石菖蒲挥发油对宫内感染所致新生鼠肺损伤的作用

目的探讨石菖蒲挥发油(volatile oil of Acorus tatarinowii,VOAT)对宫内感染所致新生鼠肺损伤的作用及可能的机制。方法随机选取6只妊娠15 d的SD大鼠作为对照组,子宫颈内注射大肠埃希菌构建宫内感染大鼠模型,并随机分为模型组及VOAT低、中、高剂量组,每组6只,次日给药,其中VOAT低、中、高剂量组大鼠分别灌胃VOAT 5、10、20 g·kg^(−1)·d^(−1),模型组和对照组大鼠灌胃等量生理盐水,连续给药直至分娩。记录各组新生鼠胎龄;测定新生鼠肺指数;用酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)测定新生鼠血清白细胞介素(interleukin,IL)-21和IL-6、IL-1β水平;苏木素伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测新生鼠肺组织病理学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肺组织中IL-21、IL-21R mRNA的相对表达水平;Western blotting检测肺组织中IL-21、IL-21R、STAT3、p-STAT3蛋白的相对表达量。结果与对照组比较,模型组及VOAT低、中、高剂量组新生鼠胎龄缩短,肺指数降低,血清IL-21、IL-6及IL-1β水平,肺组织中IL-21、IL-21R mRNA的相对表达量及IL-21、IL-21R和p-STAT3蛋白的相对表达量均升高(P<0.05),并出现不同程度的炎性细胞浸润、肺泡壁增厚、肺泡腔变大、结构紊乱等病理学变化;与模型组比较,VOAT低、中、高剂量组新生鼠肺指数升高,血清IL-21、IL-6及IL-1β水平,肺组织中IL-21、IL-21R mRNA的相对表达量及IL-21、IL-21R和p-STAT3蛋白的相对表达量均降低(P<0.05),肺组织病理损伤有不同程度减轻;VOAT对宫内感染所致新生鼠肺损伤的作用效果呈剂量依赖性(P<0.05)。结论VOAT可减轻宫内感染所致新生鼠肺损伤,其作用机制可能与抑制IL-21/STAT3通路激活、降低机体炎症水平有关。

宫内感染所致新生鼠肺损伤及免疫功能行连翘酯苷A通过TLR4/NF-κB/NLRP3轴对的效果分析

探讨宫内感染所致新生鼠肺损伤及免疫功能行连翘酯苷 A 通过 TLR4 / NF-κB / NLRP3 轴对的效果分析。 方法:将健康清洁级雌性大鼠 50 只和雄性大鼠 25 只,均为 8 周龄,行标准饲料喂养,将雌雄大鼠按照 2 ∶ 1 的比例合笼交配,将 40 只妊娠雌鼠作为观察组,子宫颈内注射大肠杆菌稀释液,将另外 10 只雌鼠作为对照组,子宫颈肌肉内注射生理盐水,观察组中随机分为模型组、连翘酯苷 A(FSA)组、脂多糖(LPS)组、LPS+FSA 组,每组各 10 只,直至自然分娩;对比各组新生大鼠的免疫功能指标及 TLR4 / NF-κB / NLRP3 轴相关蛋白表达。 结果:FSA 组血清中 CD4+、CD4+ / CD8+明显高于 LPS 组、LPS+FSA 组及模型组,但低于对照组,CD8+明显低于 LPS 组、LPS+FSA 组及模型组,但高于对照组(P<0.05);FSA 组肺组织中 TLR4、p-p65 和 NLRP3 蛋白相对表达量低于 LPS 组、LPS+FSA 组及模型组,但高于对照组(P<0.05)。 结论:宫内感染所致新生鼠肺损伤行 FSA 治疗,可通过 TLR4 / NF-κB / NLRP3 轴改善免疫功能,增强肺保护作用。

