头孢喹诺治疗奶牛实验性大肠杆菌乳房炎的效果研究

采用泌乳早期日产至少25L的黑白花经产奶牛47头,每头乳牛的2个健康乳区灌注大肠杆菌400～750cfu,并随机分成以下几组:(1)75mg头孢喹诺乳房灌注3次,间隔12h(小时);(2)75mg头孢喹诺乳房灌注3次,间隔12h,同时控体重lmg/kg肌肉注射头孢喹诺2次,间隔24h;(3)按体重1mg/kg肌肉注射头孢喹诺2次,间隔24h;(4)75mg氨苄青霉素和200mg邻氯青霉素乳房灌注3次,间隔12h。所有乳房灌注大肠杆菌的试验牛在12～16h后都出现典型的急性乳房炎临床症状,不经肠投用头孢喹诺治疗(2和3组)明显地提高治愈率并恢复正常乳汁生产。头孢喹诺处理组清菌率显著高于氨苄青霉素和邻氯青霉素处理组,试验结果表明头抱喹诺治疗大肠杆菌性乳房炎效果显著。

上海地区奶牛乳房炎大肠杆菌鉴定及耐药性检测

旨在调查上海地区奶牛乳房炎大肠杆菌的感染情况及其耐药性和携带的毒力基因,为临床大肠杆菌引起奶牛乳房炎的防控供理论依据。采集上海地区2个牛场60头乳房炎患牛的乳样60份,进行细菌分离培养与鉴定及药敏试验,并检测志贺毒素基因stx1、stx2和紧密黏附素基因eaeA。根据测序结果及BLAST比对确定从60份乳样中共检测出20株大肠杆菌,对氧氟沙星和左氟沙星高度敏感(100%),对氨苄西林的耐药率最高(70%),其次为头孢唑啉(55%)。对其毒力基因的检测发现,这20株大肠杆菌eaeA检出率为100%,没有检测到stx1、stx2毒力基因。研究结果为上海地区部分奶牛场大肠杆菌性乳房炎预防及临床用药提供了理论参考。

奶牛大肠杆菌性乳房炎的诊治方法

奶牛乳房炎是危害奶牛养殖业的一种常见疾病,可由多种病原菌,其中以大肠杆菌引起的乳房炎较为常见,发病急、治愈率低,是奶牛淘汰和死亡的重要原因。近年来,由于该病发生率高、易反复,被乳制品业及其工作者重点关注。1流行病学近年来,大肠杆菌引起的乳房内感染和临床乳房炎的发病率均有所增加,特别多发于预防后链球菌和葡萄球菌乳房炎发病率降低的乳用畜群。

一株奶牛乳房炎致病性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验

本试验采集黑河市某奶牛场乳腺炎患病奶牛的牛乳样本,进行病原菌分离和鉴定,通过16S rRNA基因片段扩增和测序鉴定了一株大肠杆菌。以K-B药敏纸片法检测该分离株的药物敏感性,并攻毒小鼠,检测其致病性,结果显示该大肠杆菌分离株耐多种药物,致病性强。

辽宁地区奶牛乳房炎细菌性病原分离鉴定及大肠杆菌药敏试验

为了掌握辽宁地区奶牛乳房炎主要细菌性病原种类及致奶牛乳房炎大肠杆菌药物敏感性特征,本研究选取辽宁地区某大型奶牛场75头临床表现为乳房炎的奶样进行细菌培养与分离,通过生化方法对分离到的细菌进行鉴定,并对分离到的奶牛源大肠杆菌进行体外药物敏感性试验研究。结果发现,该场奶牛乳房炎细菌性病原主要为大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌,其检出率分别为58.7%、64.0%和54.7%,存在二重感染和三重感染等混合感染的情况。大肠杆菌药物敏感性试验结果表明,该场分离株对磺胺类药物(耐药率>85%)及氯霉素类药物(耐药率>30%)耐药性较高,对氨苄西林(9.5%)、环丙沙星(9.5%)、头孢噻呋(7.1%)和氧氟沙星(4.8%)比较敏感。上述研究结果为该地区奶牛乳房炎的防制提供可靠的理论依据。

