环丙沙星与乳铁蛋白多肽嵌合体联用对铜绿假单胞菌生物膜及密度感知系统信号分子生成的抑制作用

目的比较环丙沙星(CIP)、乳铁蛋白多肽嵌合体(LFchimera)单用及二者联用对铜绿假单胞菌生物膜及密度感知(QS)系统信号分子(AHL)生成的抑制作用。方法以铜绿假单胞菌野生菌株PAO1为实验菌株,分为对照组(未干预的铜绿假单胞菌野生菌株PAO1)、CIP(0.04μg·m L-1)组、LFchimera(0.25μmol·L-1)组、LFchimera(1.00μmol·L-1)组、CIP(0.04μg·m L-1)+LFchimera(1.00μmol·L-1)组,分别定量测定并比较各组PAO1生物被膜和QS系统信号分子表达。结果与对照组PAO1生物膜定量表达(A590)(1.511 3±0.031 8)及QS系统信号分子表达(A420)(0.502 5±0.028 3)比较,CIP(0.04μg·m L-1)组(1.073 3±0.010 9,0.245 3±0.014 0)、LFchimera(0.25μmol·L-1)组(1.065 5±0.011 4,0.235 9±0.010 7)、LFchimera(1.00μmol·L-1)组(0.665 3±0.012 9,0.108 6±0.007 0)和CIP(0.04μg·m L-1)+LFchimera(1.00μmol·L-1)组(0.122 1±0.013 0,0.048 2±0.005 4)均下降(均P<0.05);CIP(0.04μg·m L-1)组和LFchimera(0.25μmol·L-1)组比较,PAO1生物膜定量表达和QS系统信号分子表达差异无统计学意义(P>0.05);LFchimera(1.00μmol·L-1)组PAO1的生物膜定量表达和QS系统信号分子表达较LFchimera(0.25μmol·L-1)组和CIP(0.04μg·m L-1)组均降低(均P<0.05);CIP(0.04μg·m L-1)+LFchimera(1.00μmol·L-1)组和各单独用药组比较,PAO1生物膜的定量表达和QS系统信号分子表达均下降(均P<0.05)。结论亚抑菌浓度的CIP和LFchimera都对铜绿假单胞菌生物膜的形成和QS系统信号分子的生成有抑制作用,且提高LFchimera浓度可加强抑制作用;CIP与LFchimera联用能增强抑制作用,这种作用可能是通过抑制QS系统信号分子的生成实现。

密度感知系统对铜绿假单胞菌感染的免疫作用

目的研究密度感知信号(QS)系统在铜绿假单胞(PA)菌致大鼠肺部感染中的免疫调节作用,探讨其作用机制。方法(1)300只健康清洁级SD大鼠随机分为3组,应用锐孔喷射装置,制成两株铜绿假单孢菌(野生型铜绿假单孢菌PAO1及密度感知基因缺失的变异株PAO1- JP2)藻酸盐包裹体凝胶小珠,接种至大鼠肺部,建立两组慢性肺部感染模型,以无菌生理盐水-藻酸盐包裹体接种组作为对照组。(2)在接种后3、7、14、28d,取每组大鼠肺组织匀浆和血清检测,比较各组大鼠肺组织中免疫学指标IFN-γ、IL-4及血清中IgG、IgM、IgG1、IgG2a的不同,评价两株菌的致病差异性。结果(1)PAO1感染组大鼠死亡率(29.7%)明显高于PAO1-JP2感染组(11.0%)。(2)与PAO-JP2组相比,在感染早期(第3天),PAO1组肺组织中IFN-γ明显升高;在感染的中期(第7天),PAO1组IFN-γ、IL-4均显著升高,感染的后期(第14～28天),PAO1组IFN-γ、IgG2a持续降低,IL-4、IgG、IgG1则持续升高。结论QS系统通过干预机体免疫系统和调控致病因子,在PA菌致病及免疫调节中起重要作用。

铜绿假单胞菌生物被膜密度感知系统分子机制的研究进展

铜绿假单胞菌通过形成生物被膜（biofilm，BBF）能够持续地将浮游的细菌保护起来便于细菌繁殖，是慢性或持续性感染的原因之一。密度感知系统（quorurn Isensing systems，QSS）通过细胞一细胞间的信号传递在生物被膜形成中起到重要的作用。本文将就OSS系统在铜绿假单胞菌的BBF形成中的分子机制进行综述。