连翘酯苷A通过TLR4/NF/-κB/NLRP3轴对宫内感染所致新生鼠肺损伤及免疫功能的影响研究

探讨连翘酯苷 A 通过 TLR4 / NF-κB / NLRP3 轴对宫内感染所致新生鼠肺损伤及免疫功能的影响研究。 方法:将健康清洁级雌性大鼠 50 只和雄性大鼠 25 只,均为 8 周龄,行标准饲料喂养,将雌雄大鼠按照 2 ∶ 1 的比例合笼交配,将 40 只妊娠雌鼠作为观察组,子宫颈内注射大肠杆菌稀释液,将另外 10 只雌鼠作为对照组,子宫颈肌肉内注射生理盐水,观察组中随机分为模型组、连翘酯苷 A(FSA)组、脂多糖(LPS)组、LPS+FSA 组,每组各 10 只,对比各组新生大鼠血清炎性因子、肺组织中相关蛋白表达。 结果:FSA 组清中 IL-8、IL-6、IL-1β 浓度低于 LPS 组、LPS+FSA 组及模型组,但高于对照组(P<0.05);FSA 组肺组织中 TLR4、p-p65 和NLRP3 蛋白相对表达量低于 LPS 组、LPS+FSA 组及模型组,但高于对照组(P< 0.05)。 结论:FSA 可通过TLR4 / NF-κB / NLRP3 轴对宫内感染所致新生鼠肺损伤产生修复作用,有效降低炎症反应。

宫内感染所致新生鼠肺损伤中MMP-9及MMP-11的表达分析

目的宫内感染所导致的新生鼠肺损伤中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶-11(MMP-11)表达的影响。方法选取健康雌性SD孕鼠,随机分为脂多糖组及对照组。脂多糖组分别在怀孕第19天腹腔注射0.4 mg/kg、0.6 mg/kg、0.8 mg/kg、1.0 mg/kg、1.2 mg/kg的脂多糖溶液,对照组在怀孕第19天注射等量生理盐水溶液。观察并记录不同组别孕鼠死亡率、新生鼠死亡率,HE染色观察肺部的炎症情况,并采用酶联免疫吸附试验检测新生鼠肺叶中MMP-9、MMP-11及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)的表达情况。结果与对照组相比,脂多糖组新生鼠死亡率较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着脂多糖浓度的上升,新生鼠的死亡率逐渐增高,且各组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。脂多糖组新生鼠肺组织中MMP-9、MMP-11、TNF-α、IL-1、IL-6的浓度均高于对照组,具有统计学差异(P<0.05),脂多糖组随着脂多糖浓度的增加,较高浓度的脂多糖组新生鼠肺部MMP-9、MMP-11、TNF-α、IL-1、IL-6的表达均高于上一浓度梯度新生鼠的表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论通过腹腔注射脂多糖能够成功建立宫内感染模型,宫内感染能够导致新生鼠死亡率上升及肺组织损伤,脂多糖组新生鼠肺中MMP-9、MMP-11及炎症因子的表达水平升高,且呈剂量依赖性。

大黄素对脂多糖诱导的新生大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探索大黄素对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤的保护作用。方法 新生大鼠腹腔注射LPS制作建立急性肺损伤模型,每天腹腔注射不同剂量大黄素(emodin, EMD),连续治疗7 d,对照组腹腔注射等体积生理盐水。通过HE、Masson染色进行组织病理学检测,免疫组织化学检测肺组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,原位末端标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡水平,Western Blot检测肺组织Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase 3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平。结果 脂多糖使大鼠肺损伤评分、肺纤维化程度、α-SMA平均光密度、TUNEL阳性率、Collagen I、Collagen Ⅲ、cleaved Caspase3、IL-1β、TNF-α蛋白表达水平较对照组显著增加,大黄素处理能剂量依赖性抑制脂多糖引起的上述变化。结论 大黄素对LPS诱导的新生大鼠急性肺损伤具有保护作用。

