RNAi及其在家禽病毒病治疗上的应用

双链小RNA介导的RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年发现的一项以序列特异方式诱导同源mRNA降解的新技术。由于RNAi精巧的特异性和有效性,已被认为是特异性基因治疗的重要工具。其中作为抑制病毒复制的潜在工具更为引人注目。因此,将RNAi的作用机制和其在家禽病毒病治疗上的应用做以综述。

LAMP技术在家禽病毒检测中的应用

环介导等温扩增技术(LAMP)是一种简便快速的DNA扩增技术,具有特异性强、敏感性高、反应迅速、设备简单、判定简易等特点,非常适合在基层和临床上应用。自LAMP出现后,在多个领域得到了大量的研究和应用,尤其在家禽病毒的检测方面发展迅速,检测动物包括鸡、鸭、鹅、鸽等多种家禽,检测对象包含引起呼吸道感染、肿瘤、免疫抑制等方面的多种病毒,检测的敏感性和特异性比PCR还要高,在家禽病毒性感染的诊断和防控中发挥了重要的作用。当前影响其广泛应用的主要问题是扩增模板,如果能解决病原核酸在生产现场的简便提取,定能在将来得到更广泛的普及应用。

LAMP技术在家禽病毒病检测中的应用

环介导等温扩增技术（LAMP）是由Notomi等建立的一种核酸扩增技术,该方法最大的优点是能够在63-65℃的等温条件下扩增特定DNA序列,并在30~60min内可以观察到结果。LAMP已经成功用于许多病毒的检测,在本文中,主要概述LAMP技术原理及其在家禽病毒病检测中的应用。

泰国鉴定出新的家禽病毒

泰国在3日龄-7日龄的种鸡中检出禽腺病毒-1群，可以引起家禽的包涵体肝炎。据报告，这种病毒不能传播给人，已经在泰国的中部、西部和东部地区发现。除了幼龄鸡外，在2008年年初，已经在这3个地区的6个养鸡场发现了这种病毒引起的疾病爆发。在鸽子、鹅、火鸡和鹧鸪也可以发现这种病毒。

昆虫杆状病毒表达系统在病毒性家禽疾病研究中的应用进展

昆虫杆状病毒表达系统作为四大表达系统之一,具有安全性高、对外源基因克隆容量大、重组病毒易于筛选、具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力等特点,已成功表达了近千种高价值蛋白,在很多领域都得到较广泛的应用。本文对该表达系统在主要病毒性家禽疾病方面的相关应用研究进展进行综述,旨在为相关研究提供参考。

家禽RNA病毒的反向遗传学原理及其应用

目前绝大多数家禽病毒基因组序列已经测定完毕，家禽病毒基因组的研究已经由结构基因组时代进入功能基因组的时代，于是家禽病毒的反向遗传学应运而生。经典的正向遗传学研究策略是从功能或表型的突变体出发，寻找主导相关功能或表型的基因；而反向遗传学则是从制造基因的突变体以检测生物体表型出发，得知基因的功能。

家禽疱疹病毒CRISPR/Cas9基因编辑最新研究进展

基于CRISPR/Cas9系统的基因编辑是最新一代的基因组编辑技术,在向导RNA(gRNA)的介导下几乎可以靶向编辑任何一种基因,实现基因组的定点突变、敲除或插入。近年来将CRISPR/Cas9基因编辑技术应用于大基因组DNA病毒的研究,尤其是用于疱疹病毒的基因编辑已成为病毒学研究领域的最新国际热点。自2016年首次报道利用CRISPR/Cas9系统改造家禽疱疹病毒如马立克病病毒(MDV)基因组以来,短短5年时间已全面应用于家禽疱疹病毒的蛋白编码基因和非编码RNA基因的编辑、基因缺失疫苗和重组疫苗研发、抗病毒治疗以及抗病育种等领域。本文详细综述了当前CRISPR/Cas9基因编辑技术在家禽疱疹病毒中的应用进展和最新成果,并对其面临的问题和前景进行了展望,以期为后续研究提供重要参考。

马立克氏病病毒(MDV)814株B抗原基因的克隆及部分序列分析

提取感染鸡胚成纤维细胞ＭＤＶ－Ｉ弱毒株８１４病毒ＤＮＡ为模板，根据ＲＢＩＢ株ｇＢ基因５＇及３＇两端核苷酸序列设计引物，利用ＰＣＲ技术扩增了我国ＭＤＶ－Ｉ弱毒株８１４ｇＢ基因（１．９ｋｂ），将扩增片段平末端克隆到载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ中ＥｃｏＲＶ位点，经ＢａｍＨＩ、ＨｉｎｄⅢ酶切鉴定得到不同插入方向的重组质粒。构建扩增片段的酶切图谱及部分序列分析证明与ＲＢＩＢ株ｇＢ基因无差异，显示了极高的同源性。本文进一步证明ｇＢ基因在ＭＤＶ不同毒株间是十分保守的。

禽呼肠孤病毒变异株的分离鉴定

从病鸡肝分离到一株病毒，经电镜检查、理化特性分析、核酸电泳和中和试验等证明它为禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）。该病毒只在鸡胚肝细胞（ＣＥＬｉ）上产生细胞病变（ＣＰＥ），在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和Ｖ＿（ｅｒｏ）细胞上不增殖，它对热无敏感，Ｍｇ￣（２＋）不能增强其对热的稳定性，其基因组中的４个小节段的迁移率与ＡＲＶＦＤＯ和Ｓ＿（１１３３）株明显不同，表明它是不同于ＦＤＯ和Ｓ＿（１１３３）的ＡＲＶ变异株。

鸡传染性贫血病毒研究进展

鸡传染性贫血病毒研究进展卢春，陈溥言，蔡宝祥（南京农业大学动物医学院，南京２１００９５）ＡｄｖａｎｃｅｓｏｆＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＣｈｉｃｋｅｎＡｎａｅｍｉａＶｉｒｕｓ￥ＬｕＣｈｕｎ；ＣｈｅｎＰｕｙａｎ；Ｂａｏｘｉａｎｇ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉ...