H_(22)小鼠肝癌细胞接种数与实验性肺转移的相关性

目的:探讨H22小鼠肝癌细胞接种数与实验性肺转移的相关性。方法:昆明种小鼠尾静脉注射不同数量(1×107、7.5×106、5×106、2.5×106、1×106)H22细胞制作实验性肺转移模型,肉眼及镜下观察肺内肿瘤的有无、大小、转移程度及分布情况,血清ICAM-1、IL-2蛋白的表达情况。结果:接种1×107细胞浓度组小鼠肺转移率、恶化程度及血清中ICAM-1蛋白表达的量均高于其他接种组(P<0.01),IL-2蛋白表达低于其他接种组(P<0.01),其中部分小鼠有脑转移。结论:小鼠实验性肺转移的发生率、转移程度及血清中ICAM-1、IL-2蛋白的表达量与细胞接种数变化密切相关。

诱导小鼠肺泡巨噬细胞产生一氧化氮抑制肿瘤实验性肺转移

本文报道卡介苗(BCG)致敏小鼠雾化吸入基因重组白细胞介素-2(rIL-2)抑制小鼠乳腺癌实验性肺转移。结果显示,小鼠经治疗后肺表面转移瘤结节数显著减少,肺泡灌洗液一氧化氮(NO)含量显著增高。单独雾化吸入rIL-2对部分种瘤小鼠也有一定的抑瘤作用。用NO合成阻断剂(N-单甲基-L-精氨酸,NMA)能几乎完全阻断rIL-2的抑瘤作用。结果表明,雾化吸入rlL-2加BCG处理是治疗小鼠乳腺癌肺转移的一种有效方法,其机制主要是通过诱导活化肺泡巨噬细胞(Mφ)产生NO发挥抑瘤作用。

益气养阴方对小鼠肝癌实验性转移的影响

目的:观察益气养阴方对小鼠肝癌实验性转移(血道及淋巴道转移)的影响。方法:血道转移实验为小鼠经尾静脉接种H22肝癌细胞悬液,观察荷瘤小鼠的肺部转移瘤生长情况;淋巴道转移实验以腹水型肝癌H22瘤株在小鼠右下肢爪垫内侧皮下注射接种,观察小鼠实体瘤的瘤重量、抑瘤率、肺部转移率、淋巴结转移情况等指标的变化;同时观察各组小鼠免疫器官的变化。结果:益气养阴方组的肺部转移结节较模型组明显减少,并且可明显改善化疗对机体的免疫损伤。结论:益气养阴方对H22腹水型肝癌血道及淋巴道两种转移途径均有一定的抑制作用,并且增强机体的免疫功能。

气管内应用GM-CSF重组腺病毒对实验性肺转移癌的治疗作用

目的 研究气管内应用GM CSF重组腺病毒 (AdGM CSF)对实验性肺转移癌的治疗作用。方法 (1)小鼠气管内滴入AdGM CSF ,ELISA法测定局部及外周血GM CSF及相关因子的水平。 (2 )C5 7BL/ 6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌 3LL细胞建立肺转移癌模型 ,观察气管内应用AdGM CSF对实验性肺转移癌的治疗作用 ,包括肺转移结节、动物存活期、生存率变化等 ,并比较NK细胞和CTL活性的不同。结果 (1)气管内应用AdGM CSF后 72h肺灌洗液中检测到GM CSF且高于外周血水平 ,对照组肺灌洗液及外周血中均未检测到。(2 )气管内滴入AdGM CSF对实验性肺转移癌有治疗作用 ,可使肺转移结节减少 ,动物的生存期延长及存活率升高 ,同时对NK细胞、CTL活性有增强作用。结论 气管内应用GM

