改良的猪胰弹性蛋白酶气压灌注法建立小鼠实验性腹主动脉瘤模型

目的探讨用一种新型的猪胰弹性蛋白酶气压灌注法建立小鼠实验性腹主动脉瘤模型。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为常规模型组(n=15),改良模型组(n=15),改良对照组(n=10)。常规模型组使用猪胰弹性蛋白酶利用水压逆行灌注腹主动脉5min,改良模型组使用猪胰弹性蛋白酶利用气压顺行灌注腹主动脉5min,而改良对照组使用生理盐水气压下顺行灌注5min,14d后,收取腹主动脉标本,测量血管直径,并行EVG染色,进行统计学及组织学评估。结果与常规模型组相比,改良模型组的成瘤率明显增高(P<0.05),血管直径也明显增大[(1.765±0.095)vs.(1.440±0.091)mm,P<0.05],而实验鼠存活率亦明显升高(100%vs.80%)。改良模型组EVG染色显示弹力纤维断裂、降解,符合动脉瘤的病理学特征。结论通过改良设计的新型猪胰弹性蛋白酶气压灌注法高效建立了小鼠腹主动脉瘤模型。

腹主动脉瘤动物模型的研究现状与转化应用

随着我国人口老龄化趋势加剧,腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm, AAA)发病率逐渐升高。由于动脉瘤破裂后死亡率极高,该病已经成为危害我国人群健康的重要疾病之一。在组织病理学上,AAA表现为中膜平滑肌细胞耗竭、弹力纤维断裂和退化、细胞外基质降解和血管局部炎症反应等。目前,临床上AAA的治疗多以血管内介入治疗为主,缺乏药物治疗手段,这也与致病机制迄今未被完全阐明有关。目前AAA动物模型主要以啮齿类实验动物(小鼠、大鼠)为主,也有部分中、大型实验动物(如兔、豚鼠、犬和猪等)。在造模方法上,主要包含弹性蛋白酶动脉腔内灌注法、血管紧张素Ⅱ输注法、氯化钙涂抹法和血管组织移植法等。部分药物或手术AAA模型由于前期诱导刺激的停止,诱导后动脉瘤病变趋于稳定。开发允许AAA持续发展,甚至可以在人为刺激下诱导破裂的,更符合人动脉瘤发展规律的模型是今后的造模研究方向之一。实验动物模型是阐明AAA发病机制、开发治疗动脉瘤新药和评价相关治疗策略安全性的重要研究工具。因此,本文综述了目前常用的AAA造模方法和其在临床前转化研究中的应用。

高风险腹主动脉瘤的预测模型

目的探讨高风险腹主动脉瘤(AAA)的预测模型。方法收集2010年11月至2024年1月于南京医科大学姑苏学院/南京医科大学附属苏州医院/苏州市立医院(本部)收治的136例AAA患者的临床资料,按是否进行手术治疗将其分为高风险组(n=69)和低风险组(n=67)。系统收集患者入院后的临床特征,通过套索回归(LASSO)筛选特征变量,在多因素逻辑回归分析的基础上构建高风险AAA预测模型,通过曲线下面积(AUC)、HosmerLemeshow校准曲线和决策曲线分析(DCA)评估所构建模型的预测效能和临床应用价值。结果单因素分析结果显示,AAA直径、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、甘油三酯(TG)、吸烟、高血压、二甲双胍服药史、抗血小板服药史均是高风险AAA的影响因素(P﹤0.05)。LASSO分析将19个影响因素构建系数分布图,结果显示,最佳变量参数分别为AAA直径、NLR、高血压、二甲双胍服药史,据此构建高风险AAA预测模型,其AUC为0.893(95%CI:0.838~0.947);经Hosmer-Lemeshow检验显示模型拟合良好(P﹥0.05);DCA结果显示,在10%~95%的阈值范围内,高风险AAA预测模型净获益值最高为0.51。结论由AAA直径、高血压、NLR、二甲双胍服药史构建的高风险AAA预测模型能够有效预测AAA患者高风险事件的发生率,可为AAA患者提供更加个体化的风险评估及治疗方案,值得临床推广应用。

3D打印技术在腹主动脉瘤腔内治疗中的应用进展

腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)是最常见的血管疾病之一。AAA的患病率随年龄增加而增加,破裂的风险随动脉瘤直径大小的增加而增加。尽管择期手术的死亡率通常低于4%,但肾下AAA(infrarenal abdominal aortic aneurysm,rAAA)破裂是一种危及生命的紧急情况,即使接受修复死亡率也高达30%~50%^([1])。

