姜黄素对实验性变态反应性脑脊髓炎模型的干预研究

目的:观察姜黄素对实验性变态反应脑脊髓炎大鼠神经行为学及脑组织病理的影响。方法:采用豚鼠脊髓匀浆诱导EAE模型,治疗组给予姜黄素进行干预,观察行为学变化,LFB染色观察脑组织病理改变。结果:与EAE组相比,姜黄素治疗组临床评分明显下降,病程缩短,而且恢复较快。脑组织未见明显炎性细胞浸润,髓鞘脱失略有减轻。正常对照组未见明显异常。结论:姜黄素能明显改善EAE大鼠临床症状,抑制炎症细胞浸润,促进恢复,对EAE具有一定的治疗作用。

二黄胶囊对实验性变态反应性脑脊髓炎模型大鼠急性期炎性反应和髓鞘修复的影响

目的观察二黄胶囊对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)模型大鼠的保护和治疗作用。方法 通过用豚鼠脊髓匀浆和完全福氏佐剂1∶1混合,制成乳剂作为免疫抗原,给Lewis大鼠4足垫内注射,建立大鼠EAE模型。观察二黄胶囊对EAE大鼠发病情况、神经组织病理变化及其血清髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)水平的影响。结果 二黄胶囊可显著改善EAE的发病程度,降低血清MBP的含量,与模型对照组比较其差异有统计学意义(P<0.05);二黄各剂量组大鼠大脑的2个取材部位、小脑、脑干炎性反应细胞浸润灶计数均明显少于模型对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);二黄各剂量组大脑和小脑、脑干的髓鞘病变灶计数均明显少于模型对照组,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。二黄中剂量组脊髓纵切标本、二黄大、中剂量组脊髓横切标本的髓鞘病变灶计数明显少于模型对照组,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 二黄胶囊对EAE大鼠的体质量、动物发病情况和脑、脊髓病理改变具有明显改善作用。

Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的制备

目的 探讨Wistar大鼠诱导实验性变态反应脑脊髓炎 (EAE)动物模型 ,检测EAE中起关键趋化作用的巨噬细胞趋化因子 - 1(MCP- 1)的表达。方法 采用免疫诱导方法制备EAE模型并苏木素 伊红 (HE)染色 ,同时用原位杂交法检测EAE大鼠MCP -1的表达。结果 免疫后 12～ 17d ,发病鼠出现EAE临床症状 ,HE染色 ,光镜下可见血管周围炎性浸润 ,MCP- 1的表达明显增加。结论 Wistar大鼠成功的诱导实验性变态反应脑脊髓炎模型是可信、可用的。

豚鼠脊髓匀浆诱发大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型

多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是人类中枢神经系统常见的自身免疫性脱髓鞘疾病,其发病机制至今尚未完全阐明.实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)是用于研究MS的模型,本课题应用豚鼠的脊髓匀浆和完全弗氏佐剂(CFA)制成抗原乳剂,再加入百日咳杆菌免疫Wistar大鼠,建立了可靠的EAE模型,报告如下.

实验性变态反应性脑脊髓炎模型研究进展

实验性变态反应性脑脊髓炎是人类多发性硬化的理想动物模型,在临床神经免疫学研究中具有重要意义。本文主要介绍了实验性变态反应性脑脊髓炎模型制备的有关问题,包括敏感动物品系、性别、年龄的选择,抗原的种类及选择,免疫方法,模型的制备及病情评分等。

C57BL/6小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的为更好地研究多发性硬化症(MS)的发病机理、开发具有良好效果的MS治疗药物,建立起能高度模拟人类多发性硬化症发生发展的小鼠模型则显得尤为必要且具有极高的应用价值。本文使用已广泛应用的标准化C57BL/6小鼠作为实验对象,成功地构建了实验性变态反应性脑脊髓炎模型(EAE)。此模型为研究人类多发性硬化症的发病机理及开发相关临床治疗药物提供了良好的小鼠模型。方法 C57BL/6雄性小鼠20只,分为2组。EAE组10只,皮下注射混匀的弗氏不完全佐剂与MOG53-58及结核分枝杆菌的悬浊液,同时分别在day0和day2腹腔注射百日咳毒素0.2μg/只;正常对照组10只,仅注射生理盐水。采用HE染色方法观察小鼠组织学变化;免疫组织化学方法进一步研究小鼠病理变化。结果从抗原免疫后第10天开始EAE组小鼠陆续发生EAE临床症状且发病率达到100%,而正常对照组小鼠未发生任何EAE临床症状。组织病理学结果分析显示,EAE组小鼠脊髓及脑组织中出现大量炎性细胞浸润且脱髓鞘严重。结论本实验成功构建的EAE小鼠模型病程稳定且发病率高,可用于MS机制研究及MS防治药物的筛选。

不同种系动物诱导实验性变态反应性脑脊髓炎模型的研究

目的 :探索国内不同种系动物诱发实验性变态反应性脑脊髓炎 ( EAE)的可能性 ,寻找诱导 EAE的合适实验动物 ,以推进国内临床神经免疫学的研究。方法 :用含异种动物脊髓的完全弗氏佐剂乳化物作为抗原 ,进行动物背部皮下多点注射 ,观察和比较动物的神经症状和病理变化。结果 :( 1)抗原诱导 EAE,如果发病 ,一般都在注射抗原 2周后开始出现症状 ,在注射后 19天左右症状最明显 ,且脑组织出现明显的炎性病理变化。 ( 2 ) SD大鼠的发病率为 13 %,Wistar大鼠的发病率为 3 0 %,昆明种 ( KM)小鼠的发病率为 0。 ( 3 )未发病的 Wistar大鼠再次注射抗原 ,观察 2个月 ,仍未发病。结论 :利用 Wistar大鼠制备 EAE动物模型在国内较适宜 ,而EAE发病的个体差异可能主要受遗传基因的控制。

SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的：探索SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型制作的试验方法与技术。方法：采用完全福氏佐剂一脑脊髓匀浆，并辅以注射百日咳疫苗诱导SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型，比较不同的免疫原（同种或异种），注射方法（一次或多次注射）以及性别差异对模型制作的影响。观察和比较动物的神经症状和病理改变。结果：使用同种脑脊髓匀浆，多次注射雌性SD大鼠诱导的模型，其发病持续时间分别为16～20d，10～14d；发病率为85％；复发率为46．67％，而致死率仅有5．88％；明显优于其他组别。病理学证实发病大鼠具有典型的脱髓鞘改变和胶质结节形成。结论：使用同种脑脊髓匀浆，多次注射雌性SD大鼠诱导的动物模型其临床表现、病理特征、病程特点与人类的多发性硬化具有很大的相似性，适用于多发性硬化的研究。

大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的建立大鼠急性实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型。方法采用豚鼠脊髓和福氏完全佐剂混合乳剂一次性注入Wistar大鼠双足垫和尾部,同时腹腔注射左旋咪唑诱导大鼠发生EAE。观察发病情况;HE染色观察病理变化;Loyez氏髓鞘染色法观察髓鞘改变。结果空白对照组大鼠均未出现症状,HE染色大脑白质及脊髓无炎性细胞浸润;Loyez氏染色未见髓鞘脱失;模型组临床症状发生率为87.5%,HE染色见大脑白质及脊髓血管周围有大量炎性细胞浸润;Loyez氏染色见部分脱髓鞘改变。结论用豚鼠脊髓髓鞘蛋白和福氏完全佐剂混合乳剂同时辅以左旋咪唑成功地诱导Wistar大鼠发生急性EAE。