LN—Gps及两种糖结构抑制小鼠黑色素瘤细胞实验性肝转移

本文观察了一种从基底膜的主要成份——层粘连蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）中分离的总糖肽（ＬＮ—Ｇｐｓ）及其糖链中存在的化学合成的四糖结构和酵母甘露聚糖对小鼠体内实验性黑色素瘤Ｂ１６—ＭＢＫ细胞肝转移的影响。将总量１×１０６Ｂ１６－ＭＢＫ细胞（０．５ｍｌ中）与２００μｇＬＮ—Ｇｐｓ（糖肽组）、４ｍｇ四糖（四糖组）或４ｍｇ甘露聚糖（甘露聚糖组）在体外３７℃预温３０ｍｉｎ后，脾内注入，细胞从门静脉流至肝脏。对照组（Ｂ１６细胞＋ＰＢＳ）６只小鼠中４只在接种瘤细胞后５５ｄ内死亡，２只在第５５ｄ处死，解剖发现６只小鼠均在肝中有转移结节形成，瘤结节总数为２—３０个，最大瘤结节融合至整个肝脏；糖肽组５只小鼠无提前死亡，４只无肝转移发生，１只有２个直径＜１ｍｍ的肝转移灶；甘露聚糖组６只小鼠在第５５ｄ时全部存活，解剖仅见１只有２个直径＜１ｍｍ的转移灶；四糖组６只小鼠有１只在第５０ｄ死亡并在肝脏表面有３个瘤结节，最大直径为１×０．８ｃｍ，其余均无肝转移。肝脏湿重对照组显著高于糖肽组、甘露聚糖组及四糖组。本文从肿瘤与基膜相互作用的环节上，探讨了ＬＮ—Ｇｐｓ及两种糖结构的抗黑色素瘤Ｂ１６—ＭＢＫ细胞实验性肝转移作用。

5-杂氮-2'-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响

目的:探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响及可能的机制。方法:将MCF-7细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR,SqRT-PCR)与甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测两组细胞的CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)的mRNA表达与启动子区甲基化状况。然后分别将两组细胞通过边缘尾静脉注射到BALB/c nu/nu裸鼠体内,5周后,用荧光定量RT-PCR(fluorescent quantitative RT-PCR,FqRT-PCR)检测裸鼠肺组织内的目的基因HPRT mRNA丰度。结果:处理组CXCR4mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化;两组BRMS1mRNA表达无明显差异(P>0.05),BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。处理组裸鼠肺脏HPRT mRNA丰度高,转移癌组织较多。结论:5-Aza-CdR通过去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4的表达,从而增强了MCF-7细胞实验性肺转移能力。

乙酰肝素酶的RNA干扰对B16黑素瘤细胞实验性肝转移的影响

目的研究用RNA干扰的方法抑制乙酰肝素酶的表达及其对B16黑色素瘤细胞实验性肝脏转移的影响。方法将HPA siRNA转入B16黑色素瘤细胞,抑制HPA的表达,并测定该细胞的增殖能力及黑色素生成能力;还将RNA干扰的B16黑色素瘤细胞注入小鼠脾脏测定其实验性肝转移的能力,并与对照组比较。结果将HPA siRNA转入B16黑色素瘤细胞,行RNA干扰后获得HPA较低表达的细胞(表达水平为对照组的20%,P<0.01),而黑色素生成及细胞增殖能力不受影响(P>0.05)。将该细胞注入小鼠脾脏后,计数实验性肝转移结节的数目,实验组较对照组肝脏转移结节明显减少(P<0.01)。结论 B16黑色素瘤细胞经RNA干扰后,随着HPA表达的降低,细胞转移能力下降。RNA干扰抑制HPA的表达,是一种理想的抗肿瘤治疗方法。

GFP标记的肿瘤生长和转移的整体荧光成像

Fugene6脂质体介导pEGFP C1转染人源肺癌细胞(SPC A1),经G418抗性筛选和96孔板有限稀释获得稳定高表达GFP的单克隆细胞株SPC A1 EGFP。裸鼠腹腔注射SPC A1 EGFP细胞建立自发转移模型;裸鼠尾静脉注射SPC A1 EGFP细胞建立实验转移模型。利用整体光学成像系统(whole bodyopticalimagingsystem)对荷瘤鼠整体荧光成像。结果表明,整体光学成像系统可实时非侵入监测腹腔肿瘤生长和扩散过程,通过胸腔皮瓣窗(chest wallskin flapwindow)可低侵入检测肺转移。该研究为在体监测原位移植瘤的自发转移和发现抗肿瘤新药物提供了良好实验平台。

