蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织NgR、p75NTR表达的影响

目的观察蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑室旁白质软化大鼠脑组织NgR、 p75NTR表达的影响。方法制备宫内感染致脑损伤模型。30只孕鼠于妊娠第16、17天连续2 d给予腹腔注射LPS(350μg/kg),1次/d,设为LPS组;6只注射同等剂量的生理盐水设为对照组。造模成功后选取LPS组孕鼠所产脑损伤仔鼠80只随机分为蒲金口服液高、低剂量组(24、12 g/kg)、银杏叶提取物组、模型组,每组20只,4组各随机分为早期、晚期干预组各10只,早期组于生后第1天给药,晚期组于第8天给药,连续7 d,每日1次。IHC、Western blot检测21日龄4组早、晚期干预仔鼠脑组织NgR、p75NTR的表达。结果与0日龄对照组仔鼠相比,LPS可致仔鼠脑组织中NgR、p75NTR的表达升高(P<0.05);与21日龄模型组相比较,高、低剂量蒲金口服液、银杏叶提取物均能抑制仔鼠脑组织中NgR、p75NTR表达(P<0.05);高剂量蒲金口服液下调NgR、p75NTR的表达作用优于蒲金口服液低剂量和银杏叶提取物(P<0.05)。结论蒲金口服液对早产PVL仔鼠受损神经有保护作用,其机制可能是通过下调NgR、p75NTR的表达,从而抑制髓鞘相关抑制因子与其受体结合形成受体复合体,降低NgR、p75NTR介导的信号通路活性,抑制生长锥的塌陷,促进损伤神经修复。

蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织PSD-95、NMDAR-2B表达的影响

目的:观察蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织突触后致密物95(postsynaptic density-95,PSD-95)、N-甲基-D-天冬氨酸受体-2B(N-methyl-D-aspartate receptor-2B,NMDAR-2B)表达的影响。方法:将18只SPF级雄性大鼠与36只雌性大鼠以12比例合笼饲养,雌鼠受孕后另外饲养。将36只怀孕母鼠分为LPS组(n=30)和对照组(n=6),LPS组孕鼠腹腔注射350μg·kg^(-1)的LPS制作宫内感染动物模型,然后记录孕鼠的分娩时间及新生仔鼠体重,胎龄<22 d为早产仔鼠。将80只LPS组早产仔鼠按随机数字表法分为4组,每组20只,分别为高剂量蒲金口服液组(25 g·kg^(-1))、低剂量蒲金口服液组(12.5 g·kg^(-1))、银杏叶提取物组(3 mg·kg^(-1))、模型组。随机选对照组正常分娩仔鼠20只,设为空白组。每组大鼠中的10只于仔鼠出生第0—7天进行早期药物干预,其余10只于仔鼠出生第7—14天进行晚期药物干预。HE染色观察新生仔鼠脑损伤状况;RT-PCR检测PSD-95 mRNA、NMDAR-2B mRNA表达水平;Western Blot检测脑组织中PSD-95及NMDAR-2B蛋白表达水平。结果:与对照组比较,LPS组活产仔鼠数和仔鼠出生体质量均显著降低(P<0.05);LPS组孕鼠子宫壁充血,胎盘呈老化状态,绒毛间质纤维组织增生,毛细血管管腔变小,子宫和胎盘内可见炎性细胞浸润;LPS组仔鼠脑室旁白质结构稀疏,神经元排列紊乱,出现明显的结构缺陷,少量细胞出现核固缩、溶解的现象。与空白组比较,模型组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);与模型组比较,低、高剂量蒲金口服液组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与同时期低剂量蒲金口服液组比较,高剂量蒲金口服液组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与晚期干预比较,早期干预的低、高剂量蒲金口服液组PSD-95、NMDAR-2B蛋白及mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。结论:蒲金口服液在促进神经细胞恢复方面作用显著,其机制可能与促进PSD-95、NMDAR-2B的表达,改善突触后膜致密物积聚与修复,调节突触可塑性,保持突触的结构完整性有关,且早期、高剂量干预效果更显著。

基于Notch信号通路探讨蒲金口服液对早产仔鼠脑白质损伤的保护作用

目的探讨蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产仔鼠脑白质损伤的保护机制。方法LPS诱导建立宫内感染致脑损伤(PVL)仔鼠模型。造模成功后选取PVL仔鼠48只,随机分为模型组、DAPT组、蒲金口服液组、DAPT+蒲金口服液组,每组12只,另选取正常仔鼠12只作为正常组,于1日龄开始给药,连续干预7 d,于21日龄取材。观察NG2、DYNC1H1阳性表达,Jagged-1、RBP-Jκ、NICD蛋白表达及HES-1、HES-5、TLR 4 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组仔鼠NG2、DYNC1H1阳性表达均降低(P<0.05),Jagged-1、RBP-Jκ、NICD蛋白表达及HES-1、HES-5、TLR 4 mRNA表达均升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组仔鼠NG2、DYNC1H1阳性表达均升高(P<0.05),Jagged-1、RBP-Jκ、NICD蛋白表达及HES-1、HES-5、TLR 4 mRNA表达均降低(P<0.05)。结论蒲金口服液可以通过抑制Notch信号及减轻炎症因子释放而促进少突胶质细胞的分化与成熟,对改善宫内感染/炎症造成的早产PVL有显著作用。