诱导小鼠肺泡巨噬细胞产生一氧化氮抑制肿瘤实验性肺转移

本文报道卡介苗(BCG)致敏小鼠雾化吸入基因重组白细胞介素-2(rIL-2)抑制小鼠乳腺癌实验性肺转移。结果显示,小鼠经治疗后肺表面转移瘤结节数显著减少,肺泡灌洗液一氧化氮(NO)含量显著增高。单独雾化吸入rIL-2对部分种瘤小鼠也有一定的抑瘤作用。用NO合成阻断剂(N-单甲基-L-精氨酸,NMA)能几乎完全阻断rIL-2的抑瘤作用。结果表明,雾化吸入rlL-2加BCG处理是治疗小鼠乳腺癌肺转移的一种有效方法,其机制主要是通过诱导活化肺泡巨噬细胞(Mφ)产生NO发挥抑瘤作用。

H_(22)小鼠肝癌细胞接种数与实验性肺转移的相关性

目的:探讨H22小鼠肝癌细胞接种数与实验性肺转移的相关性。方法:昆明种小鼠尾静脉注射不同数量(1×107、7.5×106、5×106、2.5×106、1×106)H22细胞制作实验性肺转移模型,肉眼及镜下观察肺内肿瘤的有无、大小、转移程度及分布情况,血清ICAM-1、IL-2蛋白的表达情况。结果:接种1×107细胞浓度组小鼠肺转移率、恶化程度及血清中ICAM-1蛋白表达的量均高于其他接种组(P<0.01),IL-2蛋白表达低于其他接种组(P<0.01),其中部分小鼠有脑转移。结论:小鼠实验性肺转移的发生率、转移程度及血清中ICAM-1、IL-2蛋白的表达量与细胞接种数变化密切相关。

气管内应用GM-CSF重组腺病毒对实验性肺转移癌的治疗作用

目的 研究气管内应用GM CSF重组腺病毒 (AdGM CSF)对实验性肺转移癌的治疗作用。方法 (1)小鼠气管内滴入AdGM CSF ,ELISA法测定局部及外周血GM CSF及相关因子的水平。 (2 )C5 7BL/ 6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌 3LL细胞建立肺转移癌模型 ,观察气管内应用AdGM CSF对实验性肺转移癌的治疗作用 ,包括肺转移结节、动物存活期、生存率变化等 ,并比较NK细胞和CTL活性的不同。结果 (1)气管内应用AdGM CSF后 72h肺灌洗液中检测到GM CSF且高于外周血水平 ,对照组肺灌洗液及外周血中均未检测到。(2 )气管内滴入AdGM CSF对实验性肺转移癌有治疗作用 ,可使肺转移结节减少 ,动物的生存期延长及存活率升高 ,同时对NK细胞、CTL活性有增强作用。结论 气管内应用GM

精氨酸-天冬氨酸抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移的研究

目的 研究精氨酸 天冬氨酸 (Arg Asp ,RD)抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移 (salivaryadenoidcysticcarcinomalungmetastation ,SACC LM)的作用。方法 观察不同剂量、不同时间RD灌胃对SACC LM的影响。结果 30mg/kg和 12 0mg/kgRD灌胃可抑制SACC LM的形成 ;7 5mg/kg、30mg/kg、12 0mg/kgRD灌胃均可延长SACC LM鼠的生存期。结论 RD毒性小 ,可经口给药 ,具有抗SACC LM的作用。

海参硫酸软骨素抑制小鼠黑色素瘤肺转移作用的研究

目的海参硫酸软骨素(sea cucumber chondroitin sul-fate,SC-CHS)由美国肉参中分离所得,研究其结构及对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞实验性肺转移模型的抑制作用。方法采用MTT法检测了SC-CHS对B16-F10细胞生长的影响;细胞黏附实验研究了SC-CHS对B16-F10细胞黏附能力的影响;体内实验,预先腹腔给药5 d后,建立实验性肺转移模型,继续腹腔注射SC-CHS 20d后,检测小鼠肺转移灶形成,血清中唾液酸的含量、γ-谷氨酰转肽酶活力和肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量。结果实验结果显示SC-CHS体外对B16-F10细胞的生长没有影响,但可以明显降低B16-F10细胞同基质和血管内皮细胞的黏附能力(P<0.05)。SC-CHS剂量组小鼠的肺转移灶数量明显减少(P<0.01),平均转移抑制率为62.66%,血清唾液酸含量和γ-谷氨酰转肽酶活力明显降低(P<0.01),肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量明显下降(P<0.01)。结论 SC-CHS能抑制肿瘤细胞在小鼠体内的转移和生长,其机制可能与降低肿瘤细胞与基质的黏附能力和细胞的转移能力有关。

