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糖尿病诱导剂链脲佐菌素与原核表达的家蚕素Ⅱ对家蚕血糖含量的影响
被引量:
2
1
作者
孙凌云
徐欣
+3 位作者
杨洋
吴亚群
刘庆信
崔为正
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期442-449,共8页
为探讨高等动物糖尿病诱导剂对家蚕血糖含量的影响以及鉴定原核表达的家蚕素Ⅱ(BBXⅡ)的降血糖活性,通过给家蚕幼虫注射糖尿病诱导剂链脲佐菌素和BBXⅡ,调查家蚕的生理效应及血糖含量变化。分别以50-500μg/g的剂量给4龄24 h幼虫注射...
为探讨高等动物糖尿病诱导剂对家蚕血糖含量的影响以及鉴定原核表达的家蚕素Ⅱ(BBXⅡ)的降血糖活性,通过给家蚕幼虫注射糖尿病诱导剂链脲佐菌素和BBXⅡ,调查家蚕的生理效应及血糖含量变化。分别以50-500μg/g的剂量给4龄24 h幼虫注射链脲佐菌素后12--48 h,会引起蚕体血液中的海藻糖含量升高,但与对照组的差异不显著;以250μg/g的剂量给5龄24 h幼虫注射链脲佐菌素后6 h,血液中的海藻糖含量显著升高,海藻糖酶活性显著降低。蚕体注射链脲佐菌素后表现出不同程度中毒症状,生长发育、存活率、茧质、眠性及后代的滞育性等均受到不同程度的影响。半定量RT-PCR检测表明,链脲佐菌素会导致家蚕体内BBX-Ⅱ基因的表达量下调,其中对4龄期幼虫的影响大于5龄期幼虫。用原核表达的BBXⅡ注射正常饲养的家蚕幼虫、饥饿后进食的幼虫和经链脲佐菌素处理的幼虫,均可引起血液中海藻糖含量显著降低和海藻糖酶活性升高,显示原核表达的BBXⅡ对家蚕具有降血糖活性。
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关键词
链脲佐菌素
家蚕素ⅱ
原核表达
家蚕
血糖
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职称材料
家蚕素Ⅱ基因真核表达载体的构建
被引量:
2
2
作者
李洪霞
杜珍武
+3 位作者
张玉成
郑锦花
吕俊峰
张桂珍
《中国实验诊断学》
北大核心
2011年第1期20-22,共3页
目的构建(BbxⅡ)基因真核表达载体,为研究家蚕素Ⅱ在哺乳动物细胞中的生物学作用奠定基础。方法以含有BbxⅡcDNA的PUC57质粒为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BbxⅡcDNA片段。真核表达载体PcD-NA3.1及PCR产物经双酶切后连接,转化大肠...
目的构建(BbxⅡ)基因真核表达载体,为研究家蚕素Ⅱ在哺乳动物细胞中的生物学作用奠定基础。方法以含有BbxⅡcDNA的PUC57质粒为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BbxⅡcDNA片段。真核表达载体PcD-NA3.1及PCR产物经双酶切后连接,转化大肠杆菌DH-5α感受态菌,获得重组载体PcDNA3.1-Bbx/His,进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得与预期大小一致约300 bp的特异性DNA,重组载体PcDNA3.1-BbxⅡ/His经双酶切及测序鉴定证实,BbxⅡ基因的cDNA片段正确插入真核表达载体中。结论成功构建含有家蚕素基因Ⅱ的真核表达载体。
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关键词
家蚕素ⅱ
聚合酶链式反应
真核表达载体
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职称材料
重组家蚕素Ⅱ对HepG2细胞胰岛素样作用
3
作者
王玲玲
吴雷
孙博谦
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期402-404,共3页
目的探讨体外重组家蚕素Ⅱ(MBbxⅡ)对HepG2细胞的胰岛素样作用及其相关机制。方法葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(GODPOD)法测定转染后HepG2细胞葡萄糖消耗情况;PAS染色方法测定转染后HepG2细胞糖原染色情况。结果 MBbxⅡ组与100 nmol/L组HepG...
