甲醛交联法研究高温条件下大肠杆菌体内小分子热休克蛋白IbpB的客户蛋白

目的：研究高温条件下小分子热休克蛋白IbpB在大肠杆菌体内的客户蛋白以及在此温度下IbpB对其客户蛋白的作用。方法构建表达IbpB蛋白的重组质粒pBAD－ibpB，pBAD质粒为对照，转化到BW25113－ΔibpB菌株。转化pBAD－ibpB质粒的BW25113－ΔibpB菌株在45℃热处理之后加入甲醛进行交联，亲和层析法对交联产物进行纯化，质谱法对捕获的客户蛋白进行鉴定，过氧化氢酶活性测定和蛋白热聚集体分离的方法检测IbpB对其客户蛋白的作用。结果质谱鉴定结果表明IbpB在高温条件下互相作用的客户蛋白主要是过氧化氢酶KatG、色氨酸降解酶TnaA和延伸因子EF－Tu；在ibpB敲除株中回补IbpB可以减少过氧化氢酶在高温条件下的活性丧失，可以阻止TnaA和EF－Tu在高温条件下发生的热聚集。结论 KatG、TnaA和EF－Tu是IbpB在高温条件下相互作用的主要客户蛋白，IbpB在高温条件下对上述客户蛋白具有明显的保护作用。

用全基因组芯片筛选出佐剂性关节炎大鼠滑膜组织中表达热休克蛋白90客户蛋白的基因

目的用全基因组芯片筛选出在类风湿性关节炎发生发展中差异表达热休克蛋白90(HSP90)客户蛋白的基因。方法按照体重将SD大鼠随机分为2组:正常对照组和模型组,每组3只。模型组大鼠左后足皮下注射弗氏完全佐剂0.1 mL制备关节炎模型,正常对照组予以等量0.9%NaCl。造模后第21天,深度麻醉下取2组大鼠滑膜组织,用Array star大鼠全基因组芯片来检测差异表达的信使核糖核酸(mRNA),再根据已知的942个HSP90的客户蛋白进一步筛选对应的mRNA。结果筛选出85个与佐剂性关节炎发生发展有关的差异表达HSP90客户蛋白的mRNA,其中上调53个,倍数最高的是白细胞介素-1β(IL-1β);下调32个,倍数最高的是莫霍克同源框(MKX)。结论在HSP90的客户蛋白中,IL-1βmRNA等53个上调的mRNA和MKX等32个下调的mRNA与佐剂性关节炎发生发展密切相关。

热休克蛋白90α与胃癌的研究进展

热休克蛋白（HSP）是广泛存在于细菌、动物和人体中的热应激蛋白质大家族,主要由热休克或其他一些应激源诱导而发生表达。在生物体内主要能发挥协助蛋白质的折叠、转运、跨膜、稳定构象及细胞的信号传导、损伤保护等＂分子伴侣＂的功能[1-2]。按相对分子质量分为HSP27、HSP60、HSP40、HSP70、HSP90，HSPll0等[3-4]。

肿瘤中胞外热休克蛋白90的研究现状

热休克蛋白90为细胞内一种重要的伴侣蛋白,其可调控众多癌相关客户蛋白的成熟和稳定,不仅在肿瘤细胞内大量存在,同时也存在于肿瘤细胞的胞外空间,即定位在细胞的表面或分泌到细胞外。越来越多的研究表明胞外热休克蛋白90可以促进肿瘤细胞的侵袭和转移,并可作为癌症治疗的一个重要的作用靶点。

基于抗肿瘤活性化合物MED烟酸类衍生物的设计及作用靶点

通过变性荧光素酶的再复性实验发现真菌环氧二烯(Mycoepoxydiene,MED)对热休克蛋白(Heat shock protein 90,Hsp90)具有抑制作用.Western Blot实验结果表明,MED影响人宫颈癌细胞株HeLa中Hsp70及Hsp90的客户蛋白质(Akt,Raf-1)的表达,表明MED是Hsp90的抑制剂.通过靶向对接技术预测了MED与人Hsp90 N端ATP结合位点的结合情况,并在此基础上发现,MED的烟酸类衍生物4-NDM与Hsp90的结合具有比MED与Hsp90更强的亲和作用.体外实验结果证明,MED的烟酸类衍生物4-NDM及3-NDM对HeLa细胞表现出比MED更强的细胞毒活性;可通过上调Hsp70,并下调Akt和Raf-1而影响HeLa细胞中Hsp90相关蛋白质的表达.由此推测,MED及其烟酸类衍生物可以通过抑制Hsp90,而使其客户蛋白Akt或Raf-1发生降解,发挥其抗肿瘤作用.

白念珠菌HSP90的研究进展

调查表明白念珠菌已成为全球第4大致病菌并且有逐年上升的趋势,较多机构已开展白念珠菌致病机制的研究。相关研究表明白念珠菌的热休克蛋白90(HSP90)能促进白念珠菌的形态变化以及耐药形成。本文从蛋白结构、客户蛋白、辅助因子等方面总结了白念珠菌HSP90在调控白念株菌形态变化以及耐药性形成方面的研究进展。

HSP90小分子抑制剂研究进展

HSP90既是细胞应激反应的生物标志物,也是细胞内重要的分子伴侣蛋白。HSP90调控的很多客户蛋白,如EGFR、Met、Raf-1、IKK、p53等,均与肿瘤等疾病的发生和发展关系密切。HSP90抑制剂通过与靶点结合抑制其活性,导致其客户蛋白无法正确折叠而降解,可从多环节多途径影响细胞生物学效应,因此HSP90抑制剂在肿瘤治疗等领域展示出良好应用前景。本文将对近年来重要的小分子HSP90-N端抑制剂的研究进展进行综述。

辅助分子伴侣对HSP90构象功能的调节及其在肿瘤中的作用

热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)作为一种重要的分子伴侣,参与调控众多原癌客户蛋白的折叠、装配和成熟,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)的结合和二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)/ATP的交换是驱动HSP90分子伴侣构象循环的关键要素。其中一些辅助分子伴侣协助HSP90的构象循环过程,参与肿瘤恶性进展。本文对一些常见的辅助分子伴侣,如Hop、CDC37、p23、AHA1和PP5等的结构、功能及其协助HSP90参与肿瘤发生发展的过程进行综述。