CMV新疆哈密瓜分离物的寄主反应及其cp序列分析

从新疆16个哈密瓜主栽区采集哈密瓜病毒病样品,利用RT-PCR检测黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)。通过蚕豆的单斑分离纯化,获得了新疆12个哈密瓜主栽区的17个CMV分离物。分析这些分离物的寄主反应和全长外壳蛋白基因序列。结果表明,新疆17个CMV分离物属于CMV的ⅠB亚组。总体来看,新疆CMV分离物的进化分簇没有表现出明显的地区适应性,遗传多样性较低。除曼陀罗外,寄主反应与分离物的地理来源没有明显的相关性。新疆CMV分离物的寄主反应与已报道的来自其他国家的CMV分离物有一定的差异。

松材线虫在松树体内扩散及其引起的寄主细胞反应研究进展

松材线虫病是松树最危险的病害之一,在世界上一些国家都有发生并且损失惨重。寄主松树感染松材线虫[Bursaphelenchus xylophiluz(Steiner&Buhrer)Nickle]40天后即可死亡。我国自1982年在南京中山陵风景区首次发现以来,到2000年底,因病枯死的松树达到2000多万株,直接经济损失25亿元,间接损失250亿元。松材线虫侵入寄主(主要是松树)后,在其体内迁移、分布及其引起的寄主内部细胞学、组织学的变化。病害发展过程与致病相关性。

双条杉天牛成虫对植物源引诱剂的选择性反应

利用"Y"形嗅觉仪、风洞法、笼养法及触角电位反应技术测定了双条杉天牛Semanotus bifas-ciatus Motschulsky对植物源引诱剂的生物活性。结果表明:双条杉天牛雌、雄成虫对侧柏木的植物源引诱剂TC-1,TC-2表现出较高的趋性。雌、雄成虫间及TC-1,TC-2间各项反应无显著差异,诱集的雌雄比例与自然基本吻合,为1∶1.1;而对侧柏叶的研制物TC-4的选择性较低。

芥菜霜霉病抗性基因及其特异反应

我们研究筛选了许多芥菜材料对14个霜霉病菌株的反应，其中有12个菌株来源于印度（IPOOA、IP02、IP03、IP04、IP04A、IP05、IP05A、IP33和IP33A来源于芥菜，IP09、IP14和IP13A来源于芜菁），有2个菌株来源于英国的甘蓝型油菜。用这些菌株鉴别出了16个特异寄主反应群（A—P）。A和B群具有最宽的抗性谱。A群感染IP05和IP05B菌株，中抗IP33菌株，抗其余所有菌株。B群感染IP03、IP04和IP04A菌株，抗其它菌株。

新疆寄生棉铃虫的赤眼蜂种系筛选和对温湿度反应的研究

赤眼蜂是棉铃虫卵的主要天敌 ,但自然种群数量很低 ,需人工繁蜂释放到田间 ,方可达到助益控害的目的。由于新疆地处内陆 ,干旱少雨 ,加上实行高密度矮化的独特栽培模式 ,使田间小气候以高温低湿为特点。所以 ,筛选适合当地气候特点的赤眼蜂种 (品系 )就成为工厂化繁蜂的首要任务。对此 ,我们对新疆棉铃虫赤眼蜂进行了种系筛选和赤眼蜂对温湿度反应的比较研究。对寄生新疆棉铃虫的暗黑赤眼蜂 (Trichogramma pintoi)和广赤眼蜂 (T.evanescens) 2个蜂种的 6个地理品系 (4个采自新疆棉铃虫 ,2个从乌孜别克斯坦引进 )进行了寄主选择性测定。当同时面临棉铃虫卵和米蛾卵时 ,根据接触卵次数和寄生量等特性 ,暗黑赤眼蜂乌兹别克 II品系对棉铃虫卵表现很强的选择性 ,其次是暗黑赤眼蜂库尔勒品系 ,其余品系对棉铃虫卵的选择性不明显或对米蛾卵表现强选择性。对采自新疆棉铃虫的 2个暗黑赤眼蜂地理品系和 1个广赤眼蜂品系以及从乌孜别克斯坦引进的 2个暗黑赤眼蜂地理品系进行了对温湿度反应的比较研究。各赤眼蜂种 (系 )后代性比之间的差异受温湿度组合的影响较小。同一种系中 ,雌蜂倾向于在较高温度下产更多的卵 ,达到更高的寄生率 ,但性比 (雄 /雌 )随温度升高而增大。在高温 (35℃ )低湿 (45 % )条件下 ,暗黑赤?