阿托伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎模型脑组织IL-1β、TNF-α影响的研究

目的探讨实验性变态反应性脑脊髓炎模型(EAE)脑组织细胞因子的变化,探讨阿托伐他汀对EAE发病保护作用的免疫调节机制。方法皮下注射粗制碱性髓鞘蛋白(MBP)建立EAE模型。用40只豚鼠分成4组:正常对照组、EAE对照组、EAE小剂量组和EAE大剂量组,每组10只,雌雄各半,用放射免疫法测定正常对照组、EAE各组高峰期脑组织细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果EAE对照组、EAE小剂量组和EAE大剂量组脑组织细胞因子IL-1β水平分别为2.85±0.70、1.97±0.44、1.57±0.45 ng/mg,显著高于正常对照组0.51±0.02 ng/mg,EAE大、小剂量组脑组织IL-1β水平比EAE对照组低,EAE大剂量组脑组织IL-1β水平比EAE小剂量组低(P<0.05);EAE对照组、EAE小剂量组和EAE大剂量组脑组织细胞因子TNF-α水平分别为2.83±0.90、1.98±0.44、1.46±0.35 ng/mg,显著高于正常对照组水平(1.13±0.28 ng/mg),EAE大、小剂量组脑组织TNF-α水平比EAE对照组低;EAE大剂量组TNF-α水平比EAE低剂量组低(P<0.05)。结论EAE豚鼠存在明显免疫功能紊乱,阿托伐他汀有降低EAE模型脑组织IL-1β、TNF-α水平作用,其对EAE发病的免疫保护机制可能是通过抑制IL-1β、TNF-α产生而发挥。

大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型研究

目的用豚鼠脊髓匀浆诱发实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型。方法应用豚鼠脊髓匀浆加完全弗氏佐剂和百日咳杆菌免疫Wistar大鼠。结果免疫后8～14d大鼠发病,发病率为67%,光镜下病理学证实发病大鼠脑和脊髓内具有典型的脱髓鞘改变和炎性细胞浸润。电镜下也可见到髓鞘结构破坏和神经元轻微改变。结论以豚鼠脊髓匀浆为抗原免疫Wist-ar大鼠可诱发EAE,具有发病率较高、费用低廉、模型稳定的特点,可以作为研究多发性硬化的动物模型。

吲哚美辛对实验性变态反应性脑脊髓炎模型干预研究

目的:观察吲哚美辛对SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗效果,初步探讨其治疗机制。方法:采用同种脑脊髓匀浆诱导实验性变态反应性脑脊髓炎模型,给予吲哚美辛进行实验性干预治疗,观察和比较动物的神经症状和病理改变。用免疫组化法观察各组动物小胶质细胞反应。结果:吲哚美辛可以缓解临床症状、缩短病程、降低实验性变态反应性脑脊髓炎的缓解率、复发率,减轻炎症反应及脱髓鞘(P<0.05)。治疗组大鼠脑组织中小胶质细胞的阳性细胞数在高峰期和未治疗组相比,有统计学意义。结论:吲哚美辛抑制小胶质细胞活性,下调细胞因子TNF-α的水平;从而对实验性变态反应性脑脊髓炎具有保护作用。

SD大鼠缓解-复发型实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的:建立大鼠缓解-复发型实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型,进行病理学研究,为多发性硬化(MS)的研究提供依据。方法:采用大鼠脊髓和弗氏完全佐剂混合乳剂一次性注入SD大鼠双足垫和尾部,1周后半剂量注射进行一次加强,诱导大鼠发生EAE;观察发病情况,HE染色观察病理变化,监牢兰染色观察脱髓鞘情况。结果:空白对照组大鼠均未出现症状,HE染色小脑及脊髓无炎性细胞浸润,监牢兰染色未见髓鞘脱失;模型组临床症状发生率为90%以上,HE染色可见小脑白质及脊髓血管周围有大量炎性细胞浸润,监牢兰染色发现有大片髓鞘脱落。结论:用SD大鼠脊髓髓鞘蛋白和弗氏完全佐剂混合乳剂可诱导同种SD大鼠发生缓解-复发型EAE。