白术内酯Ⅰ调节PI3K/Akt/mTOR信号通路对肺脾气虚反复呼吸道感染模型大鼠肺损伤的影响

目的探讨白术内酯Ⅰ调节磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)通路对肺脾气虚反复呼吸道感染(RRTI)模型大鼠肺损伤的影响。方法将84只大鼠随机分为对照组、模型组、白术内酯Ⅰ低剂量组、白术内酯Ⅰ高剂量组、阳性药物组、胰岛素样生长因子1(IGF-1)组、白术内酯Ⅰ高剂量+IGF-1组,每组12只。除对照组外,其他组大鼠均采用疲劳结合饮食失节联合刨花加烟叶烟熏的方法构建肺脾气虚反复呼吸道感染大鼠模型,模型复制成功后,进行给药处理,给药每天1次,持续6周。动物肺功能仪检测大鼠呼气峰流速(PEF)、1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)的变化;检测大鼠肺湿干质量比值变化;HE染色检测各组大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测大鼠肺组织中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western Blot法检测大鼠肺组织中p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠PEF、FEV_(1)、FVC降低(P<0.01),肺湿干质量比值升高(P<0.01);肺组织肺泡间隔变大,肺间质水肿且存在大量炎性细胞浸润;肺组织中IL-6、TNF-α、MDA水平升高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01);肺组织中p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,白术内酯Ⅰ低剂量组、白术内酯Ⅰ高剂量组、阳性药物组大鼠PEF、FEV_(1)、FVC升高,肺湿干质量比值降低(P<0.01);肺组织病理损伤减轻;肺组织中IL-6、TNF-α、MDA水平降低,SOD活性升高(P<0.01);肺组织中p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低(P<0.01),IGF-1组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.01)。与白术内酯Ⅰ高剂量组比较,白术内酯Ⅰ高剂量+IGF-1组大鼠PEF、FEV_(1)、FVC降低,肺湿干质量比值升高(P<0.01);肺组织病理损伤加剧;肺组织中IL-6、TNF-α、MDA水平升高,SOD活性降低(P<0.01);肺组织中p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论白术内酯Ⅰ可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路改善肺脾气虚反复呼吸道感染大鼠肺损伤。

烟雾暴露联合克雷伯杆菌感染诱导大鼠肺小动脉病变的评估

目的分析烟雾暴露联合克雷伯杆菌感染诱导大鼠的肺小动脉形态结构的变化,评估肺小动脉病变的严重程度。方法对烟雾暴露联合克雷伯杆菌感染大鼠的肺组织切片(对照组和模型组)进行分析。维多利亚蓝染色切片用于肺小动脉肌化、血管壁厚度、血管阻塞分值、肌性血管的内膜和中膜厚度以及新生内膜增殖度的检测;HE染色切片用于血管周围炎症细胞浸润及丛状病变等形态的观察和检测;VG染色切片用于内膜胶原纤维和肺小动脉胶原纤维面积百分率的观察和检测。综合以上结果,按照Heath-Edwards标准对肺小动脉病变程度进行评级。结果对于血管直径≤50μm的肺小动脉,与对照组比较,模型组非肌性血管百分率显著减少(P<0.01),肌性血管百分率显著增加(P<0.01),部分肌性血管百分率无显著性差异(P>0.05),非肌性血管壁厚度和肌性血管壁厚度均显著增加(P<0.05,P<0.01),非肌性和肌性肺小动脉血管的阻塞分值均显著增加(P<0.05,P<0.01)。对于50μm<血管直径≤100μm的肺小动脉,与对照组比较,模型组的非肌性血管百分率显著减少(P<0.05),肌性血管百分率和部分肌性血管百分率均无显著性差异(P>0.05),肌性血管壁厚度和血管阻塞分值均显著增加(P<0.05),非肌性血管壁厚度和血管阻塞分值均无显著性差异(P>0.05)。对于血管直径≤50μm或50μm<血管直≤100μm的肺肌性小动脉,与对照组比较,模型组内膜厚度和中膜厚度均显著增加(P<0.05,P<0.01),血管周围炎症浸润分值均显著增加(P<0.05,P<0.01)。对照组(n=9)仅1个切片发现新生内膜,新生内膜增殖度为1.61%。模型组(n=10),5个切片存在新生内膜,新生内膜增殖度从1.04%到17.14%。所有切片均未发现丛状病变。对于血管直径≤100μm的肺小动脉,与对照组比较,模型组内膜胶原纤维表达未观察到变化,血管胶原纤维面积百分率无显著性差异(P>0.05)。按照Heath-Edwards标准,模型大鼠的肺小动脉病变未达到Ⅲ级。结论模型大鼠出现了肺小动脉肌化、内膜和中膜增厚等病理表现,血管周围存在轻度到中度的炎症反应。较低的新生内膜增殖度和未出现胶原纤维表达的变化及未出现丛状病变,提示该模型属于Heath-Edwards标准的II级病变。