多西他赛对小鼠肺转移黑色素瘤抑制作用的研究

目的探讨多西他赛(多西紫杉醇)对小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移的抑制作用。方法 MTT法检测多西他赛对小鼠B16-F10细胞生长能力的影响;细胞粘附性实验研究多西他赛对小鼠B16-F10细胞粘附能力的影响;体内实验采用C58BL/6小鼠尾静脉注射B16细胞建立实验性肺转移模型,观察腹腔注射多西他赛对小鼠肺组织肿瘤肺转移结节的影响。结果 20μg/m L多西他赛对小鼠B16-F10细胞的体外生长有一定的抑制作用,并且能够显著降低B16-F10细胞同基质的粘附能力(P<0.05)。l5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L的多西他赛24h对小鼠体外B16-F10细胞的抑制率分别是2.34%、16.27%和41.63%。荷黑色素瘤B16-F10肺转移癌小鼠经腹腔注射5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L三个剂量的多西他赛对肿瘤的抑制率分别为42.70%、15.47%和5.45%,高剂量组(20μg/m L)显示对肺转移黑色素瘤有明显的抑制作用(P<0.05)。结论多西他赛能够抑制小鼠肺转移黑色素瘤,其机制可能与其对B16-F10细胞的粘附能力和生长能力的抑制作用有关。

力达霉素抑制人纤维肉瘤肺转移的裸鼠活体成像观察

观察力达霉素(LDM)、LDM与甲氨蝶呤(MTX)联合用药对人纤维肉瘤HT-1080LUC实验性肺转移的抑制作用。构建稳定表达荧光素酶的HT-1080细胞株并扩增培养,检测HT-1080LUC细胞的荧光素酶的表达。建立裸鼠人纤维肉瘤HT-1080LUC实验性肺转移模型,并采用活体动物成像系统监测肿瘤的生长情况,观察LDM和MTX的体内抗肺转移瘤活性。结果表明,HT-1080LUC细胞荧光光子量与细胞数呈线性相关,最小可检测的细胞数量为100个/孔。活体成像结果显示,治疗组裸鼠的肺部荧光强度较对照组明显减弱。单独给予LDM 0.025 mg.kg-1、LDM 0.05 mg.kg-1或MTX 0.5 mg.kg-1的肺转移抑制率分别为53.9%、75.9%和70.2%;LDM 0.025 mg.kg-1与MTX 0.5 mg.kg-1联合应用的肺转移抑制率为88.7%,两药相互作用指数CDI=0.82。研究表明,LDM对人纤维肉瘤肺转移有明显抑制作用,与MTX联合用药对肺转移瘤的疗效明显优于单独给药。

抗明胶酶单链抗体和力达霉素融合蛋白抗纤维肉瘤HT-1080增殖和转移的实验研究

目的观察抗明胶酶dFv-LDP以及其强化融合蛋白dFv-LDP-AE对人纤维肉瘤HT-1080的生长抑制作用。方法采用蛋白质印迹法分析不同细胞系中明胶酶表达情况,四甲基偶氮唑蓝法分析融合蛋白dFv-LDP以及强化融合蛋白dFv-LDP-AE的对HT-1080的生长抑制作用;酶联免疫吸附法以及免疫荧光分析融合蛋白dFv-LDP和HT-1080的结合能力;流式细胞术分析两者单独或者联合对HT-1080的周期阻滞;评价融合蛋白dFv-LDP和dFv-LDP-AE单独和联合体内抗HT-1080Luc肺转移的活性。结果 HT-1080的明胶酶表达丰度较之其他类型肿瘤明显,酶联免疫吸附法和免疫荧光分析表明融合蛋白dFv-LDP与HT-1080细胞有着良好的亲和力;四甲基偶氮唑蓝法结果显示dFv-LDP-AE对HT-1080体外增殖有着强烈的杀伤作用;FACS表明融合蛋白dFv-LDP和dFv-LDP-AE的联合对细胞周期的阻滞没有明显的增效作用;体内实验性肺转移实验结果表明,融合蛋白dFv-LDP(10 mg.kg-1)组肺部转移灶数目为对照组的55.8%(P<0.01);强化融合蛋白dFv-LDP-AE在0.4和0.6 mg.kg-1剂量下的转移灶数目分别为对照组的41.4%(与dFv-LDP 10 mg.kg-1组相比,P<0.05)和25.1%(与dFv-LDP10 mg.kg-1组相比,P<0.05);联合dFv-LDP后,其肺部转移灶数目为对照组的20.3%(与dFv-LDP-AE 0.4 mg.kg-1组相比,P<0.05)和13.1%(与dFv-LDP-AE 0.6 mg.kg-1组相比,P<0.05),提示联合给药可进一步提高抗转移的效果。结论融合蛋白dFv-LDP联合强化融合蛋白dFv-LDP-AE对裸鼠移植HT-1080实验性肺转移的抑制效果具有增效作用。