目的探讨体外重组家蚕素Ⅱ(MBbxⅡ)对HepG2细胞的胰岛素样作用及其相关机制。方法葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(GODPOD)法测定转染后HepG2细胞葡萄糖消耗情况;PAS染色方法测定转染后HepG2细胞糖原染色情况。结果 MBbxⅡ组与100 nmol/L组HepG2细胞的葡萄糖消耗相当,但MBbxⅡ组HepG2细胞48 h比24 h的总葡萄糖消耗有所减低,与100 nmol/L组结果相反。与空白对照组及空质粒组比较,MBbxⅡ组HepG2细胞糖原合成增加,其作用与100 nmol/L组相当。结论 MBbxⅡ具有调节肝细胞糖代谢的功能,但其作用可能是快速反应并且在短期内灭活。
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关键词
重组
家蚕素ⅱ
人肝细胞株细胞
胰岛素样作用
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职称材料
家蚕素Ⅱ基因在293FT细胞中的表达
被引量:
3
4
作者
李洪霞
杜珍武
+2 位作者
张玉成
李治坤
张桂珍
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期634-636,共3页
目的探讨家蚕素Ⅱ(BombyxinⅡ)基因在293FT细胞中的表达。方法应用脂质体将携带具有6个组氨酸标签的家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体与携带β半乳糖苷酶基因的真核表达载体共同导入293FT细胞。采用β半乳糖苷酶细胞原位染色检测β半乳糖苷...
目的探讨家蚕素Ⅱ(BombyxinⅡ)基因在293FT细胞中的表达。方法应用脂质体将携带具有6个组氨酸标签的家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体与携带β半乳糖苷酶基因的真核表达载体共同导入293FT细胞。采用β半乳糖苷酶细胞原位染色检测β半乳糖苷酶基因在细胞内的表达,从而判断基因的细胞转染效率;应用逆转录PCR方法检测家蚕素Ⅱ基因在细胞内mRNA水平的表达;应用免疫组织化学方法检测6个组氨酸标签蛋白在细胞内的表达,从而间接判断家蚕素Ⅱ基因在蛋白水平表达情况。结果β半乳糖苷酶原位染色显示基因转染组可见到染成蓝色的细胞,正常未转染组未见到蓝色细胞;逆转录PCR结果显示只有转染携带家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体的293FT细胞中可检测到家蚕素Ⅱ基因表达;免疫组化结果显示只有转染携带家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体的293FT细胞中可见到染成棕黄色的细胞颗粒。结论通过基因转染技术,成功使家蚕素Ⅱ基因在293FT细胞得以表达,为进一步研究其降血糖生物活性奠定实验基础。
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关键词
家蚕素
基因
ⅱ
基因表达
293FT细胞
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职称材料
题名
糖尿病诱导剂链脲佐菌素与原核表达的家蚕素Ⅱ对家蚕血糖含量的影响
被引量:
2
1
作者
孙凌云
徐欣
杨洋
吴亚群
刘庆信
崔为正
机构
山东农业大学林学院
泰山医学院基础医学部
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期442-449,共8页
基金
现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-22)
国家重点基础研究发展计划“973”项目(No.2012CB114603)
文摘
为探讨高等动物糖尿病诱导剂对家蚕血糖含量的影响以及鉴定原核表达的家蚕素Ⅱ(BBXⅡ)的降血糖活性,通过给家蚕幼虫注射糖尿病诱导剂链脲佐菌素和BBXⅡ,调查家蚕的生理效应及血糖含量变化。分别以50-500μg/g的剂量给4龄24 h幼虫注射链脲佐菌素后12--48 h,会引起蚕体血液中的海藻糖含量升高,但与对照组的差异不显著;以250μg/g的剂量给5龄24 h幼虫注射链脲佐菌素后6 h,血液中的海藻糖含量显著升高,海藻糖酶活性显著降低。蚕体注射链脲佐菌素后表现出不同程度中毒症状,生长发育、存活率、茧质、眠性及后代的滞育性等均受到不同程度的影响。半定量RT-PCR检测表明,链脲佐菌素会导致家蚕体内BBX-Ⅱ基因的表达量下调,其中对4龄期幼虫的影响大于5龄期幼虫。用原核表达的BBXⅡ注射正常饲养的家蚕幼虫、饥饿后进食的幼虫和经链脲佐菌素处理的幼虫,均可引起血液中海藻糖含量显著降低和海藻糖酶活性升高,显示原核表达的BBXⅡ对家蚕具有降血糖活性。
关键词
链脲佐菌素
家蚕素ⅱ
原核表达
家蚕
血糖
Keywords
Streptozotocin
Bombyxin-
ⅱ
Prokaryotic expression
Bombyx mori
Blood sugar
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
R-332 [医药卫生]
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职称材料
题名
家蚕素Ⅱ基因真核表达载体的构建
被引量:
2
2
作者
李洪霞
杜珍武
张玉成
郑锦花
吕俊峰
张桂珍
机构
吉林大学中日联谊医院中心研究室
长春市中心医院皮肤科
