家牦牛线粒体DNA(mtDNA)遗传多样性及其分类

通过分析包括我国10个家牦牛品种(类群)在内共296个样本的mtDNA控制(D-loop)区部分序列的遗传变异,对我国家牦牛的遗传多样性、遗传分化、聚类关系和分类进行了研究。所测序列经比对后,共检测到61个变异位点,定义了77种单倍型。分析显示青海环湖牦牛的单倍型多样性最高,达0.9848±0.0403,而巴州牦牛单倍型多样性最低,为0.8000±0.0825;核苷酸多样性方面,斯布牦牛存在最为丰富的核苷酸序列变异,核苷酸多样性值为0.022582±0.011767,而巴州牦牛仅为0.006856±0.002476,表明我国家牦牛品种(类群)遗传多样性水平存在较大差异。总体上,我国家牦牛单倍型多样性、核苷酸多样性分别为0.9251±0.0095和0.015265±0.007757,呈现出丰富的遗传多样性。聚类分析显示我国家牦牛存在两个聚类簇——斯布牦牛独立为一类;其余9个品种(类群)聚为一类,表明家牦牛品种(类群)间遗传距离与地理分布无明显相关。分子变异分析(AMOVA)显示九龙、嘉黎、斯布牦牛构成的组与其余7个家牦牛品种(类群)构成的组之间存在极显著的遗传分化(ΦCT=0.05285,P<0.01),且其品种间/组内遗传分化不显著(ΦSC=0.00648,P>0.05),支持依据遗传分化程度将我国家牦牛划分为两大类型。AMOVA支持的分组在品种(类群)组成上与蔡立的研究结果相符,首次为我国家牦牛划分为横断高山型和青藏高原型两种类型提供了源自分子遗传学的证据。

青海家牦牛HIF-1α基因组织特异性表达

[目的]探究青海家牦牛HIF-1α基因组织的特异性表达。[方法]应用半定量反转录PCR和实时定量反转录PCR(SYBRGreen)技术对青海家牦牛HIF-1α基因的组织特异性表达进行检测。通过提取不同组织总RNA,经DNase I消化后,用随机引物进行反转录合成cDNA,采用特异性引物分别对HIF-1α和β-actin基因进行RT-PCR和Real Time RT-PCR扩增。[结果]结果表明,HIF-1α基因在心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、睾丸组织中均有表达,其中以睾丸和脾中HIF-1α基因表达量最高,肌肉的表达量最低。[结论]该研究为进一步揭示HIF-1α在高原土著动物低氧适应过程中的分子机制有着重要的意义。

幼龄家牦牛及野、家牦牛的杂种公牛血液中INS、P_4、T、LH、17β—E_2

采用放射免疫分析法对幼龄耗牛及其杂种公牛一昼夜血液中胰岛素（ＩＮＳ）、孕酮（Ｐ_４）、睾酮（Ｔ）、黄体生成素（ＬＨ）、雌二醇（１７β—Ｅ_２）的含量变化进行了研究，并对昼夜间激素含量进行ｔ检验，对杂交组合或各类型间各激素含量进行单因子方差分析。结果表明，１／２野牛与１／４野牛ＩＮＳ含量差异极显著；１／２野牛与家牦牛差异显著；家牦牛与３／４野牛差异极显著；家牦牛与１／４野牛、１／４野牛与３／４野牛差异不显著。３／４野牛Ｐ＿４极显著高于家牦牛、１／２野牛、１／４野牛，其余３个品种差异不及著。１／４野牛Ｔ含量极显著高于３／４野牛、１／２野牛、家牦牛；３／４野牛显著高于家牦牛；３／４野牛与１／２野牛，１／２野牛与家牦牛之间差异均不显著。４个类型或杂交组合间ＬＨ差异不显著。家牦牛、１／２野牛、１／４野牛间１７β—Ｅ＿２差异不及著。

家牦牛、半血野牦牛年产毛量的比较

对１７６头各龄家牦牛和半血野牦牛的年产毛量进行了测定。测定结果：家牦牛１岁０．９８±０．２９ｋｇ／头，２岁１．１２±０．２２ｋｇ／头，３一５岁１．１８±０．３８ｋｇ／头，６岁以上０．８８±０．２７ｋｇ／头；半血野牦牛相应为０．９０±０．２０ｋｇ／头，１．０５±０．２７ｋｇ／头，０．６８±０．２８ｋｇ／头，０．９０±０．３８ｋｇ／头；３一５岁家牦牛组的年产毛量极显著高于６岁以上年龄组（Ｐ＜０．０１），同１岁、２岁年龄组的年产毛量差异不显著（Ｐ＞０．０５），２岁与６岁以上年龄组之间呈显著性差异（Ｐ＜０．０５）；半血野牦牛各年龄组的年产毛量差异不显著（Ｐ＞０．０５）；１岁家牦牛公母间，２岁半血野牦牛公母间，年产毛量差异极显著（Ｐ＜０．０１）。

