两种前处理方法对LC-MS/MS测定家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物基质效应的影响

考察了两种前处理方法对采用液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)测定家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物时基质效应的影响。家兔空白血清分别以乙酸乙酯液-液萃取和C18小柱固相萃取,提取前、后各自加入一定浓度的4种淫羊藿黄酮类化合物的混合对照品溶液(淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿素),评价家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的LC-MS/MS测定结果的绝对基质效应、提取回收率和方法过程效率。研究发现,以乙酸乙酯液-液萃取法进行样品前处理后,家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的绝对基质效应大于100%,提取回收率和方法过程效率均较高且稳定;以C18小柱固相萃取法进行样品前处理后,家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的绝对基质效应低于100%,提取回收率和方法过程效率均较低且不稳定。因此,采用乙酸乙酯液-液萃取法进行样品前处理,不仅可以增加LC-MS/MS测定家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的离子化效率,且对淫羊藿黄酮类化合物的提取回收率更高且稳定,适合作为样品前处理方法用于淫羊藿总黄酮苷在家兔体内的药代动力学研究。

羊黑疫单价疫苗的研制及免疫家兔血清抗体测定

从青海省海北州海晏县同宝村绵羊急性死亡病例中分离到一株B型诺维梭菌,利用该分离菌株(TB05)和B型诺维制苗菌株(C61-4)所产毒素经甲醛灭活,分离株加入氢氧化铝胶、磷酸铝胶及明矾佐剂,制苗株(C61-4)加入磷酸铝胶佐剂制备成羊黑疫单价疫苗,对该疫苗分别进行了安全性检验、家兔免疫试验及血清抗体效价测定试验。结果表明,B型诺维梭菌菌液用5%甲醛72 h即可灭活;家兔皮下注射5 m L该疫苗,观察期内无不良反应,安全性良好。家兔免疫试验表明,分离株氢氧化铝苗、磷酸铝苗及明矾苗0.1 m L免疫组免疫21d后,保护力分别为200、200、100 MLD(家兔最小致死量)、0.5 m L组免疫组保护力均为200 MLD,(C61-4)菌株磷酸铝苗0.1 m L免疫组免疫21d后,保护力低于100 MLD、0.5 m L组免疫组保护力为100 MLD。免疫家兔血清抗体测定结果表明,分离株氢氧化铝苗、磷酸铝苗及明矾苗0.1 m L免疫组免疫21 d后,0.1 m L血清中和力分别为300、200、100 MLD(小鼠最小致死量)、0.5 m L组免疫组0.1 m L血清中和力分别为400、300、300 MLD;(C61-4)磷酸铝苗0.1 m L和0.5 m L免疫组免疫21 d后,0.1 m L血清中和力均为100 MLD。上述试验结果表明,用该地方分离株制备的磷酸铝单价疫苗免疫效果优于C61-4株羊黑疫磷酸铝苗。

正脂丸对实验家兔血清脂蛋白胆固醇含量及脂蛋白谱的影响

血脂的异常是动脉粥样硬化病变的主要危险因素,如何有效地将血脂调整在一个比较理想的水平,不仅可以预防动脉粥样硬化病变的发生和发展,而且可以促使已形成的斑块消退,我们观察了中药正脂丸对实验性高脂血症家兔的血脂及血清脂蛋白谱的影响,现将结果报告如下。材料与方法1 材料1.1 动物雄性新西兰大白兔28只,体重2～2.5kg,第一军医大学实验动物研究所提供。1.2 药物与试剂正脂丸(第一军医大学中医系制剂室生产,批号940316,白术、泽泻、山楂、高良姜、鸡内金、三七。

磁水对高脂血症家兔血清中几种微量元素水平影响的观察

已有不少研究指出,微量元素与心血管疾病尤其冠心病的发生与发展有一定关系,本文探讨观察了磁化水和高脂饮食对家兔血清中微量元素 Zn、Cu、Cr 水平的影响,现将结果报道如下。