石河子地区隐性乳房炎奶牛源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解引起石河子地区规模化奶牛场隐性乳房炎奶牛源大肠杆菌的流行情况及其耐药性,本试验采用兰州乳房炎检测板(Lanzhou mastitis test,LMT)对石河子地区11个规模化奶牛场进行了检测,同时对无菌采集的检测为阳性的乳样进行了大肠杆菌分离鉴定及耐药性分析。结果显示,石河子地区11个规模化奶牛场的隐性乳房炎感染阳性率为44.56%(313/1950);对313份无菌采集的乳样进行细菌分离鉴定,结果共分离出病原菌108株,其中大肠杆分离率为14.81%(16/108);药敏试验结果显示16株大肠杆菌对氧氟沙星、头孢唑啉、克林霉素高度敏感,对庆大霉素、氨苄西林、链霉素中度敏感,对阿莫西林、四环素有耐药性。本试验为该地区大肠杆菌源性隐性乳房炎的防制提供科学依据。

新疆石河子地区奶牛乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

本试验旨在调查新疆石河子地区奶牛乳房炎源大肠杆菌的某些生物学特性及其耐药状况,以提高药物疗效,减少牛奶中药物的残留。试验从新疆石河子地区患乳房炎奶牛的乳样中分离纯化并鉴定出21株大肠杆菌,并对大肠杆菌分离株进行抗菌药物敏感性分析。结果表明,21株大肠杆菌对21种抗菌药物中的6种药物耐药率超过50%,其中最多的耐药15种,最少的耐药5种,耐药6及6种以上的菌株共占到76.19%。提示,该地区奶牛乳房炎源大肠杆菌对多种药物已产生了不同程度的耐药性,且存在严重的多重耐药情况。

辽宁地区奶牛乳房炎源大肠杆菌毒力基因及耐药基因检测分析

为了掌握辽宁地区规模奶牛场乳房炎源大肠杆菌携带的毒力基因和耐药基因,为奶牛养殖业提供更好的乳房炎防制方案,本研究采用PCR检测方法对辽宁地区多个规模奶牛场临床奶牛乳房炎奶样中分离的66株大肠杆菌进行了4种毒力基因和4种耐药基因的检测分析。结果发现,66株大肠杆菌中仅有1株未检出相关目的基因,其余65株中最少检出2种目的基因,最多检出7种目的基因。其中,毒力基因stx2e、eaeA、K99和astA的检出率分别为56.1%、47.0%、34.8%和31.8%,双重毒力基因的检出率达到43.9%,以eaeA/stx2e基因型的检出率最高;耐药基因sul3、sul1、cmlA及aacA4的检出率分别为87.9%、83.3%、40.9%和28.8%,双重耐药基因的检出率为36.4%,以sul1/sul3基因型检出率最高;三重耐药基因的检出率为37.9%,以cmlA/sul1/sul3检出率最高。本研究结果证实,辽宁地区奶牛乳房炎源大肠杆菌携带磺胺类耐药基因和氯霉素类耐药基因的比率较高,与大肠杆菌的耐药性有较直接的关系,该结果对于辽宁地区奶牛乳房炎的防制具有重要的指导意义,更具有重要的公共卫生意义。

辽宁地区奶牛临床型乳房炎大肠杆菌的血清型及耐药性调查

对辽宁地区16家规模化奶牛场总计1 609头泌乳期奶牛临床型乳房炎进行了调查,并对患病奶牛乳样进行大肠杆菌的分离、鉴定及药物敏感性试验。结果奶牛临床型乳房炎头发生率为6.96%,乳区发生率为2.35%;共分离鉴定出84株大肠杆菌,分离率为55.63%;血清型鉴定结果表明O51、O148、O60、O21、O77、O17、O6、O158、O101、O12510个血清型为优势血清型。采用肉汤微量稀释法测定21种临床常用抗菌药物对84株大肠杆菌分离株的最小抑菌浓度(MICs),表明分离菌对磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲基异噁唑、甲砜霉素高度耐药;对氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素较敏感。

新疆奶牛乳房炎大肠杆菌种系分类群和基因相似性研究

为了研究新疆地区奶牛乳房炎病例中大肠杆菌的种系分类群及其基因相似性,从新疆4个地区7个牛场奶牛乳房炎奶样分离的大肠杆菌中选出90株,用PCR扩增具有种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2 DNA片段。试验结果显示,所检测菌株中A群占93.33%,B1群占6.67%,未检测到属于B2和D群的肠外毒力株。进一步用RAPD技术分别以3个随机引物对这些菌株进行基因相似性分析并构建系统发育树,当相对基因相似性为0.25时,被检菌株分为10(A-J)个亚群,其中41.1%的菌株属于A亚群,21.1%的属于B亚群,17.8%的属于C亚群,其它20%的菌株不均匀的分布在7(D-J)个亚群中。其中,乌鲁木齐周边3个牛场50%的菌株、伊犁地区55.6%的菌株分布在A亚群,昌吉地区2个牛场66.7%分离菌株平均分布在A亚群和B亚群,库尔勒地区牛场25%分离菌株分布在A亚群,58.3%分布于C亚群。根据种系分类群标记研究结果显示,本次从奶牛乳房炎奶样中分离出的被检菌株均属于共生性大肠杆菌。基因相似性研究结果显示,大部分菌株分布在3个亚群中,不同地区分离菌株的基因相似性存在差异。

