容积调控氯通道的研究进展

细胞在低渗环境中出现渗透性膨胀 ,随后细胞内的溶质及水分外流 ,使已膨胀的细胞容积向正常容积转化 ,此过程称为调节性细胞容积减小 (RVD) ,它是哺乳动物细胞普遍存在的现象。容积调控氯通道 (VRAC)在这个过程中起重要作用 ,不仅如此 ,最近研究发现VRAC参与了细胞增殖、分化和凋亡过程。

SWELL1真核表达载体的构建及其在哺乳动物细胞的表达

为研究SWELL1容积调控性氯离子通道在多种哺乳动物细胞的表达情况,最终获得表达及功能俱佳的细胞模型。反转录PCR方法从SJSA 1细胞中获得目的基因SWELL1,应用基因同源重组技术将SWELL1克隆入真核表达载体pCMV3-RFP,测序结果表明,成功构建SWELL1真核表达载体;SWELL1转染至HEK293、CHO和FRT细胞中,抗生素筛选和有限稀释后,获得表达SWELL1细胞株;倒置荧光显微镜观察SWELL1的表达情况,并应用荧光淬灭动力学试验检测SWELL1的离子转运功能。结果表明FRT细胞为研究SWELL1的最佳细胞模型,SWELL1是容积调控性氯离子通道的分子基础,具有经典容积调控性氯离子通道的特性。