吉林大学第二医院
出处
《中国实验诊断学》
北大核心
2011年第1期20-22,共3页
文摘
目的构建(BbxⅡ)基因真核表达载体,为研究家蚕素Ⅱ在哺乳动物细胞中的生物学作用奠定基础。方法以含有BbxⅡcDNA的PUC57质粒为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BbxⅡcDNA片段。真核表达载体PcD-NA3.1及PCR产物经双酶切后连接,转化大肠杆菌DH-5α感受态菌,获得重组载体PcDNA3.1-Bbx/His,进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得与预期大小一致约300 bp的特异性DNA,重组载体PcDNA3.1-BbxⅡ/His经双酶切及测序鉴定证实,BbxⅡ基因的cDNA片段正确插入真核表达载体中。结论成功构建含有家蚕素基因Ⅱ的真核表达载体。
关键词
家蚕素ⅱ
聚合酶链式反应
真核表达载体
Keywords
Bombyxin
PCR
eukaryotic expression vector
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
下载PDF
职称材料
题名
重组家蚕素Ⅱ对HepG2细胞胰岛素样作用
3
作者
王玲玲
吴雷
孙博谦
机构
北华大学附属医院神经内科
吉林大学第一临床医院神经内科
出处
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期402-404,共3页
基金
吉林省卫生厅科研课题(No.20122049)
文摘
目的探讨体外重组家蚕素Ⅱ(MBbxⅡ)对HepG2细胞的胰岛素样作用及其相关机制。方法葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(GODPOD)法测定转染后HepG2细胞葡萄糖消耗情况;PAS染色方法测定转染后HepG2细胞糖原染色情况。结果 MBbxⅡ组与100 nmol/L组HepG2细胞的葡萄糖消耗相当,但MBbxⅡ组HepG2细胞48 h比24 h的总葡萄糖消耗有所减低,与100 nmol/L组结果相反。与空白对照组及空质粒组比较,MBbxⅡ组HepG2细胞糖原合成增加,其作用与100 nmol/L组相当。结论 MBbxⅡ具有调节肝细胞糖代谢的功能,但其作用可能是快速反应并且在短期内灭活。
关键词
重组
家蚕素ⅱ
人肝细胞株细胞
胰岛素样作用
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
下载PDF
职称材料
题名
家蚕素Ⅱ基因在293FT细胞中的表达
被引量:
3
4
作者
李洪霞
杜珍武
张玉成
李治坤
张桂珍
机构
长春市中心医院
吉林大学中日联谊医院中心研究室
出处
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期634-636,共3页
基金
吉林省科技厅白求恩医学基金(No.200705265)
文摘
目的探讨家蚕素Ⅱ(BombyxinⅡ)基因在293FT细胞中的表达。方法应用脂质体将携带具有6个组氨酸标签的家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体与携带β半乳糖苷酶基因的真核表达载体共同导入293FT细胞。采用β半乳糖苷酶细胞原位染色检测β半乳糖苷酶基因在细胞内的表达,从而判断基因的细胞转染效率;应用逆转录PCR方法检测家蚕素Ⅱ基因在细胞内mRNA水平的表达;应用免疫组织化学方法检测6个组氨酸标签蛋白在细胞内的表达,从而间接判断家蚕素Ⅱ基因在蛋白水平表达情况。结果β半乳糖苷酶原位染色显示基因转染组可见到染成蓝色的细胞,正常未转染组未见到蓝色细胞;逆转录PCR结果显示只有转染携带家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体的293FT细胞中可检测到家蚕素Ⅱ基因表达;免疫组化结果显示只有转染携带家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体的293FT细胞中可见到染成棕黄色的细胞颗粒。结论通过基因转染技术,成功使家蚕素Ⅱ基因在293FT细胞得以表达,为进一步研究其降血糖生物活性奠定实验基础。
关键词
家蚕素
基因
ⅱ
基因表达
293FT细胞
分类号
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
糖尿病诱导剂链脲佐菌素与原核表达的家蚕素Ⅱ对家蚕血糖含量的影响
孙凌云
徐欣
杨洋
吴亚群
刘庆信
崔为正
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
下载PDF
职称材料
2
家蚕素Ⅱ基因真核表达载体的构建
李洪霞
杜珍武
张玉成
郑锦花
吕俊峰
张桂珍
《中国实验诊断学》
北大核心
2011
2
下载PDF
职称材料
3
重组家蚕素Ⅱ对HepG2细胞胰岛素样作用
王玲玲
吴雷
孙博谦
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
下载PDF
职称材料
4
家蚕素Ⅱ基因在293FT细胞中的表达
李洪霞
杜珍武
张玉成
李治坤
张桂珍
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
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职称材料
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