奶牛乳房炎大肠杆菌刃天青微量板快速诊断及药敏试验

为了建立奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断与药敏试验方法,用刃天青钠取代大肠杆菌选择培养基MQQ中的酚红指示剂,通过对刃天青的工作浓度、大肠杆菌接种量和培养时间等参数的研究,建立了奶牛乳房炎大肠杆菌刃天青微量板快速诊断方法。将不同细菌及其感染模拟奶样进行刃天青微量板快速培养结果显示,此刃天青微量板对大肠杆菌具有很强的选择培养特性,能在10h内获得明确诊断结果,并能反映奶牛乳腺大肠杆菌感染强度。对89份临床奶样进行大肠杆菌刃天青微量板快速诊断敏感性和特异性检测,结果显示,此刃天青微量板法诊断大肠杆菌阳性奶样敏感性高达100%,诊断大肠杆菌阴性奶样特异性高达94.9%,总符合率高达95.5%。在此基础上用矫正浓度10种抗生素包被微量板,分别用10株大肠杆菌纯培养菌株及其感染模拟奶样和10份大肠杆菌阳性奶样进行快速药敏试验,所获结果与标准纸片扩散法完全一致。这些研究结果表明,本研究建立的刃天青微量板法可以取代常规方法用于奶样大肠杆菌的快速诊断及药敏试验。

奶牛急性大肠杆菌性乳房炎病例

奶牛发生临床型乳房炎时通常可见乳房局部红、肿、热、痛,奶产量下降,但鲜见病牛死亡。笔者遇到却因大肠杆菌性乳房炎导致奶牛死亡的病例,报告如下。1发病及诊疗经过浙江某郊区奶牛场有荷斯坦泌乳奶牛1 300余头。

临床型乳房炎奶牛致病性大肠杆菌血清型研究

为有效防治乳房炎以及进一步研究致病性大肠杆菌的危害性,本研究对呼和浩特市某奶牛场16头患临床型乳房炎的奶牛进行采样分析了致病性大肠杆菌。结果表明,在16份粪样、乳样中致病性大肠杆菌的检出率分别为100%和68.75%,血样中未检出致病性大肠杆菌。经动物试验表明,所检出的致病菌均有强致病力。在血清型鉴定中,粪样中分离鉴定出致病性大肠杆菌为O51、O55、O127、O7、O91、O101、O112、O92、O142血清型较多;乳样中分离出的致病性大肠杆菌为O55、O101、O112、O134、O51、O53、O78、O91、O126、O128、O158血清型较多。且粪样中分离出的致病性大肠杆菌42种血清型,乳样中分离出的致病性大肠杆菌33种血清型中具有25种血清型相同,分别为:O8、O35、O44、O51、O55、O61、O62、O65、O69、O80、O91、O92、O95、O96、O98、O99、O100、O101、O112、O120、O127、O134、O142、O153、O158。因此可见,作为环境性病原菌,大肠杆菌侵入乳房而引发了奶牛乳房炎。

奶牛乳房炎大肠杆菌新疆分离株系统分群及其耐药特性与毒力因子分布研究

本研究利用PCR技术对奶牛乳房炎大肠杆菌新疆临床分离株进行种系分群、耐药基因和毒力基因检测,并测定大肠杆菌对16种抗菌药物的敏感性。从1 068份奶牛乳房炎样品中分离出124株大肠杆菌,分离率为11.6%,其中A群(占58.8%)分布较多,其次是B1群(占16.1%)和D群(占13.7%)及B2群(占11.3%)。药敏结果显示,分离株对常用抗生素表现出不同程度的耐药性,其中对多黏菌素B和氨苄西林的耐药率最高,分别为76.6%和75.8%;多重耐药株中以3~7耐药株较多,最多对15种抗菌药物耐药,药敏表型与基因型基本一致。在分离株中携带的主要毒力基因为irp2(29.8%),其次是ast A(21.7%)、iuc D(14.5%)、afa8E(9.6%)、ehx A(7.2%)、saa(5.6%)和tsh(1.6%),其中毒力基因Irp2在A群的出现频率要高于其他种群,而在A群中出现3种以上的毒力基因组合则少于其他种群。

