宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体的筛选及其裂解性能分析

为了筛选宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体并分析其裂解性能,本试验首先对分离自不同年份、不同地区、不同宿主来源的238株禽源沙门氏菌(C01~C238株)进行药物敏感性检测和血清型鉴定,筛选出耐药率大于60.00%的抗生素;然后采用双层平板法测定50株沙门氏菌噬菌体(NP01~NP50)对238株禽源沙门氏菌的裂解谱并统计裂解率;最后选择裂解率最高的噬菌体,进一步统计其对筛选到的抗生素耐药的沙门氏菌菌株的裂解率及对不同分离年份、分离地区、宿主来源及血清型的沙门氏菌菌株的裂解率。结果表明:238株沙门氏菌对青霉素、阿莫西林、红霉素、利福平、复方新诺明的耐药率较高,均大于60.00%;其中对红霉素的耐药率最高,为88.24%;对头孢噻肟、氧氟沙星、庆大霉素、四环素的敏感率较高,为64.71%~86.13%。在238株被检沙门氏菌中,肠炎沙门氏菌有128株,鸡白痢沙门氏菌有95株,鼠伤寒沙门氏菌有6株,伤寒沙门氏菌有2株,甲型副伤寒沙门氏菌有1株,未定型沙门氏菌有6株。在50株沙门氏菌噬菌体中,有14株对238株沙门氏菌的裂解率在80.00%以上,有17株裂解率在20.00%以下;NP17的裂解率最高,为92.02%。NP17可裂解耐药沙门氏菌菌株,对2019,2020,2021年分离的沙门氏菌菌株的裂解率为90.00%~95.18%,其中2021年最高,2020年最低;对分离自黑龙江、山东、江苏、广西、广东地区的沙门氏菌菌株的裂解率为88.89%~94.62%,其中山东地区最高,广东地区最低;对鸡源、鸭源、鸽源沙门氏菌菌株的裂解率为86.36%~100%,其中对鸽源沙门氏菌菌株的裂解率最高,对鸭源沙门氏菌菌株的裂解率最低;对肠炎沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌菌株的裂解率均在80.00%以上,其中对肠炎沙门氏菌菌株的裂解率(97.66%)最高,其次为鸡白痢沙门氏菌菌株(裂解率为88.42%)。说明存在宽裂解谱沙门氏菌噬菌体,其裂解性能不受耐药性的影响,对不同分离年份、分离地区、宿主来源和血清型沙门氏菌菌株的裂解率略有差异。

一株分离自医院污水的宽裂解谱铜绿假单胞菌噬菌体的生物学特性及基因分析

目的分析1株从医院污水中分离的宽裂解谱铜绿假单胞菌噬菌体的基因组信息,了解其生物学特性,为铜绿假单胞菌院内感染的治疗提供新的思路。方法收集医院污水标本,采用双层平板法进行噬菌体分离纯化,用电镜观察其形态,测定噬菌体裂解谱、最佳感染复数(MOI)和一步生长曲线;对噬菌体进行全基因组测序分析。结果从污水标本中分离纯化获得1株铜绿假单胞菌噬菌体YFY1,MOI指数为0.1,一步生长曲线显示潜伏期约为50 min,爆发期约为40 min;电镜观察其头部长约63 nm,尾长约10 nm,为尾部呈短棒状的肌尾噬菌体。YFY1基因长度为61404 bp,GC含量为60.18%,其基因组注释共得到84个开放阅读框架(ORF),在注释的107个相似蛋白中有81个蛋白相似度>50%,其中64个为假设蛋白,17个为体现噬菌体功能和结构的重要蛋白。结论YFY1是一株烈性肌尾噬菌体,该噬菌体具有多种与功能相关的蛋白,可为铜绿假单胞菌感染的生物治疗提供理论依据。