大豆胞囊线虫生理小种的鉴定及其比较电泳研究

对采自内蒙古、山东、黑龙江、江苏、北京五省市(区)大豆胞囊线虫种群在国际统一的鉴别寄主Pickett、Peking、PI88788、PI90763和Lee上进行了生理小种鉴定。鉴定出1号、2号、3号、4号、5号和6号生理小种。其中1号、3号和4号生理小种分布较广,为优势生理小种。应用改良的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)将大豆胞囊线虫1～4号生理小种中国种群的可溶性蛋白分为30～31条蛋白带。其中3号和4号生理小种有31条蛋白带,而1号和2号生理小种只有30条蛋白带,前者比后者多一条蛋白带,其分子量为91201。

云南省唐菖蒲花叶病的鉴定研究

对云南省的唐菖蒲花叶病进行调查和病样采集 ,通过鉴别寄主反应、电镜负染观察、免疫双扩散实验证实此病原为黄瓜花叶病毒CMV .

柑桔碎叶病毒研究

用汁液摩擦接种方法对柑桔碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)进行了进一步的生物学鉴定.结果表明,该病毒除在豇豆上引起枯斑外,还侵染克里芙兰烟(Nicotianaclevilandii)产生系统斑驳和轻花叶,侵染昆诺藜(Chenopodium quinoa)和苋色藜(C.amaranticolor)引起系统坏死和花叶,侵染鸡冠花(Celosia cristata)引起局部环斑.这些草本寄主均可作为CTLV的指示植物.在发病的柑桔叶汁液中,测得CTLV的稀释限点为10^(-5).经汁液摩擦接种,可以将CTLV从克里芙兰烟传播到木本指示植物柑桔和枳橙上.感病植物材料的组织超微结构观察结果表明:CTLV感染柑桔、枳橙、克里芙兰烟和昆诺藜均使其叶肉薄壁细胞的叶绿体出现淀粉沉积、叶绿体片层结构解体和消失;病毒在受感染的植株叶脉韧皮部细胞中紧密聚集,形成病毒结晶体;这种结构也出现在叶肉薄壁细胞中.这是关于该病毒组织病变的首次报道.用直接负染方法从感染CTLV的柑桔(枳橙)、克里芙兰烟和昆诺藜病叶中均能检查到线状病毒粒子,用改良的Deriick’s免疫电镜方法和琼脂双扩散方法测定均显示该病毒与苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)有强阳性反应,用ASGV抗血清可以进行植物材料中CTLV的检测.

建兰花叶病毒检测标准方法的建立

经过2004￣2005两年对上海口岸进境和进境后种植的260个兰花品种上建兰花叶病毒(CyMV)检测方法的研究,分别建立了检测和鉴定兰花上建兰花叶病毒的DAS-ELISA、电镜观察、鉴别寄主反应、RT-PCR和IC-RT-PCR的方法。

番茄黑环病毒检测方法的建立

通过汁液摩擦接种的方法接种几种鉴别寄主,筛选出检测番茄黑环病毒(TBRV)的一套鉴别寄主。同时建立了免疫学电镜检测方法。根据TBRV外壳蛋白基因的保守序列设计2对引物,应用RT-PCR均能从TBRV的6个分离物中扩增到与预期大小相同的DNA片段。利用抽提的质粒研究了RT-PCR方法检测TBRV的灵敏度。

聚类分析在棉花枯萎菌生理小种鉴定中的应用

为找到一种较为客观地鉴定生理小种的方法 ,对采用鉴别寄主法鉴定枯萎病菌生理小种的一些数据运用UPGMA聚类分析的方法进行处理 ,结果两者基本一致 ,且聚类分析可将传统方法分类不明确的菌株有个较明确的归属。传统试验方法结合聚类分析能使棉花枯萎菌生理小种的划分更加科学。

抗西瓜花叶病毒刺角瓜种质材料筛选

为确定甜瓜近缘种刺角瓜种质对西瓜花叶病毒(WMV)的抗性,在日光温室内,采用苗期人工摩擦接种的方法进行20份刺角瓜材料的抗性鉴定。结果表明,刺角瓜是西瓜花叶病毒的专性寄主,有较丰富的抗性种质,其中,PI292190表现为免疫,PI202681、Hm4-1-1、Hm1-4-1等3份种质表现为高抗。研究结果可为刺角瓜的抗病机制研究和挖掘、转育抗病毒基因提供丰富的抗性材料。

