力打击器以9．1～10．5m／s速度冲击动物胸骨心前区，不仅导致左右心室压力、心电图及心率发生改变，而且造成了心脏挫伤等宏观的病理形态学变化，成功地建立了心脏挫伤动物模型，为深入研究钝力性心脏外伤奠定了基础。

脑动静脉畸形实验动物模型的建立

脑动静脉畸形(AVM)实验性动物模型建立是研究AVM必不可少的。建立脑AVM实验性动物模型最常用的动物是猪,目前主要有如下几种猪的脑AVM模型建立的方式:利用猪的自然奇网模式,颈动脉颈内静脉瘘模式,奇网海绵窦交通模式,利用导管形成AVM模型以及颈总动脉与颈外静脉端端吻合模式。随着此项工作的不断完善,对脑AVM的病理生理、血流动力学的认识定会进一步提高,这将会更有力地有助于AVM的治疗。

眼肿瘤眼眶病中常见实验动物模型研究进展

眼肿瘤眼眶病是一类危害人类视功能,甚至生命的严重疾病.目前多数眼肿瘤眼眶病的病因及发病机制仍未明确,这给其治疗带来了不利影响.医学实验动物模型是利用动物体来研究人类疾病的实验模型.通过建立不同疾病的实验动物模型,不仅有助于了解疾病本身的病因、病理机制,而且可以为其治疗提供研究平台.尽管眼肿瘤眼眶病较眼科其他疾病的动物模型研究较少,但近年来有关眼肿瘤眼眶病动物模型的研究仍然取得了一些进展.就几种常见的眼肿瘤眼眶病相关动物模型,甲状腺相关眼病（TAO）动物模型、眼眶腺样囊性癌动物模型、视网膜母细胞瘤（RB）动物模型、葡萄膜黑色素瘤动物模型、眼眶炎性假瘤动物模型的研究进展进行综述.

免疫性肝损伤动物模型研究进展

机体免疫应答反应介导的肝组织及细胞损伤已成为当前众多肝脏疾病发病的重要原因之一。有研究表明，在病毒性肝炎、自身免疫性肝病、肝移植术后、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病及药物性肝损害等病理过程中，均存在不同程度的肝脏免疫应答介导的炎症反应及其引起的肝实质的损伤［1-4］。而目前对各种肝脏疾病发病机制的深入探讨和临床治疗药物的筛选与评价，很大程度上依赖于与人类肝脏疾病病理机制相似的实验性动物模型的建立与应用。通过建立科学的、实用的、重现性好的免疫性肝损伤动物模型，研究各种肝病的免疫病理机制及筛选与评价临床保肝药物，具有重要的现实意义。故笔者结合人体肝脏免疫损伤的特点，对当前免疫性肝损伤动物模型的研究现状进行概述，以期为今后的相关研究提供参考和借鉴。

糖尿病动物模型研究进展

糖尿病动物模型在糖尿病以及其并发症发病机制的研究中应用极其广泛,并且已有较长历史。除此之外,所有针对糖尿病治疗的措施,包括胰腺细胞的移植,甚至是预防策略,都要预先在动物模型上开展并观察。因此,对糖尿病动物模型进行研究和优化,使其更接近人类糖尿病发病过程,将有助于深入研究糖尿病及其并发症的发病机制,并为治疗和预防糖尿病奠定重要基础。

糖尿病脑病动物模型制备方法的研究进展

糖尿病脑病是由糖尿病引起的认知功能障碍,脑的神经生理学和结构均发生改变。糖尿病动物模型按照制备方法不同,分为实验性动物模型、自发性动物模型、基因工程动物模型。实验性动物模型制备方法主要包括单纯高糖高脂饮食诱导法、化学药物诱导法、高糖高脂饮食联合小剂量STZ法等,也可以用STZ侧脑室注射的方法来制备糖尿病脑病模型。通过上述方法制备2型糖尿病动物模型后,需要再次通过行为学实验进行认知功能评估(Morris水迷宫实验、新物体识别实验、抑制性回避任务等),筛选出有认知功能障碍的糖尿病动物模型即糖尿病脑病动物模型。