蛋白酶活化受体1在B16F10瘤细胞体内外迁移中的作用

目的:研究蛋白酶活化受体 1(PAR1)在肿瘤细胞转移过程中的作用,评估凝血系统与肿瘤转移的关系。方法:首先通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和 Western-blot 方法检测了 siRNA 对 B16F10 黑色素瘤细胞中 PAR1的内源表达的影响,然后在 PAR1 受 siRNA 干扰的情况下检测 B16F10细胞在体内外迁移能力,其结果与未受siRNA 干扰的试验结果相对照,来确定 PAR1 在 B16F10 瘤细胞体内外迁移中的作用。结果:75nmol/L 的 siRNA 干扰48h 后可明显抑制 B16F10中 PAR1 的表达,其转录水平抑制率是60%,蛋白水平的抑制率为85%;体外迁移实验表明,PAR1 表达量减少后与对照组相比细胞迁移能力减弱(P<0.01);动物实验表明.干扰 B16F10细胞中的 PAR1后,肿瘤细胞经血管迁移能力减弱,在肺部形成的转移瘤数目减少(P<0.01)。结论:PAR1 具有促进肿瘤细胞迁移作用。开发 PAR1 封闭剂有望抑制肿瘤转移,可作为研制抗肿瘤转移药物的新靶点。

冬虫夏草对小鼠黑素瘤细胞肺转移的影响

以小鼠黑素瘤细胞肺转移模型，探讨了冬虫夏草热水提取物（HW）的抑制作用。 材料及方法：①材料：培养的冬虫夏草（ Cordyceps sinensis ）菌丝体粉末以90-95℃热水提取3h，过滤、减压浓缩至约1／3量，再以90-95℃杀菌30min，-38℃冷冻干燥得提取物。②实验动物：6周龄C57BL／6雌性小鼠，在恒温恒湿环境下预饲养1周后用于试验。③实验性肺转移抑制试验：将小鼠分成4组，其中3组连续28d口饲溶解于蒸馏水的HWE（分别为100、250、750mg／kg），对照组口饲蒸馏水。肿瘤细胞使用B16-F10黑素瘤细胞株。实验开始后第15日经小鼠尾静脉注射细胞悬液（1×10^5细胞，只），第29日解剖取肺，固定后计数肺表面转移结节数。④自发性肺转移抑制试验：肺高转移性B16-BL6黑素瘤细胞用PBS配制成1×10^7细胞／ml，每只小鼠足跖部皮下注射50μl（5×10^5细胞）。移植后第15日，将小鼠分成4组，其中3组分别连日口饲上述浓度的HWE，对照组口饲蒸馏水。给药后第8日，确认肿瘤生长直径约为1cm后，乙醚麻醉将小鼠右后肢从根部切断，切断部位消毒、缝合。其后2周内继续分别口饲HWE及蒸馏水。移植后5周试验结束，解剖取肺计数肺表面转移结节数。⑤在NK活性抑制状态下，冬虫夏草对实验性肺转移的影响：受试组预饲HWE250mg／kg2周（对照组口饲蒸馏水），抗体给予组（包括口饲蒸馏水的对照组与HWE组）在试验开始后第13日尾静脉注射抗asialo GM1抗体0．3ml。翌日4组均经尾静脉注射B16-F10黑素瘤细胞悬液（1×10^5细胞/只）。继续给药2周，第29日解剖取肺，固定过夜，计数肺表面转移结节数。⑥在巨噬细胞活性抑制状态下，冬虫夏草对实验性肺转移的影响：HWE组小鼠预饲250mg／kg2周，第13日小鼠尾静脉注射2．氯腺苷10μl（2-氯腺苷50μg/只，分组及检测方法同⑤）。