大鼠心肌细胞容积敏感性与钾离子通道的关系

目的观察大鼠心肌细胞调节性容积减小(regulatory volume decrease,RVD)过程,研究参与RVD过程的钾离子通道及其亚型。方法采用膜片钳全细胞记录法,记录急性分离的大鼠心肌细胞在低渗刺激下钾离子电流的变化及特征,分析其所属亚型;用细胞容积测定法观察大鼠心肌细胞RVD的过程。结果膜片钳全细胞记录法证实,低渗刺激激活了心肌细胞的K+通道电流,该K+通道电流可被CsCl和格列苯脲所阻断。同时钾离子通道阻断剂可明显阻断大鼠心肌细胞的RVD过程。结论大鼠心肌细胞在低渗溶液作用下具有RVD过程,钾离子通道,尤其ATP敏感性钾离子通道在大鼠心肌细胞RVD过程中可能具有十分重要的作用。

低渗条件下小肠上皮细胞调节性细胞容积减小的离子通道机制

目的:观察人小肠上皮细胞调节性细胞容积减小(RVD)的过程,探讨参与RVD过程的离子通道机制。方法:将培养的人小肠上皮细胞暴露于低渗溶液,利用电子细胞体积测量系统测定细胞平均容积变化过程和离子通道的参与过程;采用RT-PCR方法检测人小肠上皮细胞上离子通道的表达。结果:人小肠上皮细胞具有良好的RVD功能;其RVD过程可被氯通道阻断剂NPPB和钾通道阻断剂四乙铵所阻断;进一步的研究发现,中等电导钙激活性钾通道(IK)的特异性阻断剂Clotrimazole(CLT)(1μmol/L)可以明显抑制细胞的RVD过程,而大电导钙激活性钾通道(BK)和小电导钙激活性钾通道(SK)的特异阻断剂iberiotoxin(100nmol/L)和apamin(100nmol/L)对RVD过程无任何抑制作用。RT-PCR的结果也显示,人小肠上皮细胞只有IK表达,而无SK和BK的表达。结论:人小肠上皮细胞具有RVD功能,RVD过程的完成有赖于氯通道和钾通道的平行激活,而其中参与容积调节的钾通道是中等电导钙激活型钾通道IK。