薯蓣皂苷对实验性变态反应性脑脊髓炎模型小鼠损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨薯蓣皂苷治疗实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的效果及其可能机制。方法:40只成年雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和薯蓣皂苷低、高剂量组,以髓鞘碱性蛋白+完全弗氏佐剂构建EAE小鼠模型。LFB和HE染色观察髄鞘和浸润细胞;免疫荧光染色检测T细胞活化标志物(CD4)、巨噬细胞活化标志物(F4/80)、星形胶质细胞标志物(GFAP)、小胶质细胞标志物(IBA-1)的表达;ELISA法检测小鼠血清IFN-γ、IL-17、IL-22、IL-4、NLRP3的表达水平;Western blotting法检测脊髓组织中总蛋白NF-κB、p-NF-κB(细胞核和细胞质)、IFN-γ、IL-17、IL-22、IL-4、NLRP3蛋白的表达水平,采用Trans AMTM NF-κB p65活性检测试剂盒检测NF-κB的活性。结果:与对照组比较,模型组小鼠脊髓组织中CD4、F4/80、GFAP和IBA-1的表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,薯蓣皂苷低、高剂量组CD4、F4/80、GFAP和IBA-1的表达明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠血清和脊髓组织中IFN-γ、IL-17、IL-22、NLRP3的蛋白表达水平均明显升高,而IL-4水平明显降低(P<0.05);薯蓣皂苷低、高剂量组IFN-γ、IL-17、IL-22、NLRP3的蛋白表达水平均明显低于模型组,而IL-4水平明显高于模型组,且呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠脊髓细胞质NF-κB明显降低、细胞核NF-κB明显升高(P<0.05);与模型组比较,薯蓣皂苷低、高剂量组小鼠脊髓细胞质NF-κB明显升高、细胞核NF-κB明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组细胞核中NF-κB p65与DNA结合活性明显增加(P<0.05);薯蓣皂苷低、高剂量组细胞核NF-κB p65与DNA结合活性明显低于模型组(P<0.05)。结论:薯蓣皂苷可能通过抑制p-NF-κB的活化而改善外周血和脊髓组织中炎症因子的表达水平,进而改善EAE小鼠脊髓病理损伤。

Wistar大鼠多病程实验性变态反应性脑脊髓炎的模型建立

目的:建立Wistar大鼠多病程实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的动物模型,并进行病理学研究,为多发性硬化(MS)的研究提供实验依据。方法:以豚鼠全脊髓匀浆(GPSCH)为抗原免疫Wistar大鼠建立EAE的动物模型,并在光镜下观察不同发病类型EAE的病理改变。结果:根据病理和临床表现可将Wistar大鼠EAE模型分为5种发病形式:急性型、缓解-复发型、持续进展型、良性型和隐匿型。光镜下可见不同发病时期的EAE的病理改变有所不同,但都以血管“袖套”状改变、脑室周围及白质有脱髓鞘改变为主,伴有神经元肿胀变性。结论:首次建立了大鼠多病程的EAE,是研究多发性硬化的理想动物模型。

实验性变态反应性脑脊髓炎模型病理及组化研究

为了研究实验性变态反应性脑脊髓炎（ＥＡＥ）的病理、组化的变化，通过对豚鼠ＥＡＥ模型进行普通病理、电镜及单胺类介质荧光组化研究发现，动物发病前的组织虽在光镜下无明显病变，但电镜下可见髓鞘薄层环形结构松散、断裂或融合；薄髓鞘的轴索内可见线粒体肿胀和嵴消失，而厚髓鞘纤维轴索内的线粒体尚完好。病变以脊髓白质为主，脑的病变主要集中于脑室周围。病变以坏死为主，集中于小静脉周围，可见髓鞘脱失；炎细胞包绕小静脉呈袖套样改变。此外，ＥＡＥ神经组织单胺类介质荧光密度显著减少，这可能是引起ＥＡＥ动物肢体运动功能障碍的原因之一。

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠模型的复制

目的 :观察不同的遗传背景 (远交系和近交系 )和饲养环境对Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)发病率的影响 ,摸索EAE模型制作的实验方法与技术。方法 :采用动物行为学、常规HE和LFB染色方法 ,观察不同的遗传背景和饲养环境下豚鼠全脊髓匀浆诱导大鼠EAE的发病情况与中枢神经系统 (CNS)的病理变化。结果 :(1)动物行为学的改变 :各组大鼠EAE发病率、潜伏期和症状评分无显著差异 ,但近交系组发病大鼠可出现四肢瘫痪。 (2 )病理学改变 :每组发病大鼠CNS内可见不同程度的炎性细胞浸润 ;髓鞘染色可见广泛的神经髓鞘变性、脱失 ;而其中近交系组的 5只EAE大鼠髓鞘脱失部位大多局限在炎症改变明显的血管套周围的白质区。结论 :远交系与近交系 ,或清洁级与普通级的Wistar大鼠的EAE的发病率无明显差异 ,而远交系与近交系的不同遗传背景可能会影响大鼠EAE的体征和病理表现。