nm23-H1基因对实验性裸鼠肺癌细胞休眠作用的研究

目的:建立人非小细胞肺癌实验性裸鼠肺部的肿瘤细胞休眠模型,并验证nm23-H1基因是否具有促进肿瘤细胞休眠的作用。方法:L9981-nm23-EGFP是nm23-H1基因以真核载体pEGFP质粒转染L9981所构建的人非小细胞肺癌细胞株。L9981-EGFP是转染真核空载体pEGFP质粒的不合nm23-H1基因的人高转移性非小细胞肺癌细胞株。以L9981-nm23-EGFP肺癌细胞作为实验组,空载高转移性肺癌细胞株L9981-EGFP作为对照组,分别接种裸鼠,8周后处死全部裸鼠,检测2组裸鼠肺部肺癌细胞的Ki-67增殖指数,凋亡指数,肿瘤组织VEGF的表达,裸鼠肺组织的调亡指数和G_0/G_1期细胞占细胞总数的百分比。结果:L9981-nm23-EGFP组免疫组化增殖指数、凋亡指数和VEGF的表达均低于高转移性L9981-EGFP组。流式细胞术检测裸鼠肺组织的凋亡指数亦支持免疫组化的结果。实验组G_0/G_1期细胞占细胞总数的比率高于对照组。结论:裸鼠肺部有肺癌休眠细胞存在,实验组裸鼠肺部肺癌休眠细胞多于对照组。nm23-H1基因可能具有促进肺癌细胞休眠的作用。

NADPH氧化酶介导的ROS在特发性炎性肌病动物模型骨骼肌组织中的表达及意义

目的探讨NADPH氧化酶中的NOX2和NOX4介导的活性氧(ROS)在特发性炎性肌病(IIM)发病机制中的作用及意义。方法将14只健康雌性BALB/c小鼠随机分为对照组(n=6)和EAM组(n=8),EAM组小鼠采用豚鼠骨骼肌匀浆蛋白免疫诱导实验性自身免疫性肌炎动物模型。观察小鼠的体重变化、临床表现,测定其血清肌酶水平、四肢肌力及骨骼肌组织病理改变;并采用免疫组织化学法、分光光度法和ELISA法分别检测各组小鼠骨骼肌组织中NOX2、NOX4、NADPH及ROS的表达情况或含量。结果与对照组相比,末次免疫后1周EAM组小鼠体重下降,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,对照组小鼠骨骼肌纤维大小、形态、结构基本正常,有少量炎性细胞浸润,未见肌纤维萎缩、变性、坏死;EAM组小鼠骨骼肌纤维大小不一、粗细不等,有大量炎性细胞浸润,可见不同程度的萎缩、变性、坏死;EAM组小鼠骨骼肌组织HE染色病理学评分显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,EAM组小鼠骨骼肌组织中NADPH含量降低、ROS含量升高(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,NOX2和NOX4在EAM组小鼠骨骼肌组织中的表达均高于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,EAM组小鼠骨骼肌组织中ROS的含量与NOX2、NOX4的免疫组化评分均呈正相关(P<0.05),而与NADPH的含量呈负相关(P<0.05);EAM组小鼠骨骼肌组织HE染色病理学评分与NOX2、NOX4的免疫组化评分及ROS的含量均呈正相关(P<0.05),而与NADPH的含量呈负相关(P<0.05)。结论NADPH氧化酶中的NOX2和NOX4可能通过消耗NADPH产生大量的ROS,导致组织细胞氧化性损伤并诱导铁死亡反应来参与IIM的发病;NADPH、NOX2、NOX4和ROS有望成为新的评价IIM肌肉组织损伤程度的指标。

几种实验性2型糖尿病动物模型制备方法的比较

2型糖尿病是一种严重影响人类健康的内分泌代谢性疾病,其患病人数多,病程缓慢。动物模型在2型糖尿病研究中发挥了重要作用,其中实验性动物模型因其价格便宜,易于诱导和维持而被广泛应用。本文对几种常见的2型糖尿病动物模型的建立方法进行综述和评价。