去甲斑蝥素抑制B16F10黑色素瘤肺转移的研究

目的探讨去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)对黑色素瘤B16F10细胞侵袭和转移的作用及其机制。方法 MTS考察NCTD对uPA(urokinase type plasminogen activator)诱导B16F10细胞增殖的影响;采用C57BL/6小鼠的实验性转移模型考察NCTD在转移灶对B16F10增殖的影响;计算机虚拟筛选分析NCTD作用靶点;体外考察NCTD对uPA酶活力的影响;Western blot检测癌及癌旁组织uPA及其下游蛋白MMP-2和MMP-9的表达。结果 NCTD与uPA在空间结构上可紧密结合,体外NCTD 10μmol·L-1即能明显抑制uPA酶的活力以及B16F10增殖的能力,体内NCTD 4 mg·kg-1可明显减少B16F10细胞在体内肺转移结节和uPA相关蛋白的表达水平。结论 NCTD具有抗黑色素瘤B16F10细胞转移的作用,其机制可能与抑制肿瘤细胞在转移灶分泌的uPA酶的活力以及降低了uPA蛋白的表达水平有关。

海参硫酸软骨素抑制小鼠黑色素瘤肺转移作用的研究

目的海参硫酸软骨素(sea cucumber chondroitin sul-fate,SC-CHS)由美国肉参中分离所得,研究其结构及对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞实验性肺转移模型的抑制作用。方法采用MTT法检测了SC-CHS对B16-F10细胞生长的影响;细胞黏附实验研究了SC-CHS对B16-F10细胞黏附能力的影响;体内实验,预先腹腔给药5 d后,建立实验性肺转移模型,继续腹腔注射SC-CHS 20d后,检测小鼠肺转移灶形成,血清中唾液酸的含量、γ-谷氨酰转肽酶活力和肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量。结果实验结果显示SC-CHS体外对B16-F10细胞的生长没有影响,但可以明显降低B16-F10细胞同基质和血管内皮细胞的黏附能力(P<0.05)。SC-CHS剂量组小鼠的肺转移灶数量明显减少(P<0.01),平均转移抑制率为62.66%,血清唾液酸含量和γ-谷氨酰转肽酶活力明显降低(P<0.01),肺组织中羟脯氨酸、氨基己糖、糖醛酸的含量明显下降(P<0.01)。结论 SC-CHS能抑制肿瘤细胞在小鼠体内的转移和生长,其机制可能与降低肿瘤细胞与基质的黏附能力和细胞的转移能力有关。

柴胡皂苷A抗抑郁的靶点识别及作用研究

中药柴胡具有改善抑郁患者临床治疗效果的作用,柴胡皂苷A(saikosaponin A,SSA)是柴胡主要药效成分,本研究以SSA为研究对象,利用慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型小鼠悬尾(tail suspension test,TST)和强迫游泳实验(forced swimming test,FST)明确SSA的抗抑郁作用。利用计算机分子对接技术分析并验证SSA的作用靶点,并利用细胞热转移测定实验(cellular thermal shift assay,CETSA)和药物亲和力靶稳定性实验(drug affinity responsive target stability,DARTS)验证SSA的靶标;采用Western blotting等技术研究SSA的抗抑郁作用机制。CUMS模型TST和FST结果表明,与模型组相比,SSA能够显著缩短小鼠的不动时间,表明SSA具有显著的抗抑郁作用。计算机分子对接证明了SSA与催产素受体(oxytocin receptor,OXTR)结合效果较好,表明SSA抗抑郁的作用靶点可能是OXTR。CETSA结果表明在一系列温度梯度处理下,SSA能够明显延缓OXTR的热变性;DARTS实验结果表明,在一系列酶浓度梯度处理下,SSA能够显著降低OXTR对蛋白质水解的敏感性,表明SSA抗抑郁的作用靶点是OXTR。此外,SSA对OXTR下游的ERK通路没有激活作用。本研究表明SSA发挥抗抑郁作用的靶点可能为OXTR,为抑郁症等精神疾病的临床研究治疗和新药开发提供必要的理论与参考依据。