早产大鼠宫内感染肺损伤时支气管肺泡灌洗液及肺组织中脂肪型脂肪酸结合蛋白的表达

目的:观察宫内感染肺损伤时脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)在早产大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中的表达,探讨其与新型支气管肺发育不良(BPD)发病的关系。方法:定期受孕的SD大鼠分为LPS组和对照组,于孕15 d羊膜腔内注射LPS或生理盐水。2组动物均于出生后第1天(P1)、第4天(P4)和第7天(P7)各取8只,应用ELISA方法检测BALF中FABP4的含量,采用免疫组化法和RT-PCR技术检测肺组织中FABP4蛋白及mRNA的表达水平。结果:FABP4主要在肺泡巨噬细胞、血管内皮细胞及少量支气管上皮细胞表达。LPS组早产大鼠BALF中FABP4含量、肺组织中FABP4蛋白及mRNA的相对表达量较对照组均升高,且与时间存在交互作用(P均<0.05)。结论:宫内感染肺损伤时FABP4表达升高,可能是引起肺微血管病理性重塑及肺泡化进程受阻,进而导致新型BPD发生发展的重要因素。

清肺解毒汤治疗宫内感染所致新生儿肺损伤的疗效及对患儿血清PAF和SP-A水平的影响

目的探讨清肺解毒汤治疗宫内感染所致新生儿肺损伤的疗效,并分析其对患儿血清血小板活化因子(PAF)、肺表面活性蛋白A(SP-A)水平的影响。方法选取121例宫内感染所致新生儿肺损伤患儿,将其随机分为综合组61例和西医组60例。西医组采用常规西医治疗,综合组在常规西医治疗的基础上给予清肺解毒汤治疗。比较两组患儿治疗前后的肺顺应性、氧合指数、血清PAF和SP-A水平,以及临床疗效、病情恢复情况、并发症及不良反应的发生率。结果治疗10 d后,两组患儿的肺顺应性、氧合指数、血清SP-A水平均升高,而血清PAF水平降低,且综合组的上述指标均优于西医组(均P<0.05)。综合组的总有效率高于西医组,纠正低氧血症所需时间、恢复正常呼吸所需时间、辅助通气时间、住院时间均短于西医组(均P<0.05)。两组的并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05)。两组患儿均未发生明显不良反应。结论在常规西医治疗的基础上加用清肺解毒汤可更有效地改善宫内感染所致新生儿肺损伤患儿的肺功能、血清PAF及SP-A水平,提高治疗效果,促进患儿的病情恢复,且安全性较好。