腹主动脉瘤腔内修复术后Ⅱ型内漏的影响因素分析

目的探讨腹主动脉瘤(AAA)瘤腔内血栓形态与腹主动脉瘤腔内修复术(EVAR)后发生Ⅱ型内漏的关系。方法收集2018年1月至2022年6月于滨州市第二人民医院和山东第一医科大学附属省立医院接受EVAR治疗的182例AAA患者的临床资料和影像学资料,根据随访期内是否发生Ⅱ型内漏将患者分为Ⅱ型内漏组(n=44)和对照组(n=138)。比较两组患者的临床特征、血液指标、计算机断层扫描血管成像(CTA)影像学特征,筛选EVAR术后发生Ⅱ型内漏的影响因素,建立预测模型并绘制列线图,并通过绘制模型的校准曲线、受试者工作特征(ROC)曲线和临床决策曲线验证预测模型的准确性。结果两组患者的高血压病史、吸烟史、最大横截面血栓厚度、最大横截面血栓面积、血栓体积、最大瘤体直径和腰动脉数量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素分析结果显示,最大横截面血栓厚度厚、最大横截面血栓面积大、血栓体积大均是EVAR术后发生Ⅱ型内漏的保护因素,腰动脉数量多是EVAR术后发生Ⅱ型内漏的危险因素(P﹤0.05)。模型的ROC曲线下面积为0.901。校准曲线显示模型预测曲线与预期曲线重合性较好。临床决策曲线显示,若截断值为4%~98%,则模型的临床有效性较好。结论最大横截面血栓厚度、最大横截面血栓面积、血栓体积和腰动脉数量均是EVAR术后发生Ⅱ型内漏的影响因素,据此构建的预测模型准确性较高,可用于预测EVAR术后Ⅱ型内漏的发生风险。

50岁以上冠心病合并腹主动脉瘤危险因素分析及预测模型的建立

目的:探讨50岁以上冠心病(CHD)病人合并腹主动脉瘤(AAA)危险因素及预测模型的建立。方法:选取2019年1月—2021年12月惠州市第三人民医院心血管内科收治的50岁以上冠心病合并AAA病人57例(冠心病并AAA组),另选同期收治无AAA的冠心病病人171例(冠心病组),比较分析两组病人的临床资料,并通过多因素Logistic回归分析冠心病合并AAA发生危险因素,再根据危险因素的回归系数赋值建立预测模型,预测模型的区分度和拟合优度分别使用受试者工作特征(ROC)曲线、Hosmer-Lemeshow检验评估。结果:冠心病合并AAA组中男性、年龄≥65岁、高血压、饮酒、吸烟病人比例和收缩压、舒张压、中性粒细胞数、淋巴细胞计数均高于冠心病组(P<0.05),糖尿病病人比例低于冠心病组(P<0.05)。男性[95%CI(1.197,2.633)]、吸烟[95%CI(1.197,2.758)]、高血压[95%CI(1.075,2.744)]、饮酒[95%CI(1.066,2.485)]是50岁以上冠心病合并AAA的独立危险因素,且其在预测模型中的评分均为2分,不同风险分层冠心病病人AAA的发生率比较差异有统计学意义(χ2=122.363,P<0.001),基于独立危险因素构建的预测模型的ROC曲线下面积(AUC)为0.931[95%CI(0.887,0.975),P<0.001],Hosmer-Lemeshow检验P=0.374。结论:男性、吸烟、高血压和饮酒会增加50岁以上冠心病病人AAA发生风险,基于危险因素建立预测模型对冠心病病人发生AAA有较高的预测效能,可以快速识别冠心病易发生AAA的高风险人群。

改良腹主动脉瘤大鼠模型的制作方法

目的介绍一种改良腹主动脉腔内灌注猪胰蛋白酶(PPE)制作腹主动脉瘤(AAA)大鼠模型的方法。方法将20只SD大鼠随机为两组,分别是改良腹主动脉腔内灌注PPE组和传统腹主动脉腔内灌注PPE组,每组10只。通过超声测量腹主动脉直径,比较两组大鼠的手术相关指标,大鼠存活率,术后7、14d的AAA成瘤率和腹主动脉扩张率。通过弹性纤维染色和免疫组织化学染色(IHC)染色法观察腹主动脉弹性纤维情况和炎性细胞浸润情况。结果改良腹主动脉腔内灌注PPE组的手术时间明显短于传统腹主动脉腔内灌注PPE组,每只大鼠的PPE用量明显少于传统腹主动脉腔内灌注PPE组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。术后14 d,两组的大鼠存活率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。术后7 d,改良腹主动脉腔内灌注PPE组的腹主动脉扩张率、AAA成瘤率均高于传统腹主动脉腔内灌注PPE组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);术后14 d,改良腹主动脉腔内灌注PPE组的腹主动脉扩张率明显高于传统腹主动脉腔内灌注PPE组,差异有统计学意义(P﹤0.01),但两组的AAA成瘤率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。改良腹主动脉腔内灌注PPE组大鼠AAA内弹性纤维含量明显低于传统腹主动脉腔内灌注PPE组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。每个高倍镜视野下,两组大鼠AAA组织内的巨噬细胞数量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论改良腹主动脉腔内灌注PPE制作AAA大鼠模型具有典型AAA病理特点,该模型制作方法具有成瘤率高、成瘤时间短的优点。