接种马铃薯软腐病菌引起的烟草叶片O_2^-·爆发

用马铃薯软腐病菌处理烟草后,以化学法测定了叶片中O2-·含量,发现在接种后1￣14h内只出现一次O2-·爆发,不同于以往植物悬浮细胞研究中出现的两次爆发结果。接种软腐病菌后2h和6h烟草叶片O2-·的电子自旋共振波谱图(electronspinresonance,ESR)显示了同样的一次O2-·爆发结果。接种后烟草叶片的线粒体和叶绿体O2-·爆发与叶片的同步,显示此两种细胞器参与烟草叶片在软腐病菌作用下的O2-·发生。无光照叶绿体O2-·的ESR谱线不出现,表明叶绿体O2-·可能来源于光合电子传递链。马铃薯软腐病菌作用下烟草叶片的O2-·爆发是多位点的。

辣椒轻斑驳病毒辽宁分离物的鉴定及序列分析

采用鉴别寄主、血清学及RT-PCR检测的方法对采自辽宁省葫芦岛地区的辣椒病毒进行了分离与鉴定,并将克隆得到的病毒CP基因进行测序及同源性比较.结果表明：该病毒分离物可侵染辣椒（Capsicum frutescens）产生局部枯斑、系统斑驳或花叶;局部侵染普通烟（Nicotiana tabacum）、心叶烟（Nicotiana glutinosa）、三生烟（Nicotiana tabacum. var. samsun）、矮牵牛（Petuniahybrida）产生坏死枯斑,在曼陀罗（Datura stramonium）、洋酸浆（Physalis pubescens）和苋色藜（Chenopodium amaranticolor）上引起褪绿斑;不能侵染番茄（Lycopersicon esculentum）、葫芦（Lagenaria siceraria）、甜瓜（Cucumis melo）、黄瓜（Cucumis sativus）、千日红（Gomphrena globosa）、白菜（Brassica pekinensis）、百日草（Zinnia elegans）、蚕豆（Vicia faba）和玉米（Zea mays）.辣椒病叶、病果和种子及表现症状的鉴别寄主叶片经DAS-ELISA检测均证实存在辣椒轻斑驳病毒（Pepper mild mottle virus, PMMoV）.通过RTPCR技术成功克隆获得该病毒CP基因,测序并分析其同源性表明,该分离物与GenBank 上已报道的13 个国内外PMMoV分离物同源性很高,核苷酸和氨基酸同源性均为94%-100%.将该分离物与其他13 个PMMoV分离物的CP基因序列一起构建系统发育进化树分析表明,该分离物与各亚洲分离物亲缘关系密切,并与国内各分离物可能具有相同的进化祖先.综上所述,辽宁辣椒上发现的病毒可鉴定为辣椒轻斑驳病毒辽宁分离物（PMMoV-LN）,此为辽宁辣椒生产区首次报道.由于PMMoV 具有典型的种传特性,而我国目前尚未将其列为检疫对象,这将促进病毒的快速扩展蔓延,因此应重视该病毒的危害性及对我国辣椒生产的潜在威胁,并加强其抗病育种和检验检疫工作以达到对PMMoV防控的目的.

广西根结线虫病害的病原鉴定

从广西不同地区采集的28种植物根结线虫病的病原,按病原线虫的主要形态学特征和寄主反应的鉴定方法,对每种病原进行了分类鉴定。其中穗状鸡冠花、胡椒、蕹菜、胡萝卜,芭蕉芋、鸡蛋果、莞荽(香菜)、苋苯、荷包豆、吉庆果、黄麻、黄穗鸡冠等根结线虫病的病原都是属南方根结线虫1号小种;风仙花、辣椒、蕹菜、番茄、独头鸡冠花、红穗鸡冠、罗汉果、黄麻、芹菜根结线虫有一种是南方根结线虫1号小种,另一种是爪哇根结线虫;甜叶菊、姜根结线虫病的病原有一种是南方根结线虫1号小种,另一种是花生根结线虫1号小种;吉庆果、四季海棠、茄、棕竹、柳树的根结线虫病的病原是爪哇根结线虫;罗汉果、丝瓜、红麻根结线虫病的病原有一种是爪哇根结线虫,另一种是花生根结线虫1号小种;花生根结线虫病的病原是花生根结线虫1号小种。发现二个新种:即水稻根结线虫病的病原是林氏根结线虫;柑桔根结线虫病的病原是孔氏根结线虫。

