轴突生长抑制因子DNA疫苗对大鼠中枢神经系统的影响(英文)

目的探讨轴突生长抑制因子DNA疫苗(pcDNA-NGIs)免疫是否会对中枢神经系统造成损害。方法以pcDNA-NGIs免疫成年Sprague-Dawley大鼠,免疫期间进行实验性自动免疫性脑髓鞘炎评分,同时观察实验动物的感觉运动功能和认知行为。结果以pcDNA-NGIs免疫的大鼠未出现实验性自动免疫性脑髓鞘炎症状。复合神经病学评分、粘附纸条清除试验和开放场地试验表明,pcDNA-NGIs免疫不会损害实验动物的感觉运动功能。另外,被动回避试验和主动回避试验证明,pcDNA-NGIs免疫不会引起学习和记忆障碍。结论pcDNA-NGIs免疫不会损害实验大鼠中枢神经系统。

重组慢病毒GV303 Rat IL-33体外转染原代大鼠骨髓间充质干细胞的研究

目的:探索构建稳定表达IL-33的原代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)细胞系的方法。方法:体外分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,并进行ELISA实验检测转染前IL-33的表达情况。构建GV303 Rat IL-33慢病毒载体,并进行慢病毒的包装。3d后荧光显微镜下观察GFP的表达,分别使用Western blot、ELISA检测转染后的BMSC中IL-33的表达。结果:大鼠BMSC被成功分离并传代,流式细胞术鉴定BMSC可得到CD90、CD29为阳性,CD11b、CD45、CD34为阴性,与之前的文献报道相符。并且BMSC被成功诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞。对转染前的BMSC行ELISA实验检测IL-33的表达,结果为阴性。病毒转染3d后于荧光显微镜下可观察到GFP的表达;ELISA实验检测转染后BMSC中IL-33的表达,结果为阳性;Western blot亦可以检测到IL-33的表达。结论:应用GV303慢病毒载体可以建立稳定表达IL-33的大鼠BMSC原代细胞系。