红景天苷对肺炎支原体感染大鼠肺组织损伤的干预作用

为探讨红景天苷对肺炎支原体(MP)感染大鼠肺组织损伤的干预作用及潜在机理,选取36只Wistar大鼠,并将其随机分为对照组、模型组、红景天苷干预组(注射40 mg/kg红景天苷治疗),每组12只。其中模型组和红景天苷干预组采用滴鼻法建立MP感染大鼠模型。建模后,红景天苷干预组大鼠注射40 mg/kg红景天苷治疗,对照组、模型组注射等剂量的生理盐水,6 d后检测各组大鼠肺组织干/湿比,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,并对各组大鼠肺组织的病理变化进行观察。结果表明,模型组大鼠肺组织干/湿比与对照组相比显著增高(P<0.05),红景天苷干预组大鼠肺组织干/湿比与模型组比较显著降低(P<0.05),模型组大鼠肺泡灌洗液中IL-6、IL-10、TNF-α含量与对照组相比均显著增加(P<0.05),红景天苷干预组肺泡灌洗液中IL-6、IL-10、TNF-α含量与模型组相比均显著减少(P<0.05)。可见红景天苷可以减轻肺炎支原体感染大鼠肺部炎症,对肺部组织起到不同程度的保护作用。

宫内感染产妇血清及羊水Clara细胞蛋白16、肺表面活性蛋白A与新生儿肺损伤的关系

目的探讨宫内感染产妇血清及羊水Clara细胞蛋白16(CC16)、肺表面活性蛋白A(SP-A)与新生儿肺损伤的关系。方法选取2018年1月—2020年9月收治的136例宫内感染产妇及肺损伤新生儿为研究组,70例宫内感染产妇及未发生肺损伤的健康新生儿为对照组。比较两组产妇血清及羊水CC16与SP-A水平,以及新生儿的血气分析指标。分析血清及羊水CC16、SP-A与新生儿肺损伤指标相关性,并应用受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测新生儿肺损伤的价值。结果研究组产妇血清及羊水CC16、SP-A水平均低于对照组(P<0.01)。研究组新生儿动脉血氧分压(PaO_( 2))、血氧饱和度(SaO_( 2))、氧合指数(PaO_( 2)/FiO_( 2))均低于对照组,二氧化碳分压(PaCO_( 2))高于对照组(P<0.01)。宫内感染产妇血清及羊水CC16、SP-A水平与新生儿PaO_( 2)/FiO_( 2)呈正相关(P<0.01)。血清CC16预测新生儿肺损伤灵敏度、特异度分别为75.71%、64.71%,血清SP-A分别为80.00%、75.74%,羊水CC16分别为75.71%、71.32%,羊水SP-A分别为85.71%、78.68%。结论宫内感染产妇血清及羊水CC16、SP-A与新生儿肺损伤密切相关,或可作为预测宫内感染新生儿是否发生肺损伤的辅助指标。

新生大鼠高氧肺损伤血管内皮生长因子蛋白及其mRNA表达变化研究

目的血管内皮生长因子(VEGF)参与肺的发育和损伤修复,VEGF具有促进肺泡和肺血管增殖以及预防新生儿支气管肺发育不良(BPD)的作用。该研究的目的是探讨新生大鼠高氧肺损伤后肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达的变化。方法新生Sprague-Dawley大鼠48只随机分为高氧实验组和空气对照组,高氧实验组吸入95%以上高氧建立高氧肺损伤模型。分别采用免疫组化法和逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测新生大鼠3d,7d,14d肺组织VEGF蛋白及VEGF mRNA表达变化。结果空气对照组新生大鼠生后随着肺发育,肺组织中VEGF蛋白及VEGF mRNA表达逐渐增加。高氧实验组新生鼠吸入高氧3d,肺VEGF蛋白表达出现降低,在7d,14d明显降低与对照组比较差异有显著性(VEGF蛋白:12.67±3.82vs7.79±5.23;15.10±8.91vs5.85±3.37,均P<0.01);高氧实验组VEGF mRNA表达在3d,7d,14d均明显低于对照组(VEGF mRNA:1.19±0.63vs0.78±0.22,1.52±0.47vs0.53±0.18,1.89±0.81vs0.48±0.12,均P<0.01)。结论VEGF能促进新生大鼠肺发育,VEGF蛋白及VEGF mRNA表达与新生大鼠肺发育有密切关系。高氧可抑制VEGF蛋白及VEGF mRNA在新生大鼠肺内的表达,VEGF在新生鼠肺发育和高氧肺损伤发病机制中起重要作用。

