中药材木耳中粉螨及害嗜鳞螨孳生情况调查

目的了解中药材木耳中螨类的孳生情况。方法于2015年7月从芜湖市药店和医院中药材仓库采集中药材木耳样本,采用振筛分离法分离螨类并计数,观察害嗜鳞螨各期形态。结果粉螨有9种,检出率为76.67%,平均孳生密度为2.09只/g。中药材木耳中均可见害嗜鳞螨的卵、幼螨、第一若螨、休眠体、第三若螨和成螨等生活史各期。结论中药材木耳中粉螨孳生严重,需采取措施防制该螨的孳生。

储藏小米孳生害嗜鳞螨调查

目的了解储藏小米孳生害嗜鳞螨(Lepidoglyphus destructor)情况,并对害嗜鳞螨进行形态学观察。方法随机选择安徽省临泉县农户30家,每家采集储藏小米1份,每份10g,用直接镜检法进行粉螨分离和标本制备,于光学显微镜下观察螨的形态特征。结果共采集储藏小米30份(300g),其中3份检出害嗜鳞螨,检出率为10%;检获害嗜鳞螨共9 858只,平均孳生密度为328.6只/g,且各发育阶段(成螨、第三若螨、休眠体、第一若螨、幼螨、卵)的害嗜鳞螨均有检获。此外,还分离出马六甲肉食螨(Cheyletus malaccensis)和网真扇毛螨(Eucheyletia reticulata)。上述3种螨分别隶属于粉螨亚目(Acaridida)、食甜螨科(Glycyphagidae)嗜鳞螨属(Lepidoglyphus)的1种及前气门亚目(Trombidiformes)、肉食螨科(Cheyletidae)中的肉食螨属(Cheyletus)和真扇毛螨属(Eucheyletia)。结论安徽临泉县农户储藏小米有害嗜鳞螨孳生,可能与小米营养价值高及储藏环境温湿度适宜等有关。害嗜鳞螨有一定危害性,应采取有效措施防止该螨的扩散污染。

害嗜鳞螨的生活史研究

在25℃、75和85%RH条件下,害嗜鳞螨由印发育到成螨分别需要16.7和13天.在上述条件下,该螨完成一个世代均须经历卵期、幼螨期、幼螨静息期、第一若螨期、第一若螨静息期、第三螨期、第三若螨静息期和成螨期.试验中对于休眠体的形成条件进行了探讨.在第一若螨期与第三若螨期之间未见休眠体产生.害嗜鳞螨雌性成螨一生中须经多次交配,交配后24小时内产卵,产卵期可持续9—13天,每雌产卵量通常为58—145粒,日产卵量为1—12粒不等.无孤雌生殖现象.

某高校食堂害嗜鳞螨孳生调查及形态观察

目的了解高校食堂粉螨的孳生情况。方法采集某市高校食堂揉面机底座周围、储物间面粉袋和米袋周围的地脚粉(米),光镜下观察粉螨的形态特征并进行螨种鉴定。结果共采集到108份样本,101份检测到粉螨,检出率为93.52%;共检获粉螨1 527只,平均孳生密度为1.41只/g。光镜下,害嗜鳞螨的4对足从跗节开始逐渐变细。背毛较长,呈密集的栉齿状并较硬直,腹毛则相对比较光滑且短。顶内毛较长,超出螯肢顶端,侧毛l_3、背毛d_3及d_4和骶内毛sai是躯体上最长的4对刚毛。雌螨较雄螨大,雌螨肛毛较雄螨多1对,雌螨的生殖褶大部分相连,前端有1块新月形生殖板覆盖。结论高校食堂粉螨的孳生情况比较严重,应采取有效的防制措施,以降低粉螨污染带来的危害。

害嗜鳞螨Ⅱ类变应原Lepd d2对过敏性哮喘小鼠的免疫治疗效果分析

目的探讨害嗜鳞螨Ⅱ类变应原Lep d2对尘螨致敏哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法将30只SPF级BALB/c小鼠随机分为PBS组、哮喘组、Lep d2治疗组,于实验开始时及实验第7、14天用尘螨提取液对哮喘组及Lep d2治疗组小鼠腹腔注射致敏,第21天开始雾化吸入激发,连续7 d,第25-27天开始,Lep d2免疫治疗组于雾化前30 min用Lep d2变应原进行免疫治疗,PBS组及哮喘组用PBS进行腹腔注射及雾化吸入。最后1次雾化激发24 h后,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）和血清,并进行脾细胞培养。采用HE染色观察各组小鼠肺组织病理变化;采用ELISA法测定BALF和脾细胞培养液上清中IFN-γ、IL-5、IL-13及血清中特异性Ig E（s Ig E）、s Ig G2a抗体水平。结果哮喘组及Lep d2治疗组小鼠出现哮喘急性发作症状,PBS组未出现该症状。哮喘组肺部炎性细胞浸润明显,PBS组及Lep d2治疗组肺部炎症较轻。Lep d2治疗组BALF和脾细胞培养液上清中IFN-γ浓度均高于哮喘组（P均〈0.01）,但IL-5和IL-13浓度则均低于哮喘组（P均〈0.01）。Lep d2治疗组s Ig E抗体水平低于哮喘组（P〈0.01）;但s Ig G2a抗体水平高于哮喘组（P均〈0.01）。结论害嗜鳞螨Ⅱ类变应原Lep d2疫苗可有效减轻哮喘小鼠肺部炎症。

害嗜鳞螨休眠体光镜下形态观察

目的观察害嗜鳞螨休眠体形态特征,丰富螨的生物学分类依据。方法 2016年9月于淮南某中药店采集燕麦样本10份,每份取10 g,用振筛分离法分离其中的螨,并分离出螨休眠体,制成常规玻片标本,置于光镜下观察其形态并鉴定。结果光镜下发现了害嗜鳞螨的第一若螨和休眠休。发现的害嗜鳞螨休眠体为不活动休眠体,呈无色卵圆形,背面有一条明显的横缝,无口器,足不发达,有2对生殖感觉器。结论观察到的害嗜鳞螨休眠体形态特征,可为该螨的生物学分类和防控提供科学依据。

害嗜鳞螨过敏原Lep d2的原核表达与纯化

目的构建害嗜鳞螨(Lepidoglyphus destructor)过敏原Lep d 2的原核表达系统,获得Lep d 2的重组纯化蛋白。方法通过双酶切pUC-Lep 2质粒,获取基因Lep d 2,并结合高保真PCR获取去信号肽基因rLep d 2,连接载体pET44a并转入表达菌株Rosetta;利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和蛋白免疫印迹法分别进行诱导表达与鉴定;用盐酸胍溶解包涵体并进行透析复性;使用Strep II亲和填料来纯化目的蛋白。结果构建了Rosetta-rLep d 2的原核表达体系;rLep d 2蛋白在菌体内主要表达形式为包涵体,通过透析复性和亲和纯化获得了高纯度的rLep d 2蛋白。结论获得的重组rLep d 2蛋白可为下一步评价其过敏原性提供研究材料。