比较医学与实验动物医学

经中国农业科学院程绍迥副院长推荐,应我国农业部邀请,美国卫生部顾问、马里兰州大学医学院比较医学系主任、美籍华裔学者徐兆光教授于去年12月10日至20日来我国参观访问,作了多次比较医学与实验动物医学的学术报告。本文系根据徐教授的报告与有关资料整理。

大鼠骨骼肌钝挫伤分级模型的建立

目的建立一个控制性、重复性好,并可分级的骨骼肌挫伤动物模型。方法采用自行设计的机械式撞击装置,以撞击速度(velocity,v)和形变(deformation,DF)作为外力参数,并保持较恒定的撞击时间,使击锤打击瞬间速度不同,造成轻、中、重不同程度的大鼠腓肠肌挫伤。结果在肉眼、HE染色观察下,39只大鼠腓肠肌出现可分级的病理学改变。在低撞击水平(v:2m/s,DF:5.5mm),轻度挫伤组病理改变局限于大鼠腓肠肌肌外膜和腓肠肌表层部位;在中度撞击水平(v:2.5m/s,DF:6.5mm),中度挫伤组病理改变可见于大鼠腓肠肌肌外膜和大部分腓肠肌;在高撞击水平(v:3m/s,DF:7.5mm),重度挫伤组病理改变除中度挫伤组累及部位外,还伤及比目鱼肌。结论该模型制作出常见的钝力性骨骼肌挫伤,以撞击速度和形变作为外力参数,成功建立了机械骨骼肌挫伤分级模型,致伤程度较一致,是骨骼肌挫伤研究较合适的动物模型,为深入研究钝力性骨骼肌挫伤奠定了基础。

类似人类老年糖尿病大鼠模型胰腺形态学变化

目的采用D-半乳糖加高脂高糖乳剂及链脲佐菌素(STZ)构建类似老年人糖尿病的大鼠动物模型,观察其胰腺形态学变化。方法选用健康Wistar雌性大鼠,20只灌胃生理盐水为正常对照组;20只采用腹腔注射D-半乳糖40d为衰老模型组;另25只则采用腹腔注射D-半乳糖40d并灌胃高脂高糖乳剂30d后腹腔注射STZ(体重≤200g按30mg/kg,体重>200g者按体表面积进行计算),制备衰老糖尿病模型大鼠,筛选空腹血糖≥11.1mmol/L者为成模鼠,上述各组大鼠再继续灌胃生理盐水10d后,各组随机取10个样本以免疫组化、光镜和电镜分别观察大鼠胰岛诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达、胰腺细胞凋亡、胰岛形态及胰岛细胞和腺泡细胞超微结构变化。结果衰老模型组大鼠胰岛iNOS表达量和胰腺细胞凋亡数较正常对照组增加,衰老糖尿病模型组胰岛iNOS表达量和胰腺细胞凋亡数剧增达3倍以上。HE染色显示,衰老模型组胰岛数量、面积仅为正常的50%～70%,衰老糖尿病模型组胰岛数量、面积仅为正常的20%～30%,且岛内中心部细胞(β细胞)消失尤为显著。电镜观察显示,衰老糖尿病模型组大鼠胰腺细胞明显脱颗粒,呈现膜性结构皱缩,核染色质固缩、碎裂等细胞凋亡征象。结论采用腹腔注射D-半乳糖加高脂高糖乳剂及腹腔注射STZ,胰腺形态组织学证实大鼠在衰老模型基础上胰岛β、D细胞数量进一步下降可引发糖尿病。