乳癖消颗粒对家兔乳腺增生的抑制作用

目的:考察乳癖消颗粒对家兔乳腺增生的抑制作用,并探讨其抑制作用的可能机制,为该药临床应用提供理论依据。方法:苯甲酸雌二醇联合黄体酮法构建家兔乳腺增生模型,以逍遥丸、三苯氧胺为阳性对照组,受试药乳癖消颗粒分为低、中、高(0.525,1.05,2.1 g·kg^(-1))剂量组,按组别灌胃30 d,测定家兔血清中的雌二醇(E2)、孕酮(PROG)、催乳素(PRL)、促卵泡生成素(FSH)及促黄体生成素(LH)含量。并对乳腺组织进行病理组织学检查同时检测各组家兔乳腺组织中血管内皮增长因子(VEGF)的含量表达。结果:"保留卵巢-苯甲酸雌二醇联合黄体酮法"可用于构建家兔乳腺增生模型。与模型组比较,乳癖消颗粒可使家兔血清E_2及PRL含量明显下降(P<0.01),PROG含量显著升高(P<0.01或P<0.001)。与模型组比较,乳癖消颗粒高剂量组可恢复到空白对照组家兔的乳腺结构的水平,抗乳腺增生作用优于逍遥丸和三苯氧胺。与模型组比较,各给药治疗组家兔乳腺组织中VEGF的表达均明显下降(P<0.001)。结论:乳癖消颗粒对家兔乳腺增生有较好的治疗作用。乳癖消颗粒对家兔乳腺增生的抑制作用可能与抑制家兔乳腺增生组织中VEGF的表达有关,其抑制水平与三苯氧胺和逍遥丸的抑制水平无差异。

蝮蛇抗栓酶对家兔慢性胆囊炎防治的实验研究

蝮蛇抗栓酶对家兔慢性胆囊炎防治的实验研究中国人民解放军第四０六医院许传喜，徐宏玺，白云，谢贵荣，王永相慢性胆囊炎为国内外常见病和多发病，随着生活水平的提高，本病的发病率将不断增加。目前治疗本病的药物均不够理想，故研究防治本病的药物是一个重要的课题。蝮...

川芎嗪抑制家兔实验性动脉粥样硬化斑块形成的机制探讨

本文采用48只日本大白耳纯系家兔,随机分成4组,观察在实验性动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)形成过程中川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TTMP)对前列腺素(Prostaglandin,PG)代谢的作用及其在AS防治中的意义。

动物血清灌流离体蛙心的试验观察

生理学工作者在做离体蛙心灌流实验时，一直采用任格氏（英国生理学家Ringer）液灌流离体蛙心。任格氏液的理化特性很不稳定，影响实验效果。根据动物愈高等，血清蛋白愈复杂，血清营养愈丰富的原理，改用蟾蜍血清灌流液和家兔脱纤血清灌流液，做离体蛙心灌流试验，取得良好效果。其中家兔脱纤血清灌流液的效果最好，可防止蛙心停搏，提高其兴奋性；可节省时间，提高实验效率。

1型肺炎兔抗血清的制备及其在多糖含量检测中的质控研究

建立一种新的1型肺炎兔抗血清制备方法,并进行型别特异性和方法专属性分析后,用于1型肺炎球菌多糖结合及结合疫苗制备过程中多糖含量的测定。以确定的免疫程序,用自制肺炎1型多糖结合物免疫新西兰白兔,采血后分离血清,免疫血清以免疫双扩散法和ELISA法与商品诊断血清比较;以速率比浊法分析型特异性和方法专属性。建立了自制家兔兔抗血清的制备方法,且该血清优于商品诊断血清,可达到速率比浊法型特异性和相应方法专属性要求,该方法可用于对1型肺炎球菌结合物及结合疫苗多糖含量测定。研究结果为肺炎球菌结合疫苗中多糖含量的检测提供了有力的保障。

绞股兰皂甙药动学研究

绞股兰皂甙（Gypenside）Ⅲ、Ⅳ、Ⅷ、Ⅶ分别与人参皂甙Rb1、Rb3、Rd、F2的化学结构相同,其甙元绝大部分均属人参二醇类。广东蔡氏培植的绞股兰优良品种总皂甙含量高达5～6％,其中人参二醇和2α-羟基人参二醇达2.5％左右。 人参二醇甙口服生物利用率很低,故我们采用肌肉注射给药途径,应用TLCS单波长锯齿扫描,以人参二醇和2α-羟基人参二醇为对照晶定量,研究了绞股兰皂甙体内动力学,现将实验结果报导如下:

ABC-ELISA检测华支睾吸虫抗体的动态研究

本文报道了用ABC-ELISA观察人工感染华支睾吸虫家兔血清特异性抗体的变化。结果表明,抗体最早出现阳性时间在感染后第14d,轻、重感染组抗体高峰时间分别在第10周和第8周,以后呈下降趋势。抗体水平与虫卵计数呈直线正相关,重感染组平均阳性时间提前,平均光密度值(OD)高。实验结果还表明,抗体应答表现与宿主个体反应性有关,但主要取决于感染度。

双降茶对调节血脂代谢的药理实验

双降茶由中药钩藤、决明子、山楂、甘草和茶叶等制成的茶剂。已有报道其具有降压和降血脂作用。本文作了双降茶对血脂代谢影响的药理实验,现分析如下。一、材料雄性Wistar大鼠60只,体重156±SD19g,由上海市放射医学研究所提供;双降茶茶剂由福州屏山制药厂提供;氯贝丁酯(clofibrate)由北京制药厂提供;高脂饲料配方为胆固醇1.5％。