腹主动脉瘤发病机理的实验研究 I.腹主动脉瘤动物模型的建立及改进

目的 :确定建立腹主动脉瘤动物模型时弹力蛋白酶最短灌注时间和腹主动脉最佳游离长度。方法 :80例大鼠随机均分为 1组生理盐水对照组和 7组弹力蛋白酶实验组。灌注时间分别为 10、2 0、30、6 0和 12 0min ,游离长度分别为 0 .5和 1.0cm。术后 14d观察各组大鼠腹主动脉直径扩张率及动脉壁的组织学变化。结果 :≥ 30min组腹主动脉直径平均扩张率均 >10 0 % ,与 10、2 0min及对照组有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;而 30min组与 6 0、12 0min组无明显差异 (P >0 .0 5 )。≥ 30min各组的大鼠腹主动脉中弹力蛋白均严重受损 ,且与游离腹主动脉长度无关。结论 :在弹力蛋白酶诱导的大鼠腹主动脉瘤模型中 ,弹力蛋白酶灌注时间可由 12 0min降至 30min ,游离腹主动脉长度可从 1.0cm缩至 0 .5cm ,不影响腹主动脉瘤的形成。

腹主动脉瘤腔内修复术后Ⅱ型内漏的影响因素分析和预测模型构建

目的探讨腹主动脉瘤(AAA)腔内修复术(EVAR)后发生Ⅱ型内漏的影响因素并构建预测模型。方法收集2018年1月至2022年9月于山东第一医科大学附属省立医院进行EVAR治疗的286例AAA患者的临床资料,根据术后随访期间是否发生Ⅱ型内漏将患者分为对照组(n=210)和Ⅱ型内漏组(n=76)。比较两组患者的临床特征、血液指标、AAA解剖情况及手术情况。分析AAA患者EVAR术后发生Ⅱ型内漏的影响因素,构建预测模型,绘制列线图,构建评分系统,并绘制模型的校准曲线,计算一致性指数(C-index),绘制受试者工作特征(ROC)曲线和临床决策曲线,验证预测模型的准确性和临床有效性。结果两组患者的吸烟史比例、肠系膜下动脉(IMA)开口直径、腰动脉(LA)数量和IMA通畅情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素分析结果显示,吸烟史是AAA患者EVAR术后发生Ⅱ型内漏的保护因素,IMA通畅情况、IMA开口直径和LA数量均是AAA患者EVAR术后发生Ⅱ型内漏的独立危险因素(P﹤0.05)。预测模型的C-index为0.824(95%CI:0.718~0.930),校准后的C-index为0.812(95%CI:0.710~0.914)。ROC曲线下面积为0.824;模型校准曲线显示模型预测曲线与预期曲线的重合性较好;临床决策曲线表明,若截断值为7%~99%,则该模型的临床有效性较好。结论吸烟史、IMA通畅情况、IMA开口直径和LA数量均是AAA患者EVAR术后发生Ⅱ型内漏的影响因素,根据各个影响因素所构建的预测模型的准确性较好,可用于预测AAA患者EVAR术后Ⅱ型内漏的发生风险。

腹主动脉瘤实验动物模型及其研究进展

腹主动脉瘤是一种常见的血管退化性疾病,常引起猝死。目前缺乏有效的早期诊断和防治措施。为进一步提高腹主动脉瘤的诊疗水平,已经建立了多种动物模型。并应用多种技术诱导腹主动脉瘤的产生,以期能够明确其发病机制并发现新的诊治方法。该文总结了诱导腹主动脉瘤动物模型的技术方法并讨论各自的优缺点。