奶牛乳房炎大肠杆菌的青霉素耐药特征研究

为了研究奶牛乳房炎大肠杆菌的青霉素耐药特征,采用药敏纸片法检测了123株大肠杆菌对青霉素的耐药性,并利用β-内酰胺酶试剂盒测定耐青霉素株β-内酰胺酶活性,同时采用刚果红法和改良结晶紫半定量方法检测生物被膜的形成能力。结果表明:123株受试大肠杆菌中,对青霉素耐药的菌株有122株,耐药率99.19%。122株耐青霉素大肠杆菌中,生物被膜检测为阳性的菌株有92株(75.41%),β-内酰胺酶检测为阳性的有72株(59.02%);β-内酰胺酶阳性而生物被膜阴性的菌株有15株(12.30%),β-内酰胺酶和生物被膜同为阳性的有57株(46.72%);β-内酰胺酶为阴性但生物被膜为阳性的菌株有35株(28.69%)。92株生物被膜阳性菌株中,29株(31.52%)具有强成膜能力,61株(66.30%)具有中等成膜能力,2株(2.17%)成膜能力较弱。说明奶牛乳房炎大肠杆菌对青霉素的耐药率较高;大肠杆菌青霉素耐药性受β-内酰胺酶和生物被膜多种因子的共同调控。

奶牛临床型乳房炎大肠杆菌的分离与鉴定

奶牛乳房炎是奶牛养殖业常见的一种临床疾病,该病是由大肠杆菌、链球菌、葡萄球菌等病原微生物引起的奶牛乳房发炎。该病的发生常常给奶牛养殖业带来极大的损失。本试验采集南京某奶牛场临床型乳房炎患牛的乳汁,并分离到3株细菌,经过对这3株细菌进行分离培养、形态染色、生化试验、药敏试验、致病性试验和血清型鉴定,结果表明这3株细菌均为O2血清型大肠杆菌,为临床预防和治疗提供了依据。

新疆石河子地区某牧场致奶牛乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

本试验在新疆石河子地区某牧场奶牛乳房炎调查的基础上选择24头乳房炎奶牛的36个患乳区乳样进行大肠杆菌的分离与鉴定,共分离出20株菌株。通过形态学特征观察、生化特性鉴定、16S rRNA鉴定,最终确定20株分离菌均为大肠杆菌,并做耐药性分析,为后期奶牛乳房炎治疗做好准备。

驴乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为了查明导致新疆某规模化奶驴场乳房炎的主要病原菌及其生物学特性,试验采用常规微生物学方法对病原菌进行分离,采用生化鉴定管和16SrRNA的PCR扩增方法对病原菌进行鉴定,采用K-B药敏纸片法测定其耐药性,D_(600nm)值绘制细菌生长曲线,最后分析同源性并构建系统进化树。结果显示,分离株为革兰氏阴性短杆菌,能在麦康凯培养基上长出粉红色菌落,在伊红-美兰培养基上长出有金属光泽的菌落;生化鉴定分离株的葡磷胨水、赖氨酸、鸟氨酸、棉子糖、山梨醇、侧金盏花醇、木胶糖试验均呈阳性,而苯丙氨酸和硫化氢试验均为阴性;PCR扩增后测序得到205bp的1号菌株和203bp的2号菌株,其特性符合大肠杆菌的特性;药敏结果表明,分离株对链霉素和氯霉素高度敏感,对青霉素、阿莫西林和庆大霉素耐药;生长曲线表明,分离株在2～16h时为高度繁殖期,16～32h处于稳定期,32h以后开始进入衰退期;1号菌株与2号菌株同源性高达99%,1号菌株与大肠杆菌11J和RCB800的同源性最高(100%);2号菌株与大肠杆菌675SK2和DTU-1的同源性最高(100%);由系统进化树分析可知,1号菌株与大肠杆菌11J和RCB800处于同一个小分支,2号菌株与大肠杆菌675SK2和DTU-1处于同一个小分支。因此,导致本次驴乳房炎的病原菌为大肠杆菌,本研究结果为进一步系统研究导致驴乳房炎大肠杆菌的致病机制提供参考。

新疆部分地区牛场隐性乳房炎奶样中大肠杆菌的分离鉴定与药物敏感性研究

对新疆部分地区8个奶牛场280头奶牛的1020份奶样进行了隐性乳房炎检测和大肠杆菌分离鉴定,并选择部分菌株进行了药物敏感性研究。结果表明:隐性乳房炎奶样中大肠杆菌平均头分离率和乳区分离率为29.64%和11.86%;所分菌株对环丙沙星、头孢噻唑、丁胺卡那、恩诺沙星高度敏感。