一株宽宿主谱裂解性大肠杆菌噬菌体的进化分析

裂解性噬菌体能够特异性裂解细菌,本研究分析了一株从自然界中分离的宽宿主谱裂解性大肠杆菌噬菌体的种属和进化关系。前期用Adams双层平板琼脂法从猪场污水中分离纯化出一株裂解性噬菌体v B_Eco M_JS09,裂解谱分析能够裂解禽致病性大肠杆菌和产肠毒素大肠杆菌。扩增分析gene18、gene 23序列,并根据gp18和gp23氨基酸序列构建系统进化树,分析JS09的遗传进化关系。结果表明噬菌体v B_Eco M_JS09基因组为ds DNA,属于有尾噬菌体目、肌尾噬菌体科、T4-like噬菌体、T-evens亚群。其gp18氨基酸序列与大肠杆菌噬菌体RB69同源性最高,为100%;gp23氨基酸序列与大肠杆菌T4噬菌体同源性最高为96%。该结果为禽致病性大肠杆菌和产肠毒素大肠杆菌的防控提供了生物学基础。

1株宽宿主谱的阪崎肠杆菌噬菌体生物特性分析及其在乳制品中的应用

以阪崎肠杆菌菌株ATCC25944为宿主菌从河涌水中分离1株噬菌体TBC-1,具有较宽的阪崎肠杆菌宿主范围。电镜形态学及生物特性结果显示:此噬菌体衣壳为二十面体,具有可收缩性尾部;该噬菌体的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.001,一步生长曲线显示其潜伏期20 min,爆发期50 min;爆发量为100 PFU/cell;该噬菌体在温度区间40~50℃及pH 4~10之间可以保持其效价稳定;对阪崎肠杆菌有较好的裂解杀菌效果,并且MOI越高抑制效果越好。全基因组测序分析显示:该噬菌体的基因组为双链DNA,全基因组分子质量85313 bp,平均GC含量40.65%,共有118个蛋白编码区,24个tRNA。应用结果显示,TBC-1对牛乳中2种阪崎肠杆菌的抑制效果:室温(25℃)培育3 h,在MOI为106时,能将102 CFU/mL菌抑制到检出限以下;TBC-1对乳粉中2种阪崎肠杆菌的抑制效果:在25℃与37℃培育3 h,ATCCBAA894菌量均减少到检出限以下,在25℃培育3~12 h,ATCC25944菌量均在检出限以下。本研究表明噬菌体TBC-1具有宽宿主谱系特性、稳定的裂解杀菌以及在牛乳与乳粉中对不同的阪崎肠杆菌均有良好的抑制作用,有潜力成为阪崎肠杆菌生物抑制剂。

1株可裂解肠道内和肠道外大肠杆菌的宽宿主谱噬菌体的分离与特性分析

本试验从猪粪中分离得1株大肠杆菌的烈性噬菌体ΦNJ14.用实验室保存的大肠杆菌对其裂解谱进行检测,发现ΦNJ14能裂解27株大肠杆菌,是一株对肠道内和肠道外大肠杆菌均有效的宽宿主谱的噬菌体.电镜观察结果表明,ΦNJ14头部呈狭长的六面体,有一个可伸缩的尾部,属于肌尾噬菌体科成员.ΦNJ14的生物学特性鉴定结果显示,其效价为1.28×10^10PFU/mL,最佳感染复数（MOI）为100;对60℃以下的温度具有较好的耐受力,在70℃培养20min后活力显著下降;ΦNJ14对碱的耐受力较强,在pH4-11之间都能保持较高的活力;一步生长曲线检测结果显示,ΦNJ14潜伏期为20 min,复制周期为140 min.提示噬菌体ΦNJ14对致病性大肠杆菌具有一定的防控潜力.