癌细胞体外实验模型及成型技术现状和展望

传统的癌症研究是通过观察实验小白鼠的活体组织切片了解肿瘤的形成及癌症的各阶段发展情况,相比于活体实验,癌细胞的体外实验因为可以灵活地操控实验变量和实时观测癌细胞生长和发育的特点从而得以快速发展.但进一步的研究发现,在诸如培养皿二维环境中培养的细胞的行为在很大程度上与其实际所处的三维环境中的细胞行为有着巨大的差异.因此借助于微加工和微流体技术以及近年来蓬勃发展的生物3D打印技术、飞秒激光直写技术和水凝胶的紫外光固化等技术,越来越多的癌细胞体外三维实验模型得以制造并用于癌症的研究.但同时,现有的技术也面临着精度与速度的矛盾和模型材料的生物相容性等问题.本文讨论了二维及三维癌细胞体外侵袭转移实验的模型及制造技术的优缺点,简要介绍了最新的研究进展,分析提出了未来几年三维实验模型成型技术的发展方向,为相关研究提供新的实验思路.

多西他赛对小鼠肺转移黑色素瘤抑制作用的研究

目的探讨多西他赛(多西紫杉醇)对小鼠B16-F10黑色素瘤肺转移的抑制作用。方法 MTT法检测多西他赛对小鼠B16-F10细胞生长能力的影响;细胞粘附性实验研究多西他赛对小鼠B16-F10细胞粘附能力的影响;体内实验采用C58BL/6小鼠尾静脉注射B16细胞建立实验性肺转移模型,观察腹腔注射多西他赛对小鼠肺组织肿瘤肺转移结节的影响。结果 20μg/m L多西他赛对小鼠B16-F10细胞的体外生长有一定的抑制作用,并且能够显著降低B16-F10细胞同基质的粘附能力(P<0.05)。l5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L的多西他赛24h对小鼠体外B16-F10细胞的抑制率分别是2.34%、16.27%和41.63%。荷黑色素瘤B16-F10肺转移癌小鼠经腹腔注射5μg/m L、10μg/m L、20μg/m L三个剂量的多西他赛对肿瘤的抑制率分别为42.70%、15.47%和5.45%,高剂量组(20μg/m L)显示对肺转移黑色素瘤有明显的抑制作用(P<0.05)。结论多西他赛能够抑制小鼠肺转移黑色素瘤,其机制可能与其对B16-F10细胞的粘附能力和生长能力的抑制作用有关。

川芎嗪对肿瘤介导的血液高凝的影响

目的研究川芎嗪抗肿瘤转移作用与改善肿瘤介导的高凝状态两者之间的相关性。方法采用C57BL6小鼠的实验性转移模型,考察川芎嗪体内对肿瘤血行转移的影响,通过血液APTT、PT、TT、FIB检测考察肿瘤对凝血时间的影响及药物对其的改善作用,同时通过ELISA方法检测血浆t-PA、u-PA、PAI反映纤溶系统的活性变化,测定血浆中纤维蛋白肽A反映纤维蛋白的生成情况,检测血浆中FXⅢ来反映纤维蛋白的稳定程度。结果体内川芎嗪72 mg·kg-1能够抑制B16F10实验转移,明显减少肺转移结节数量。实验性转移模型组与正常组相比,凝血时间明显缩短,表现出血液高凝状态,给予川芎嗪8、24、72 mg·kg-1,不同时间均可以不同程度的延长APTT、PT、TT、FIB,并能抑制纤维蛋白的形成和稳定,进而改善肿瘤引起的血液高凝。结论肿瘤转移会引起血液的高凝,且随着转移时间的延长,血液高凝程度加剧。川芎嗪能够改善肿瘤介导的高凝状态,可能与其抗肿瘤转移作用相关。