宫内感染致脑损伤幼鼠脑组织核因子-κB、肿瘤坏死因子-α表达的变化

目的:通过研究宫内感染致脑损伤幼鼠脑组织核因子-κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况,探讨NF-κB在脑损伤中的作用。方法:取孕龄17、18d(足月为22.5d)的SD大鼠,每次350μg/kg,连续2d腹腔注射脂多磷(LPS),构建宫内感染大鼠模型(LPS组);对照组(NS组)孕鼠腹腔注射同剂量的生理盐水。观察胎盘和仔鼠脑组织的病理改变。分别留取孕20、21d(G20、G21)及生后1、3、7、14d(P1、P3、P7、P14)的新生大鼠脑标本,检测NF-κB及TNF-α的表达情况。结果:LPS组新生大鼠脑组织HE染色可见细胞水肿,组织疏松,细胞数减少。蛋白表达结果显示LPS组NF-κB均值较NS组差异有显著性(F=47.844,P=0.002);LPS组TNF-α较NS组差异有显著性(F=16.863,P=0.015)。LPS组NF-κB、TNF-α mRNA在G20、G21、P1、P3、P7的表达比NS组明显升高,差异有显著性(P<0.05),而在P14两组差异无显著性(P>0.05)。结论:宫内感染后NF-κB信途径被激活,诱导炎性因子大量释放,最终导致脑损伤的发生。

高氧致新生鼠肺损伤时肾组织一氧化氮及氧自由基的变化

目的 观察持续吸入高氧致新生大鼠肺损伤时肾组织自由基的变化,以探讨高氧对肾脏的损伤。 方法 采用高氧致新生鼠肺损伤的模型,将足月新生鼠生后分别在90%±5%氧气(n=140)和正常空气(n=88) 中持续暴露,于1,3,7,14,21d各处死8只,用分光光度计比色法动态测定肺和肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活 性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的变化。结果 高氧暴露3d肺组织SOD的活性开始增高,7d时明显高 于对照组(214±19KNU/gvs186±19KNU/g,P<0.01),并逐渐增高持续至14d(220±15KNU/gvs197±21 KNU/g,P<0.05)和21d(251±15KNU/gvs195±8KNU/g,P<0.01);MDA含量于高氧暴露3d开始增高并高 于对照组(28.1±2.0μmol/gvs21.1±1.3μmol/g,P<0.05),7d最高(30.8±4.2μmol/gvs19.9±2.2μmol/g, P<0.01),14d虽有下降但仍高于对照组(26.3±3.8μmol/gvs22.6±2.3μmol/g,P<0.05);NO水平则于7d 时有所增高并高于对照组(99±8μmol/gvs89±8μmol/g,P<0.05),14d(128±34μmol/gvs93±17μmol/g,P <0.05)和21d(171±34μmol/gvs106±25μmol/g,P<0.01)仍高于对照组。而高氧组肾组织SOD活性的改变 与对照比较无差异,MDA和NO含量改变较肺晚,于吸高氧14d时高于对照(分别为24.1±5.0μmol/gvs16.0± 1.

宫内感染与新生儿脑损伤

宫内感染是导致新生儿脑损伤及神经系统功能障碍的重要危险因素。病毒、细菌和原虫可感染子宫腔并导致胎儿和新生儿脑损伤。炎症反应是宫内感染致新生儿脑损伤的重要致病因素,不同孕期宫内感染导致不同类型脑损害。临床医师应重视孕期宫内感染的预防,有必要进一步加强临床和基础研究,探索宫内感染致新生儿脑损伤的有效干预措施。