家牦牛、半血野牦牛产奶性能分析

对２２头家牦牛、半血野牦牛的产奶量进行了测定。测定结果：经产家牦牛日挤乳量为１．３０±０．１４ｋｇ，初产家牦牛为１．１１±０．１０ｋｇ，半血野牦牛相应为１．２４±０．２４ｋｇ、１．０５±０，１８ｋｇ，乳脂率含量，经产家牦牛为６．４４±０．３４％，初产家牦牛为６．２４±０．３４％，半血野牦牛相应为６．２５±０．７３％，５．５１±０．６１％。

家牦牛及野牦牛杂交后代犊牛组织呼吸代谢和肺组织结构的研究

文章采用瓦氏微量呼吸测压法,对头胎的初生、3月龄和6月龄家牦牛、横交半血野牦牛和半血野牦牛的肝、肾、心和肺脏的组织呼吸代谢强度进行了测定.同时,对试畜肺的组织学和肺泡透射电镜的超微结构进行了观察研究.结果表明:测定牦牛的组织呼吸代谢强度,可以反映其对高原少氧生态环境的适应特性.牦牛肝脏的组织呼吸代谢强度比其它组织高,各组织呼吸代谢强度和时间变化之间的关系符合指数曲线回归方程y=aebt,肝脏的组织呼吸代谢强度可作为牦牛组织呼吸代谢的重要指标之一.横交半血野牦牛各组织呼吸代谢强度显著或极显著低于家牦牛即横交半血野牦牛,有低的组织呼吸代谢率,表明横交半血野牦牛比家牦牛更能适应高原少氧的生态环境.牦牛组织呼吸代谢强度3月龄前弱,3月龄至6月龄随月龄增加而明显增强.肺组织结构研究表明:牦牛肺泡的气-血屏障系统处于开放或半开放状态,是牦牛世代生活在高原少氧生态环境中所形成的独具而完备的组织结构,横交半血野牦牛肺泡直径比家牦牛大,肺泡壁厚度比家牦牛薄,单位肺组织断面上肺泡所占比例和肺细动脉管壁厚度百分数比家牦牛高,这些都有利于横交半血野牦牛在高原少氧条件下增加气体交换的能力.

果洛家牦牛产乳性能测定

对果洛州玛沁县雪山乡 10头经产、初产家牦母牛一个夏季的挤乳量进行了测定。测定结果 :经产母牛平均日挤乳量 1.0 6± 0 .16kg ,初产母牛为 0 .67± 0 .0 9kg ,经产母牛显著高于初产母牛 (P <0 .0 5 )。乳脂率含量经产母牛为6.5 7%± 0 .2 3 %,初产母牛为 6.69%± 0 .15 %,差异不显著 (P >0 .0 5 )

1/4野血牦牛、1/2野血牦牛及家牦牛初产产乳性能测定

对１／４野血牦牛、１／２野血牦牛和家牦牛的初产牛进行１２０天的产奶量和乳脂率测定。结果：日均挤乳量，１／４野血牦牛为０．９４±０．２２ｋｇ，１／２野血牦牛为１．０５±０．１８ｋｇ，家牦牛为０．１１±０．１０ｋｇ；乳脂率，１／４野血牦牛为６．２９％，１／２野血牦牛为５．６％，家牦牛为６．２４％。经ｑ检验，３组的日均挤乳量和１／４野血牦牛与家牦牛的乳脂率均差异不显著（Ｐ＞０．０５），而１／２野血牦牛因野性较大，难以挤净含脂较高的二奶，以致乳脂率低于其它两组。

