孕早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的诊断方法学研究

目的 探讨诊断孕早期HCMV宫内活动性感染的实验方法及其价值。方法 留取 68例有异常妊娠史的早孕妇女绒毛组织 ,分为两份 ,一份提取总RNA ,采用RT PCR检测其中的HCMVmRNA ,一部分制成冰冻切片 ,分别采用原位杂交技术 (ISH)检测HCMVmRNA ,免疫组织化学法检测HCMV早期抗原。结果 采用RT PCR检测到的孕早期绒毛组织HCMVmRNA阳性率为 39 7% ;ISH阳性率为 2 3 5 % ;免疫组化检测HCMV早期抗原阳性率2 2 1 %。RT PCR检出率明显高于ISH(P <0 0 5) ,而ISH与免疫组化的阳性率无显著性差异 (P >0 0 5)。结论 测定绒毛组织中的HCMVmRNA、早期抗原是HCMV宫内活动性感染的客观指标。RT PCR的敏感性最高 ,但ISH与免疫组化可同时作定位、定量观察 ,可操作性强 。

逆转录聚合酶链反应技术用于产前诊断人巨细胞病毒宫内活动性感染的临床价值

目的 探讨逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术用于产前诊断人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的临床价值。方法 应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、RT PCR及血浆套式聚合酶链反应 (N PCR)法 ,检测 2 0 9例孕妇外周血HCMVmRNA、HCMVIgM及HCMVDNA ,其中任意 2项阳性为HCMV活动性感染 (99例 ,观察组 )、任意 2项均阴性为非活动性感染 (110例 ,对照组 )。应用RT PCR和N PCR技术 ,检测两组孕妇从宫内采集的孕早期绒毛共 78例、孕中期脐血和羊水共 131例 ,并追踪胎儿生长发育及出生后情况。结果 (1)观察组绒毛、脐血HCMV感染率分别为 5 3 3% (16 30 )、4 7 8% (33 6 9) ;对照组分别为 8 3% (4 4 8)、9 7% (6 6 2 ) ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1)。观察组绒毛、脐血HCMV活动性感染率分别为 30 0 % (9 30 )和 2 9 0 % (2 0 6 9) ;显著高于对照组的 4 2 %(2 4 8)和 4 8% (3 6 2 ) ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1)。 (2 )HCMVDNA阳性胎儿中 ,HCMVmRNA阳性胎儿的流 (早 )产率为 4 1 2 % (14 34) ,显著高于HCMVmRNA阴性胎儿的 8 0 % (2 2 5 )。HCMV活动性感染胎儿中 ,有 10例因胎儿生长发育异常而行终止妊娠术。结论 应用RT PCR技术产前诊断HCMV宫内活动性感染安全可靠 。

一氧化氮与妊娠早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的关系

目的 探讨一氧化氮与妊娠早期人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的关系。方法 选取既往有自然流产、死胎、胎儿畸形、胎儿生长受限等异常妊娠史并行人工流产术的早孕妇女 81例 ,应用逆转录 聚合酶链反应技术检测其胎盘绒毛组织HCMV mRNA的表达 ;酶联免疫吸附试验法测定其血清HCMV IgM ;原位杂交法检测其蜕膜巨噬细胞诱生型一氧化氮合酶 (iNOS) mRNA的表达并行定量分析。结果 (1) 81例孕妇中有 6例胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性 ,14例血清HCMV IgM阳性 ,阳性率为 17 3 % (14/ 81)。依据HCMV mRNA与HCMV IgM检测结果 ,81例孕妇分为 3组 :Ⅰ组 :HCMV mRNA与HCMV IgM均阳性 5例 ,其宫内传播率为 3 5 7% (5 / 14) ;Ⅱ组 :HCMV mRNA阴性而HCMV IgM阳性 9例 ;Ⅲ组 :HCMV mRNA与HCMV IgM均阴性 66例。另有 1例HCMV IgM阴性者其胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性。 (2 )Ⅰ组患者蜕膜iNOS mRNA呈强表达 ,其吸光度值为 0 412±0 0 19,明显高于Ⅱ组的 0 172± 0 0 3 3与Ⅲ组的 0 167± 0 0 3 3 ,Ⅰ组与Ⅱ组及Ⅲ组比较 ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ;Ⅱ组与Ⅲ组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。 1例HCMV IgM阴性而胎盘绒毛组织HCMV mRNA阳性者 ,蜕膜iNOS mRNA也呈强表达 ,其吸光度值为 0 40 3。结论 一氧化氮可?