水通道蛋白1,5与新生鼠高氧肺损伤肺水肿的关系研究

目的水通道蛋白(aquaporin,AQP)是新近发现的一组与水通透性有关的细胞膜转运蛋白,该文旨在探讨高氧损伤状态下,肺组织内AQP1,AQP5的动态变化规律及其在肺水肿中的作用。方法新生鼠200只,依据吸氧浓度(F iO2)分组:实验组1(F iO2=0.8)、实验组2(F iO2=0.6)、实验组3(F iO2=0.4)、空气对照组(F iO2=0.21)。每组分别于实验后1,3,5,7,14 d行AQP1、AQP5W estern印迹检测,同时检测肺湿/干重比值(wet/dry we ight ratio,W/D),BALF中蛋白含量。结果高氧各组肺W/D比值、BALF中蛋白含量与空气组相比均显著增加,并随吸氧浓度、暴露时间的增加而增加。实验组AQP1第3天表达开始降低,第5天,第7天明显降低(P<0.05),第14天有所恢复。实验组AQP5表达低于对照组,第1,3天呈稍高表达,以后随日龄增加逐渐降低(P<0.05)。总趋势上AQP1,AQP5的表达在实验组3、实验组2、实验组1依次降低。结论AQP1,AQP5在高氧肺损伤时表达降低,并与肺水肿的严重程度相关。

SPF级新生大鼠高氧肺损伤模型的建立

目的建立一种操作简便、性能稳定的新生大鼠高氧肺损伤动物模型。方法①设计制造能自动控制氧浓度的高氧动物饲养舱。②将孕期满21 d出生的SPF级新生大鼠随机分成4组,即：高氧组Ⅰ（入高氧舱中饲养1～7 d）,高氧组Ⅱ（入高氧舱中饲养14 d）,以及相应的空气对照组Ⅰ、Ⅱ,每组14只。舱内氧浓度≥90%,每天23 h。计算肺系数,HE染色与病理学观察。结果高氧组与相应的对照组比较：高氧组大鼠体重轻,肺系数大,HE染色显示部分肺泡萎缩、肺间质及肺泡腔有水肿、出血,中性粒细胞浸润;肺泡发育明显滞后,辐射状肺泡计数明显少。结论本动物饲养舱性能稳定,操作简便;复制的新生大鼠的肺病理变化符合高氧肺损伤的改变。

RAGE与腹腔注射脂多糖诱导新生大鼠急性肺损伤的相关性研究

目的:通过腹腔注射途径建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,探讨其与肺组织晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)的相关性。方法:30只SD新生大鼠随机分为5组,每组6只,根据注射LPS剂量分为0.3、1.0、3.0、9.0 mg/kg组及生理盐水对照组,24 h后观察大鼠的一般情况;ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性RAGE(sRAGE)含量;Western blot法检测肺组织RAGE蛋白水平;real time-PCR法检测RAGE mRNA表达水平;HE染色下对肺组织进行病理学评估。结果:LPS 9mg/kg组死亡率高达83.3%,故未计入实验组;其余4组结果显示,TNF-α水平、肺组织RAGE蛋白、mRNA及肺组织损伤评分随梯度剂量的增加而升高,而BALF中sRAGE水平随剂量增加而降低。结论:腹腔注射LPS可以诱导产生新生大鼠的ALI,LPS剂量为3 mg/kg可作为模型最佳诱导剂量;RAGE可作为ALI的敏感指标。

新生鼠高氧肺损伤中p38MAPK的磷酸化

目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38mitogen-activatedproteinkinase,p38MAPK)在新生鼠高氧肺损伤中的表达及意义。方法160只新生鼠分为空气对照组、高氧肺损伤组、高氧肺损伤+SB203580组和高氧肺损伤+生理盐水组,分别建立动物模型。在12、24、72h和1周4个时相点处死,进行肺组织病理学检查、肺湿/干重比值(W/D)测定、Westernblot法检测p38MAPK的表达。结果高氧暴露72h即可建立肺损伤模型。新生鼠暴露于高氧12h后,p38MAPK开始表达,72h达高峰,后逐渐降低。在高氧暴露72h后,空气对照组未见p38MAPK表达,高氧肺损伤组可见p38MAPK表达;高氧肺损伤+生理盐水组p38MAPK表达明显强于高氧肺损伤+SB203580组。结论p38MAPK参与了新生鼠高氧肺损伤的过程,SB203580可以减轻这种损伤。