离心对脂肪颗粒活性影响的研究

目的:明确离心对脂肪颗粒活性的影响,为脂肪移植术中纯化脂肪颗粒时是否采用离心以及选择最佳离心速率提供参考。方法:将脂肪颗粒经不同高速率(1 000、2 000、3 000、4 000rpm)及不同低速率(600、800、1 000rpm)离心后,即刻进行葡萄糖转移实验——即将每组脂肪颗粒样本分为 12 个标本,每个标本 5ml,置入 10ml 含糖 DMEM 中孵育,1h 后检测其葡萄糖转移量,此值代表各标本的活性,方差分析检验比较各组样本葡萄糖转移量即活性大小。将经不同速率 (600、1 000、2 000、3 000rpm)离心的脂肪颗粒放置 4.5h 后再进行葡萄糖转移实验(方法同上),方差分析检验比较各组脂肪颗粒葡萄糖转移量即活性变化。经静置、3 000rpm 离心的两组脂肪颗粒分别植入 6 只裸鼠背部皮下,每只注射 4 点,每点 0.2ml。15 周后取出移植物,测量残留体积、重量并比较之。每组取两个移植物送病理学检查。结果:脂肪颗粒经不同高、低离心速率处理后的即刻活性随离心速率的增大而显著降低(P<0.05),而经不同高、低离心速率处理再放置 4.5h 后,各离心组样本活性变得差异不显著(P>0.05),但仍较对照组(静置组)明显降低(P<0.05)。静置悬浮和 3 000rpm 离心的两组样本植入裸鼠背部皮下 15 周后,残留体积、重量差异不显著(P>0.05)。

精氨酸-天冬氨酸抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移的研究

目的 研究精氨酸 天冬氨酸 (Arg Asp ,RD)抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移 (salivaryadenoidcysticcarcinomalungmetastation ,SACC LM)的作用。方法 观察不同剂量、不同时间RD灌胃对SACC LM的影响。结果 30mg/kg和 12 0mg/kgRD灌胃可抑制SACC LM的形成 ;7 5mg/kg、30mg/kg、12 0mg/kgRD灌胃均可延长SACC LM鼠的生存期。结论 RD毒性小 ,可经口给药 ,具有抗SACC LM的作用。

抗明胶酶单链抗体和力达霉素融合蛋白抗纤维肉瘤HT-1080增殖和转移的实验研究

目的观察抗明胶酶dFv-LDP以及其强化融合蛋白dFv-LDP-AE对人纤维肉瘤HT-1080的生长抑制作用。方法采用蛋白质印迹法分析不同细胞系中明胶酶表达情况,四甲基偶氮唑蓝法分析融合蛋白dFv-LDP以及强化融合蛋白dFv-LDP-AE的对HT-1080的生长抑制作用;酶联免疫吸附法以及免疫荧光分析融合蛋白dFv-LDP和HT-1080的结合能力;流式细胞术分析两者单独或者联合对HT-1080的周期阻滞;评价融合蛋白dFv-LDP和dFv-LDP-AE单独和联合体内抗HT-1080Luc肺转移的活性。结果 HT-1080的明胶酶表达丰度较之其他类型肿瘤明显,酶联免疫吸附法和免疫荧光分析表明融合蛋白dFv-LDP与HT-1080细胞有着良好的亲和力;四甲基偶氮唑蓝法结果显示dFv-LDP-AE对HT-1080体外增殖有着强烈的杀伤作用;FACS表明融合蛋白dFv-LDP和dFv-LDP-AE的联合对细胞周期的阻滞没有明显的增效作用;体内实验性肺转移实验结果表明,融合蛋白dFv-LDP(10 mg.kg-1)组肺部转移灶数目为对照组的55.8%(P<0.01);强化融合蛋白dFv-LDP-AE在0.4和0.6 mg.kg-1剂量下的转移灶数目分别为对照组的41.4%(与dFv-LDP 10 mg.kg-1组相比,P<0.05)和25.1%(与dFv-LDP10 mg.kg-1组相比,P<0.05);联合dFv-LDP后,其肺部转移灶数目为对照组的20.3%(与dFv-LDP-AE 0.4 mg.kg-1组相比,P<0.05)和13.1%(与dFv-LDP-AE 0.6 mg.kg-1组相比,P<0.05),提示联合给药可进一步提高抗转移的效果。结论融合蛋白dFv-LDP联合强化融合蛋白dFv-LDP-AE对裸鼠移植HT-1080实验性肺转移的抑制效果具有增效作用。