23F型肺炎球菌家兔免疫血清的制备及其在免疫学方法中的特异性研究

目的:制备23F型肺炎球菌家兔免疫血清,进行型特异性和相关方法专属性分析后,用于23F型肺炎球菌结合物制备过程多糖抗原性分析及结合疫苗质控。方法:以已确定的免疫程序用自制菌液耳缘静脉免疫青紫兰家兔,采血后分离血清,免疫血清以免疫双扩散法和ELISA与商品诊断血清比较;以ELISA和速率比浊法分析型特异性和相应方法专属性。结果:建立家兔免疫血清制备方法并制备合格家兔免疫血清,其效价高于商品诊断血清;建立分析型特异性和相应方法专属性的ELISA和速率比浊法;合格免疫血清可用于对23F型肺炎球菌结合物及结合疫苗质控。结论:自制家兔免疫血清优于商品诊断血清,可达到ELISA和速率比浊法型特异性和相应方法专属性要求,可用于对23F型肺炎球菌结合物制备过程的多糖抗原性分析及结合疫苗质控。

上海市郊商品兔中弓形虫感染情况初探

1990年Splendors报告了从兔体内分离出弓形虫,此后,世界各地相继报告了家兔和野兔中弓形虫感染及病的流行。1943年Marotel报告在饲养场的兔有30％因弓形虫病而死亡。我国学者于思庶于1957年从福建兔等动物体内首先分离出弓形虫,1965年又用染色试验检查154只家兔血清,阳性率为11.7％。1979年江苏农科院以IHA检测南京市郊商品兔201只,阳性率13.4％。 1986年我们采用IHA、IFA、ELISA、DT等法,对购进的家兔进行筛选,发现32只市郊商品兔中有15％自然感染弓形虫,从中首次分离出2株弓形虫。

应用ELISA检测小儿腹泻患者粪便中的轮状病毒

为了开展轮状病毒感染的病原诊断,提高诊断效果。我们实验室经过探索各项试验条件,建立了检测小儿腹泻患者粪便中轮状病毒的微量酶联免疫吸附试验(双夹心法 ELISA),并与微量补体结合试验(CF)进行了比较。

RVHD蜂胶佐剂组织灭活苗效果好

西北农业大学张君等,用兔病毒性出血症蜂胶佐剂组织灭活苗(PMVRVHD)(A组)和兔病毒性出血症组织灭活苗(VRVHD)(B组)分别各免疫家兔10只,每只肌注1ml疫苗,对照组10只不注苗。在免疫前7天和免疫后不同时间采血测定Et-玫瑰花环形成率、Ea-玫瑰花环形成率和HI。在免疫后165天每组家兔随机抽3只,每只肌注强毒2ml,免疫后187天,3个组所剩家兔每只肌注强毒2ml。结果表明,免疫后37天和187天A。

用胶乳微粒为指示系统的吸收试验对血斑和肌肉作种属鉴定

本文报导了用吸收试验对血斑和肌肉的种属鉴定。该试验是用血斑或肌肉吸收抗血清,然后用相应血清涂裹胶乳微粒以测定被吸收的抗体的效价。本方法已证明是简单的、特异的和灵敏的。

高效毛细管电泳法同时测定血清中头孢唑啉钠和头孢米诺钠的含量

目的:建立毛细管区带电泳同时测定血清中头孢唑啉钠和头孢米诺钠含量的新方法。方法:毛细管电泳以20mmol·L-1硼砂溶液(pH8.7)为缓冲液,以氧氟沙星为内标物,在分离电压20kV和272nm波长下检测。以对照品与内标的峰面积比为纵坐标,以对照品浓度为横坐标,绘制工作曲线,根据线性回归方程计算药物含量。结果:在优化的条件下,头孢唑啉钠和头孢米诺钠得到有效分离,分离度大于15,其迁移时间的RSD(n=5)分别为0.32%和0.61%。在5.12～256mg·L-1范围内其标准曲线具有良好的线性关系(r>0.999)。头孢唑啉钠和头孢米诺钠的检出限(3σ)分别为1.45和1.26mg·L-1,定量限(10σ)分别为4.8和4.2mg·L-1,平均回收率分别为101.9%和102.4%。RSD分别为1.66%和2.63%。结论:该方法准确、快速、简便,可用于血清中头孢唑啉钠和头孢米诺钠含量的选择性测定和同时检测。

胰岛素是否调节甲状腺素在甲状腺外转换抑制物(IEC)的血清水平

最近,在饥饿动物的血清曾发现IEC,并推测为游离脂肪酸(FFA)性质。为了证实这种设想,一般用胰岛素抗脂活性以观察饥饿及经胰岛素处理的家兔血清IEC含量。