牙周致病菌感染对实验性腹主动脉瘤影响的初步探讨

目的在成功建立牙周致病菌皮下感染和腹主动脉瘤复合动物模型的基础上,初步评价牙周致病菌对腹主动脉瘤形成的作用。方法选择6-8周齢雄性C57BL/6小鼠,皮下金属螺旋管植入3周后,CaCl2涂抹法制备腹主动脉瘤模型,每周在螺旋管内注射牙龈卟啉单胞菌构建牙周致病菌感染模型,第2-7d抽取0.1mL螺旋管内液体进行细菌培养。模型制备8周末处死取血和腹主动脉。腹主动脉行HE染色和弹力纤维染色进行病理分析。酶联免疫吸附测定法测量血清中抗牙龈卟啉单胞菌特异性抗体。结果螺旋管腔内1周内均有活菌检出,血清抗牙龈卟啉单胞菌特异性抗体滴度显著高于非感染组。CaCl2处理8周末,牙龈卟啉单胞菌感染组小鼠的腹主动脉扩张率显著大于未感染组（P〈0.01）。病理结果显示CaCl2处理的两组血管结构均有不同程度的破坏,但牙龈卟啉单胞菌感染组小鼠较未感染组腹主动脉弹力纤维破坏更为显著,部分缺失断裂（P〈0.01）。结论本实验成功建立牙周致病菌慢性感染和腹主动脉瘤的动物模型。牙周致病菌感染可能加速实验性腹主动脉瘤的形成和发展。

金银花当归配伍对实验性腹主动脉瘤大鼠血清中炎症介质的影响及其意义

应用金银花与当归配伍,股主动脉瘤大鼠血清中炎性介质CRP和TNF-α的含量明显下降,动脉壁炎性细胞的浸润程度明显减轻,同时减轻了腹主动脉局部的扩张,其作用优于两种中药的单独应用。指出:解毒活血中药能否减少动脉壁基质金属蛋白酶(MMPs)的释放量,尚须进一步的实验证实。

犬腹主动脉瘤一种新模型的建立

为建立一种供腔内隔绝术 (EVGE)研究的稳定的腹主动脉瘤 (AAA)动物模型的方法 ,采用了 15只犬 ,体重平均 13 5kg ,以牛颈静脉间置法形成保留腰动脉的肾下型腹主动脉瘤。结果动脉瘤形态良好 ,接近临床形态。动脉瘤参数 :近端瘤颈直径为 (6 0± 0 8)mm ;远端瘤颈直径为 (5 7± 0 6 )mm ;瘤体直径为 (2 2 7± 13 3)mm ,长度 (36 1± 17 9)mm。表明本模型设计针对性强 ,制作规范 ,是进行EVGE器具研制开发、AAA血流动力学研究。

补片扩大成型术构建猪腹主动脉瘤腔内治疗模型

目的探索使用补片扩大成型技术建立猪腹主动脉瘤模型,验证其作为动脉瘤腔内修复动物模型的可行性。方法实验猪在全身麻醉下接受腹人工血管补片扩大成型术构建腹主动脉瘤模型,随即进行动脉造影,并实施覆膜支架动脉瘤腔内修复术,术后随访3个月复查造影。结果完成腹主动脉瘤模型建立及腔内修复10例,所有模型建立均获得成功,术中测量肾下腹主动脉直径平均为(10.5±0.4)mm;动脉瘤模型最大直径平均为(26.3±3.1)mm,直径平均增加(15.7±3.1)mm;动脉瘤模型建立前、后的动脉直径差异有统计学意义(P<0.001)。除1例因腔内修复时支架遮盖肾动脉于术后24 h死亡,其余实验猪手术过程平稳,术后恢复良好,随访3个月未发生意外死亡,围手术期1个月及术后3个月生存率均为90%。腔内修复发生Ⅱ型内漏1例(10%),随访3个月造影均无内漏。结论全身麻醉下开腹人工血管补片扩大成型技术构建猪腹主动脉瘤模型安全有效,该模型可作为腹主动脉瘤腔内修复的动物模型。

腹主动脉瘤腔内治疗的实验研究

目的 探讨腹主动脉瘤的腔内血管外科治疗方法。方法 将健康杂种犬 9只通过剖腹手术建立 4个肾动脉平面以下的腹主动脉瘤模型 (Ⅰ组 ) ,5个肾动脉平面以上的腹主动脉瘤模型 (Ⅱ组 ) ,然后经髂动脉给Ⅰ组置入支架型人工血管隔绝其腹主动脉瘤 ,对Ⅱ组则先重建双侧肾动脉和肠系膜上动脉的血流 ,然后再自髂动脉置入支架型人工血管 ,隔绝瘤体。术后观察血管通畅情况及动物存活情况 ,2 ,3个月后处死动物 ,检查支架型人工血管通畅及血管内皮生长情况。结果 腹主动脉瘤成模率为 10 0 % ,术后Ⅰ组 4只犬成活良好 ;Ⅱ组中 1只成活良好 ,另 4只分别于术后 4h ,1d ,3d ,4d后死亡。 2 ,3个月后处死动物 ,解剖发现支架型人工血管通畅 ,主动脉瘤体萎缩 ,光镜和电镜检查显示支架内及支架两端血管内皮生长良好。结论 腔内血管外科技术能有效地治疗主动脉瘤 ,特别是为肾动脉平面以上的主动脉瘤的治疗提供了一种新的方法。