DNTF的核磁表征及理论研究

为了完善3,4-双(4'-硝基呋咱-3'-基)氧化呋咱(DNTF)的核磁表征,采用NMR实验与GIAO-NMR理论计算相结合的方法区分并归属13C和15N的化学位移。采用二甲基亚砜(DMSO-d6)、丙酮(Acetone-d6)和氯仿(CDCl3)为溶剂,进行了DNTF的一维13CNMR和15NNMR实验,并在DMSO-d6中获得DNTF的所有核磁信号。采用二维INADEQUATE实验完成了13CNMR的归属。采用高斯09程序,在DFT-B3LYP/6-311+G(2d,p)水平上优化了DNTF结构,用GIAO方法在不同基组上计算了13CNMR和15NNMR的化学位移,计算结果与实验值一致性较好。结果表明,受氧化呋咱环上氧原子O(22)吸电子作用的影响,C(9)与C(13)的化学位移出现较大的差别,与C(13)相比,C(9)出现在高场。

若干理化因素对脂肪颗粒活性影响的研究

目的:以葡萄糖转移实验检测肿胀液灌注压、注射针管内径,利多卡因、肾上腺素、庆大霉素对脂肪颗粒活性的确切影响,为脂肪移植术中如何控制这些因素提供参考。方法:于同一患者下腹部左右侧分别灌注 1∶1 和 1∶3 的肿胀液,同条件抽取,获两组样本进行葡萄糖转移实验,t 检验比较 2 组样本的葡萄糖转移量即活性有无差异。用侧孔为 2.0mm×5mm 的吸管抽取的脂肪颗粒分 3 组,分别经注射器乳头(内径 2mm)、16 号针头(内径 1.5mm)、12 号针头(内径 1.1mm)注射于培养皿中进行葡萄糖转移实验,方差分析检验比较 3 组样本的葡萄糖转移量即活性有无差异。将同条件获取的脂肪颗粒分 4 组,分别置于含0.08%利多卡因、0.0002%(1/50 万)肾上腺素、1kU/ml 庆大霉素及常规 DMEM(对照组)中进行葡萄糖转移实验,方差分析检验比较前 3 组样本的葡萄糖转移量即活性与对照组有无差异。结果:1∶1 和 1∶3 灌注压下获取的 2 组脂肪颗粒葡萄糖转移量差异不显著(P>0.05);脂肪颗粒的葡萄糖转移量随注射时所经注射器乳头或针管的内径变小而依次降低,差异显著(P<0.05);在含 0.08%利多卡因、0.0002%(1/50 万)肾上腺素、1kU/ml 庆大霉素的 DMEM 中进行孵育的脂肪颗粒的葡萄糖转移量均较对照组显著降低(P<0.05)。

碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌中bla_(NDM)基因型检测及流行病学分析

目的检测上海交通大学附属瑞金医院临床分离碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌产NDM型碳青霉烯酶的情况,研究其流行病学特征。方法收集该医院2013年11月-2015年1月临床分离的18株对亚胺培南或美罗培南药敏纸片抑菌圈直径≤19 mm的大肠埃希菌。采用聚合酶链反应(PCR)检测bla_(NDM)型碳青霉烯酶基因并对阳性产物进行测序以确定基因型别;通过质粒转移接合试验了解耐药基因是否可以通过质粒进行水平传播;应用多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)对产NDM酶的大肠埃希菌进行同源性分析。结果 18株耐碳青霉烯类大肠埃希菌中6株扩增到bla_(NDM)基因,其中4株为bla_(NDM-1),2株为bla_(NDM-5)。6株产NDM酶的大肠埃希菌中3株成功进行转移接合试验,MLST发现6株产酶菌株共分为5个ST型(ST5018,ST354,ST405,ST2967,ST156),与PFGE结果中5种不同的DNA谱型(A^E)相对应,其中2株菌株同为ST5018型且为PFGE-DNA谱型中A型的不同亚型(A1,A2)。结论本研究检出产NDM酶碳青霉烯类耐药大肠埃希菌。bla_(NDM)阳性病例多为散发,但由质粒介导的水平传播在bla_(NDM)的播散中可能起重要作用。上海地区首次检出NDM-5型碳青霉烯酶,应引起重视。