大通家牦牛和含野血牦牛的红细胞乳酸脱氢酶同工酶酶谱

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法对大通家牦牛、１／４野血牦牛、１／２野血牦牛和３／４野血牦牛的红细胞乳酸脱氢酶（ＲＢＣ－ＬＤＨ）同工酶酶谱进行了比较研究。结果发现，在被检的４个群体中，绝大多数牦牛只有ＲＢＣ－ＬＤＨ１同工酶，部分牦牛还有ＲＢＣ－ＬＤＨ２和ＲＢＣ－ＬＤＨ３同工酶。ＲＢＣ－ＬＤＨ１同工酶存在ＲＢＣ－ＬＤＨ１Ｆ和ＲＢＣ－ＬＤＨ１Ｓ两种表型。ＲＢＣ－ＬＤＨ１Ｆ型频率分别为０．１３２７，０．２２００；０．１９６３和０．３１０３，表明导入野牦牛血能使家牦牛ＲＢＣ－ＬＤＨ１Ｆ型频率增高（Ｐ＜０．２５～Ｐ＜０．０５）。

大通家牦牛乳蛋白的多态性

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对大通家牦牛的 4种乳蛋白多态性特征进行了研究。结果发现 :(1)α 乳白蛋白和αS1 酪蛋白两个基因座存在多态性 ,而 β 乳球蛋白和 β 酪蛋白基因座呈单态 ,乳蛋白的多态性基因座比例为 50 % ;(2 )平均有效等位基因数为 1 2 50 2个 ,平均基因杂合度为 0 12 73,平均基因均质度指数为 0 80 75。

家牦牛、半血野牦牛产毛量测定

对88头初、经产家牦牛和初、经产半血野牦牛产毛量进行了测定,其结果分别为:1.18±0.38、0.88±0.27、0.86±0.28和0.90±0.38kg/头。其中初产家牦牛产毛量极显著(P<0.01)高于其它三个类型的牦牛。在各部位产毛量中,经产家牦牛以背部为最高,肩颈部最低;初产家牦牛,初、经产半血野牦牛均以后躯为最高(P<0.01)背部次之,腹部最低。

全、半血野牦牛与家牦牛杂交试验

本试验通过人工授精技术,采用野牦牛颗粒冻精与家牦牛进行全、半血杂交方式,经后代生长发育观测,杂一代野血牛犊体尺、体重、剪毛量均高于本交家牦牛犊,尤以体重差异明显,全血野血牛犊体重比家牦牛犊增重3.4kg,增重率25.1%,体重差异极显著(P<0.01),半血野血牛犊体重比家牦牛增犊重2.1kg,增重率15.6%,体重差异极显著(P<0.01),野牦牛与家牦牛杂交优势明显。

野牦牛和家牦牛粪便菌群与短链脂肪酸关系的研究

短链脂肪酸(SCFA)是反刍动物吸收饲草、饲料中营养物质的重要形式。肠道菌群能够降解食物生成SCFA并影响其比例。本文通过16S r DNA测序和气相色谱质谱联用仪,分别测定了野牦牛(Bos mutus)和家牦牛(Bos grunniens)粪便菌群组成及SCFA含量,通过比较分析两种牦牛肠道菌群与SCFA的关系,筛选出野牦牛肠道中与SCFA高浓度有正相关关系的菌群。结果显示,野牦牛粪便菌群主要有厚壁菌门(Firmicutes)(66. 47%)、拟杆菌门(Bacteroidetes)(26. 00%)和变形菌门(Proteobacteria)(3. 48%),主要的科有瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)(55. 18%)、拟杆菌科(Bacteroidaceae)(8. 75%)和毛螺菌科(Lachnospiraceae)(7. 57%),家牦牛的菌群结构和组成与野牦牛相似。野牦牛粪便中SCFA以乙酸和丙酸为主,乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸和正戊酸的含量均显著高于家牦牛(P <0. 01)。Spearman相关分析显示,野牦牛粪便菌群中紫单胞菌科(Porphyromonadaceae)、拟杆菌科(Bacteroidaceae)、普雷沃氏菌科(Paraprevotellaceae)、理研菌科(Rikenellaceae)和韦荣球菌科(Erysipelotrichaceae)与SCFA具有较强相关性(r> 0. 4),而家牦牛仅有弱相关性(r <0. 3)。说明牦牛后肠道具有丰富的能够促进SCFA生成的益生菌群,进而提高食物的转化效率。