密度感知系统与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的防治

研究表明，不适当的抗菌药物应用不仅会导致耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的增加，也会增强其致病性。对金黄色葡萄球菌（金葡菌）感染所致全身性感染及多器官功能障碍综合征（MODS）的防治已成为现代创伤外科和重症医学科面临的棘手难题之一。

密度感知信号系统在体内铜绿假单孢菌感染中的作用机制

铜绿假单孢菌是一种机会致病菌，可以导致很多种类型的感染。细胞一密度一依赖信号传递的机制被称为密度感知机制，在角膜、肺部、烧伤的感染发病机制中起重要作用。此外，密度感知信号系统与铜绿假单孢菌形成的生物被膜关系密切。已有初步的证据密度感知信号系统可能通过控制细菌毒性因子的产生或者调节宿主免疫系统来发挥其效应。

密度感知信号系统在铜绿假单孢菌致肺部感染中的作用

细胞 密度 依赖信号传递的机制被称为密度感知信号机制 ,它在机会致病菌铜绿假单孢菌致肺部感染的发病机制中起重要作用。此外 ,密度感知信号系统与铜绿假单孢菌形成的生物被膜关系密切。已有初步的证据提示铜绿假单孢菌可能通过密度感知信号系统来调节宿主免疫系统或者影响宿主的转录。

密度感知信号系统在铜绿假单胞菌致大鼠肺部感染中的作用

【论文特点介绍】本实验比较了PAO1和PAO—JP2的弹性蛋白酶活性、外毒素A的含量，结果显示：PAO—JP2株显示了弹性蛋白酶活性、外毒素A表达的完全缺失。结合体内实验结果，证实了密度感知信号系统通过控制铜绿假单孢菌细胞外重要毒性因子，如弹性蛋白酶活性、外毒素A的表达，在铜绿假单孢菌致病作用中扮演重要的角色。使用特定合成的AI或QS抑制剂，来达到抑制铜绿假单孢菌毒性因子的表达，减低其致病作用，是颇有前景的一种抗菌疗法。

环丙沙星联合乳铁蛋白多肽嵌合体对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜和QS系统信号分子表达的影响

目的:对比分析环丙沙星(CIP)、乳铁蛋白多肽嵌合体(LFchimera)单独使用和二者联合使用处理铜绿假单胞菌对其生物膜及密度感知(QS)系统信号分子(AHL)生成的抑制作用。方法:以铜绿假单胞菌野生菌株PAO1作为实验菌株,随机分为5组,分别为对照组(未做任何处理),实验组分为CIP(0.04μg/ml)处理组、LFchimera(0.25μmol/L)处理组、LFchimera(1.00μmol/L)处理组、CIP(0.04μg/ml)+LFchimera(1.00μmol/L)处理组,分别定量测定且比较各组PAO1生物被膜和QS系统信号分子表达情况。结果:CIP组、LFchimera(0.25μmol/L)组、LFchimera(1.00μmol/L)组、CIP+LFchimera组与对照组相比;LFchimera(1.00μmol/L)组与CIP组/LFchimera(0.25μmol/L)组相比;CIP+LFchimera组与其他所有组相比,POA1生物膜和QS系统信号分子表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。CIP组与LFchimera(0.25μmol/L)组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CIP和LFchimera联用抑菌作用增强,此抑制作用可能与抑制QS系统信号分子有关。

铜绿假单胞菌LasI基因反义核酸载体的构建及生物学作用研究

目的构建LasI基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasIantisense,转化入铜绿假单胞菌并分析其生物学作用。方法PCR扩增LasI基因序列,反向克隆法构建LasI基因的反义核酸原核表达载体pUCP18/lasIantisense,并转化铜绿假单胞菌。通过检测转化菌的LasB和LasR基因表达,测定外毒素的活性和绿脓菌素的表达等指标,分析pUCP18/lasIantisense的生物学作用。结果成功构建pUCP18/lasIantisense并转化铜绿假单胞菌,且有效表达,转化菌的毒力因子弹性蛋白酶、外毒素和绿脓菌素表达水平均降低。结论pUCP18/lasIantisense可以降低铜绿假单胞菌毒力因子表达,提示LasI基因可作为医院内铜绿假单胞菌感染治疗的一个新的靶点。