化学药物诱导构建衰老糖尿病大鼠模型

目的采用化学药物损伤法构建衰老糖尿病(DM)大鼠模型。方法3月龄健康Wistar雌性大鼠,20只腹腔注射生理盐水为正常对照组;20只腹腔注射D-半乳糖42d为衰老模型组;另25只大鼠腹腔注射D-半乳糖42d,并于第13天加灌高脂高糖乳剂30d后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(30mg/kg),制备衰老DM模型大鼠,筛选空腹血糖(FPG)≥11.1mmol/L者为成模鼠。各组大鼠再灌胃生理盐水10d后检测血生化指标。结果①正常对照组和衰老模型组大鼠体重增加幅度类似;衰老DM模型组大鼠于灌胃高脂高糖乳剂后,体重增加幅度显著高于前两组,但于注射STZ10d后体重显著低于前两组。②衰老模型组较正常对照组超氧化物歧化酶(SOD)、胰岛素、高密度脂蛋白(HDL)明显降低,丙二醛(MDA)、胰高血糖素明显升高,并呈现一定程度FPG、糖化血清蛋白(GSP)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)升高和胰高血糖素样多肽(GLP)-1降低;衰老DM模型组上述指标变化更为显著,尤以胰岛素、GLP-1降低,血糖、血脂、胰高血糖素和肿瘤坏死因子(TNF)-α升高更为突出,呈现胰岛素/胰高血糖素严重失衡,糖脂代谢显著异常,类似老年DM特征,其成模机制可能与GLP-1分泌减少,TNF-α释放增加有关。结论采用D-半乳糖+高脂高糖乳剂+STZ,可以较成功诱导出类似老年人DM的衰老DM大鼠模型。

木瓜蛋白酶诱导猪肺气肿模型的建立

目的观察木瓜蛋白酶支气管内注入建立猪肺气肿模型的可靠性。方法分为两组:对照组4只和模型组6只;麻醉动物后,行气管插管,测定各组肺功能、血气分析、CT,然后模型组支气管镜下左肺叶内注入木瓜蛋白酶5 ml(6 U/kg),对照组支气管内注入生理盐水5 ml作为对照,每周一次;于实验结束第五周复测各组肺功能、血气分析、CT及模型组左右肺叶的CT值。分析两组猪血气分析、肺功能、CT值的情况。结果与对照组相比,模型组猪的动脉血气分析PO2降低,PCO2升高;总量、功能残气量、吸气气道阻力、呼气气道阻升高,动态肺顺应性下降,左肺叶CT值较右肺叶下降,比较均有统计学意义;CT示左肺叶内周边肺组织肺纹理减少,肺野透光度明显增强,呈典型的肺气肿的影像学改变。结论木瓜蛋白酶支气管镜下左肺叶内注入法能成功复查猪肺气肿模型。

神经免疫学方法学的应用进展(述评)

对神经免疫学方法学在新方法建立过程中应注意的事项 ,选用方法时应根据需要选用最适当的方法而非越敏感越好 ,实验设组需根据具体情况 ,为说明论点需要最佳的实验设计 ,只有可靠的实验结果、合乎逻辑的推理思路 ,才能得出正确的结论。中枢神经系统病毒感染诊断中病毒抗体滴度测定的临床意义 。

二甲双胍对2型糖尿病大鼠降脂作用的研究

目的观察二甲双胍(Met)对2型糖尿病大鼠糖代谢、脂代谢的影响,探讨其可能的作用机理。方法制备食饵性高脂2型糖尿病大鼠模型,洛伐他汀(Lov)为阳性对照药物,观察二甲双胍对2型糖尿病大鼠血糖、血脂的影响。结果与Lov组相比Met组有明显降低空腹胰岛素,改善胰岛素抵抗的作用;与DM组相比,Met及Lov均可明显降低2型糖尿病伴高血脂大鼠TC、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平。结论 Met可明显降低2型糖尿病伴高血脂大鼠血糖,也可明显降低空腹胰岛素水平,改善胰岛素抵抗;Met能明显改善2型糖尿病伴高血脂大鼠脂质代谢紊乱。

羟基脲

[作用特点]本品是细胞增殖周期“S”期的特异性药物,可抑制核苷向脱氧核苷转化,因而抑制DNA的合成,是毒性较低、缓解迅速、能较长时间服用的抗癌药物。