石河子北郊温室甜瓜根结线虫鉴定初报

2003年3月5日,从石河子北郊温室中采回具有大量根结的甜瓜根,经室内解剖镜检,发现根内有大量根结线虫和卵,通过形态观察和测量、鉴别寄主反应,雌虫酯酶同工酶凝胶电脉等方法进行比较鉴定,确定为南方根结线虫(Meoidogyneincognita)。

Foraging behavior of parasitoid chalcid to the essential oil from bark of Populus pseudo-simonii P. nigra and Quadraspidiotus gigas

采用四臂式嗅觉仪测定了长棒四节蚜小蜂（Pteroptrix longgiclava(Girault)(Hymenoptera:Aphelinidae))和黄胸扑虱蚜小蜂（Encarsia gigas(Tshumakova)(Hymenoptera:Aphelinidae)),对健康的小青×黑杨（Populus pseudo-simonii×P.nigra)树皮、被杨圆蚧（Quadraspidiotus gigas(Thiem & Gerneck)）危害的杨树皮、杨圆蚧1齿固定若虫的虫体和介壳的挥发油的趋性反应。测定结果表明：被杨圆蚧危害后的小青×黑杨树皮和杨圆蚧1龄因定若虫的介壳对长棒四节蚜小蜂和黄胸扑虱蚜小蜂成虫具有较大的吸引力。3－7μL介壳挥发油和5－9μL受害杨树皮挥发油对长棒四节蚜小蜂的寄主搜寻行为具有较强的引导作用。虫体的挥发油对小蜂的寄生定位也起到了一定的引诱作用。两种小蜂对健康树皮的挥发油几乎没有反应。图4表1参20。

燕麦

W973720 野燕麦后熟对休眠相关基因表达的转录和转录后调节[刊,英]/Li BaiLin…//Plant Physi-ology.-1996,110(4).-1267～1273[PBA,1997,67(4),3394]W973721 燕麦-秆锈菌不亲和互作中编码类 thau-matin 蛋白的寄主反应基因家系的分离和表达[刊,英]Lin KuoChih…//Molecular Plant-Microbe Inter-actions.-1996,9(6).-511～522[PBA,1997,67(2),1342]

蚜虫唾液蛋白研究进展

蚜虫属于半翅目蚜科,多为重要的农业害虫,通过刺吸式口器吸食植物汁液,传播病毒,其爆发常常造成重大经济损失。在漫长的协同进化历程中,植物建立了高效的防御系统以应对蚜虫威胁。为了克服植物的防御反应,蚜虫也发展了相应的反制手段,其中蚜虫在取食过程中分泌的唾液蛋白能调控植物防御反应,降解植物次生物质,从而在蚜虫与植物互作中发挥着至关重要的作用。本文综述了蚜虫唾液蛋白的组分鉴定方法和相关蛋白的功能,并对唾液蛋白在蚜虫防治的应用和今后的研究方向进行了展望。常见的蚜虫唾液蛋白组分的鉴定和分析方法包括唾液蛋白的酶活性分析、唾液蛋白组学分析、唾液腺转录组学和蛋白组学分析等。但这些方法各有利弊,仅采取一种分析方法不能客观全面地反映蚜虫唾液蛋白分泌谱,多种技术手段联合分析方可提供更为逼真详实的信息。蚜虫唾液蛋白种类繁多,可分为解毒酶、保护酶、水解酶、结合功能蛋白以及分类未知的效应蛋白等。蚜虫唾液蛋白功能多样,能参与唾液鞘的形成,诱导植物防御反应,促进蚜虫取食,提高蚜虫繁殖力等。通过RNAi干扰唾液蛋白编码基因会显著改变蚜虫取食行为,并降低蚜虫存活率、产蚜量和适合度。因此,唾液蛋白是防控蚜虫的理想靶标。目前,采用寄主诱导的基因沉默(host-induced gene silencing,HIGS)技术已培育了数种靶向唾液蛋白基因的高效抗蚜作物品系,展示出了良好的应用前景。从目前研究来看,各种蚜虫唾液蛋白谱急需采用多组学手段联合分析的方法来进行完整解析。各种唾液蛋白的具体功能方面的研究还严重缺乏,需从蚜虫、植物、两者之间的互作等多维度探究唾液蛋白的作用及相关的分子机制,为发展基于蚜虫唾液蛋白调控的蚜虫防治新策略打下基础。