钙盐浸润法制备腹主动脉瘤模型

目的探讨氯化钙浓度对兔腹主动脉瘤模型建立的影响,为腹主动脉瘤的实验研究提供基础。方法选取雄性新西兰大白兔30只,随机分成3组:0.5 mol/L氯化钙组、0.75 mol/L氯化钙组和对照组,分别用含0.5mol/L氯化钙、0.75 mol/L氯化钙和生理盐水的海绵包绕浸润腹主动脉,制备兔腹主动脉瘤模型。术后6周观察各组兔腹主动脉扩张率及动脉壁组织学变化。结果 0.5 mol/L氯化钙组、0.75 mol/L氯化钙组和对照组的腹主动脉扩张率分别为87.31%、124.12%和12.10%,各组间差异有显著性(P<0.01),0.75 mol/L氯化钙组比0.5 mol/L氯化钙组具有更明显的弹性纤维破坏降解、平滑肌细胞减少、腹主动脉扩张。结论 0.75 mol/L氯化钙浸润法是一种简单可行的兔腹主动脉瘤模型制备方法。

改良大鼠腹主动脉瘤模型的建立

目的研究一种简便、稳定、可靠的构建大鼠腹主动脉瘤模型的方法。方法选用SD雄性大鼠50只,随机分为弹力蛋白酶(Elastase)组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组、生理盐水组、正常组,每组10只。五组大鼠分别于术中进行不同处理,术后14 d观察各组大鼠的存活率,计算腹主动脉的直径扩张率,取腹主动脉组织进行HE染色,维多利亚蓝弹力纤维染色以及平滑肌凋亡实验。结果 Elastase组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组、生理盐水组、正常组大鼠的术后存活率分别为:80%,100%,70%,100%,100%;腹主动脉的直径扩张率分别为:220.3%,100%,220.3%,112.3%,100%;HE染色:Elastase组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组的各层结构分界不明显,动脉壁破坏明显,其中CaCl2组和CaCl2+Elastase组炎症细胞浸润增多;维多利亚蓝弹力纤维染色:Elastase组和CaCl2+Elastase组主动脉壁结构紊乱,中膜弹力纤维减少或消失,胶原纤维增多。平滑肌凋亡实验:Elastase组和CaCl2+Elastase组中凋亡小粒明显增多。结论注入20 U Elastase并用浸润有CaCl2溶液的纱布包绕腹主动脉所制作的大鼠腹主动脉瘤模型,较为符合人腹主动脉瘤的病理改变。

血管紧张素Ⅱ和胡索酸-3-氨基丙腈联合诱导小鼠建立腹主动脉瘤模型的特点

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和胡索酸-3-氨基丙腈(BAPN)联合诱导小鼠建立腹主动脉瘤(AAA)模型的特点和可行性。方法实验于2017年1—6月在武汉大学人民医院中心实验室进行。将30只C57BL6小鼠采用随机数字表法分为空白对照组、模型A组和模型B组,每组10只。模型A组小鼠皮下植入微量渗透泵持续泵入AngⅡ(1μg·kg^(-1)·min^(-1))28 d,同时食用含0.25%BAPN饲料饲喂28 d;模型B组小鼠食用含0.25%BAPN饲料饲喂27 d,第28天皮下泵入AngⅡ24 h;空白对照组皮下持续泵入生理盐水,食用普通饲料。动脉瘤破裂死亡小鼠立即取材,第29天仍存活小鼠处死取材。取材后,测量小鼠腹主动脉直径,冰冻切片进行活性氧(ROS)染色,石蜡切片进行弹性纤维染色,免疫组化染色检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达。结果模型A组小鼠AAA发生率为70.0%,高于模型B组小鼠AAA发生率22.2%(P<0.01),模型B组腹主动脉直径与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),模型A组腹主动脉直径大于模型B组(P<0.05);ROS染色显示模型A、B组比对照组腹主动脉组织中ROS表达增多;弹性纤维染色显示模型A、B组与对照组比较弹性纤维有断裂及排列紊乱;免疫组化染色显示模型A、B组比对照组MMP-2表达增多。结论通过血管紧张素Ⅱ持续皮下泵入和BAPN联合可以诱导建立小鼠AAA模型。