野牦牛和家牦牛染色体组型的比较研究

本研究采用外周淋巴细胞短期培养与气干法褂备染色体标本,对野牦牛、家牦牛染色体进行核型分析比较,其结果表明,野牦牛和家牦牛二倍体细胞染色体数目相等,均为2n=60雄性为29对常染色体和一对性染色体xy,雌性为29对常染色体和一对性染色体xx,根据染色体测算结果常染色体为端着丝点染色体,性染色体xy和xx均为亚中着丝点染色体。染色体是生物的主要遗传物质基础。它具有属种特征,通常不同的物种除表现在形态,生理特性不同外,更重要的还表现在染色体数目、臂数、形态结构的差异。研究动物染色体不仅有助于阐明动物起源和进化,而且可为杂交育种,确定动物分类地位和为遗传学提供可靠的细胞遗传学依据。随分子细胞遗传学的发展,牛染色体的研究越来越引起国内外的重视。近年来对家牦牛染色体的研究国内外已有不少报道,然而对野牦牛染色体的研究迄今尚未见有报道。为此我们进行了家牦牛和野牦牛染色体组型比较的研究,以便了解其种质上的异同情况。

野牦牛与家牦牛六个方面比较

牦牛是一种古老的牛种,距今200万年前就已经出现在地球上。我国是世界上家牦牛数量、品种最多的国家,有家牦牛1400多万头,约占世界家牦牛总数的95%以上。被称为"高原之舟"的牦牛,是青藏高原特有畜种,仅青海省就有牦牛490余万头,约占全世界的1/3。本文主要对青海家牦牛和野牦牛的分布及概况、外貌特征与繁殖方式、饲养管理、生产性能和抗病力等方面进行对比分析,发现野牦牛喜欢群居,善于攀高涉险;野牦牛的繁殖情况基本与家牦牛相似;野牦牛比家牦牛抗病性能好。

生长家牦牛与半血野牦牛产毛量的比较

对180头生长家牦牛和半血野牦牛的产毛量进行了测定。测定结果,家牦牛1岁1.263±0.239kg/头,2岁1.404±0.329kg/头;3岁1.501±0.326kg/头;半血牦牛相应为1.074±0.308kg/头,1.064±0.336kg/头,1.158±0.410kg/头。其绒毛产量分别为家牦牛0.605±0.143kg/头,0.711±0.216kg/头,0.635±0.246kg/头。半血野牦牛0.556±0.177kg/头,0.418±O.201kg/头,0.453±0.217kg/头。裙毛产量分别为家牦牛0.658±0.137kg/头,0.693 ±0.175kg/头,0.866±0.187kg/头。半血野牦牛0.518±0.211kg/头,0.646±0.257kg/头,O.705±0.258kg/头。结果表明,给家牦牛导入野牦牛血液进行血缘更新,牦牛的产绒、产毛性能未能得到提高。

野牦牛杂交复壮家牦牛效果观察

引进野牦牛冻精和野血牦牛,改良当地牦牛所生产的野血后代,均表现出明显的杂种优势。文章以野牦牛和家牦牛杂交后代为研究对象,分别测定了杂种牦牛和家牦牛公牛初生重、6月龄、18月龄、28月龄体重和体尺,同时进行了屠宰试验。结果1/2野血牦牛、1/4野血牦牛初生重、6月龄、18月龄和28月龄体重均极显著高于同龄家牦牛(P＜0．01);6月龄、18月龄、28月龄体尺指标也是杂交牛极显著高于家牦牛(P＜0．01);屠宰试验结果表明,18月龄、28月龄1/2野血牦牛和1/4野血牦牛比同龄家牦牛分别多产肉16．62 kg、24．70 kg和11．45 kg、13．70 kg,差异极显著(P＜0．01)。

野牦牛改良家牦牛的生产性能效果试验研究

[目的]为提高牦牛的生产性能。[方法]随机选择家牦牛63头为对照组,1/2野血牦牛57头为实验组,测定6月龄、18月龄体尺、体重,日增重,并将测定数据进行方差分析t检验。[结果]表明：6月龄1/2野血牦牛体高、体斜长、胸围、管围、体重比同龄家牦牛平均提高7.48%、7.93%、8.03%、9.64%、24.26%,差异极显著（P〈0.01）。18月龄1/2野血牦牛体高、体斜长、胸围、管围、体重比同龄家牦牛平均提高7.35%、8.14%、7.44%、11.65%、27.50%,差异极显著（P〈0.01）。6月龄~18月龄1/2野血公母牦牛平均日增重比同龄家牦牛提高60.80 g、54.72 g,差异极显著（P〈0.01）。[结论]利用野牦牛改良家牦牛,可明显提高家牦牛的生产性能和复壮效果。