密度梯度离心联合上游法的精液处理在供精体外受精胚胎移植中的应用

目的:观察供精体外受精-胚胎移植术(D-IVF)中采用密度梯度离心法联合上游法处理精液后的胚胎情况。方法:回顾本院2013年1月-2014年7月D-IVF 135个周期,观察冷冻精液复苏后经采用密度梯度离心法联合上游法处理后精子总活动率、前向运动精子活动率等精液情况,以及受精以后的受精率、卵裂率、临床妊娠率,对照组为同期46个因丈夫梗阻性无精行ICSI的周期。结果:处理后精子总活动率、前向运动精子活动率均大大提高,但是精子密度却大大下降,处理前后比较差异均有统计学意义(P<0.05);受精以后的实验室资料和对照组比较,各项参数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:密度梯度离心法联合上游法的精液处理方法在D-IVF中是一种稳定可行的方法。

密度梯度离心法联合上游法处理精液对精子功能的影响

目的分析密度梯度离心法联合上游法处理精液对精子功能的影响。方法 200份精液标本作为研究材料,根据材料编号不同随机分为对照组与实验组,各100份。对照组使用密度梯度离心法进行精液处理检测,实验组使用密度梯度离心法联合上游法进行精液处理检测,比较两种检测方法对精子功能的影响。结果实验组样本存活率、活力以及形态均显著优于对照组,精子DNA碎片率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组样本精子DNA碎片指数(DFI)、高可染性精子指数(HDS)水平分别为(22.57±4.46)%、(13.89±2.24)%,均明显优于对照组的(13.21±3.18)%、(8.12±2.59)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论密度梯度离心法联合上游法具有较好的精液处理能力,有利于提高精子的存活率,且不会造成精子DNA损伤,在精液处理中发挥出了较好的应用及推广价值。

密度梯度离心法与直接上游法优化处理精液对宫腔内人工授精临床妊娠率的影响

目的:应用密度梯度离心法和直接上游法处理不明原因不孕和轻度精液异常患者的精液,比较两种方法对宫腔内人工授精(IUI)临床妊娠率的影响。方法:回顾性分析2013年1月至2014年12月期间,在我中心进行促排卵+IUI的571个周期患者,统计其精液优化处理方法和临床妊娠率。结果:总体临床妊娠率为密度梯度离心法(17.8%)显著高于直接上游法(11.4%)(P<0.05);不明原因不孕组的临床妊娠率为密度梯度离心法(33.7%)显著高于直接上游法(20.3%)(P<0.05);轻度精液异常组的临床妊娠率为密度梯度离心法(11.6%)显著高于直接上游法(7.6%)(P<0.05)。结论:密度梯度离心法相对直接上游法能有效提高因不明原因不孕和轻度精液异常患者IUI的临床妊娠率。

宫腔内人工授精中应用上游法和密度梯度离心法的系统评价

背景:精子体外优选方法很多,最常见的是上游法和密度梯度离心法。采用何种方法来减少体外处理过程对精子的不良刺激,优选出具有良好受精潜能的精子,目前尚无定论。目的:系统评价上游法和密度梯度离心法在宫腔内人工授精中的应用,比较两种精子优选法的优劣。方法:计算机检索PubMed、Cochrane Library、EMBASE等数据库,手工检索专业相关期刊,检索时间为1966-01/2009-02。纳入关于两种精液优选法在宫腔内人工授精中应用的随机对照试验或半随机对照试验,评价纳入研究的方法学质量,并提取有效数据用RevMan5.0.软件进行Meta分析。结果与结论:纳入6个研究,包括4个随机对照试验和2个半随机对照试验,共486例患者,1099个周期(优选精子的次数)。Meta分析结果显示,上游法与梯度离心法相比,周期妊娠率[OR=1.11,95%CI(0.8,1.55)]、流产率[OR=0.31,95%CI(0.09,1.04)]、精子密度[WMD=-0.89,95%CI(-14.17,12.38)]、精子活力[WMD=-2.31,95%CI(-7.27,2.65)],4项测量指标差异均无显著性意义。尽管与其他精子优选法相比,上游法与梯度离心法的周期妊娠率较高,但是该系统评价结果还不能提示这两种方法在宫腔内人工授精应用中何者临床效果更好。建议今后进行更多高质量的随机双盲对照试验为临床提供最佳证据,并且增加处理前后精子的质量对比,包括精子活力、精子密度以及精子功能等指标测量,以全面考察两种方法的优劣。

密度梯度离心加上游法处理对精子形态学的影响

目的观察男性精液经密度梯度离心加上游法处理前、后精子形态学改变情况,探讨密度梯度离心加上游法对精子形态学的影响。方法选择行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕治疗的93对不孕夫妇,男方精液在经密度梯度离心加上游法处理前、后分别进行精液常规检查,运用Diff-Quick精子形态分析法进行精子形态学分析。结果经密度梯度离心加上游法处理后正常形态精子率显著增加,中段畸形精子率、混合畸形精子率与处理前比较有明显下降(P<0.05)。结论经密度梯度离心加上游法处理可降低中段畸形精子率和混合畸形精子率,显著提高正常形态精子率。

密度梯度离心法加上游法处理精液对精子运动参数及形态学的影响——附102份标本分析

目的:了解密度梯度离心法加上游法处理精液对精子各运动参数和形态学的影响。方法:采用密度梯度离心法加上游法处理102份男性精液标本,应用计算机辅助精液分析系统软件分析精子各项运动参数,并运用改良巴氏染色法观察精子形态。结果:经密度梯度离心法加上游法处理后,精子活动率、活动力、曲线速度、直线速度等运动参数值均明显提高(均为P<0.01)。经该法处理后,畸形精子百分率、精子畸形指数均明显降低(均为P<0.01)。结论:密度梯度离心法加上游法可使精子的运动参数及形态学均得到明显改善,是较好的体外处理精液方法。

密度梯度离心法联合上游法制备精子除菌效率观察

目的对密度梯度离心法联合上游法制备精子的除菌效率进行评价。方法选择2013年12月—2014年1月在解放军202医院全军计划生育优生优育技术研究所进行辅助生殖技术治疗的男性志愿者100例,将精液培养无细菌感染者设为对照组(n=50),有细菌感染者设为实验组(n=50)。采用密度梯度离心法联合上游法进行精子制备,应用精液常规分析、细菌培养方法进行评估。结果实验组与精液原液比较,经密度梯度离心后精液上清液与沉淀物中细菌生长率比较均显著下降(P<0.05),经上游后精液上清液与沉淀物中细菌生长率下降更为明显(P<0.01),上清液培养无细菌生长。100份精液标本精子制备后前向运动与非前向运动精子之和百分比与制备前比较显著上升(P<0.05);实验组前向运动与非前向运动精子之和百分比与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用密度梯度离心法联合上游法制备精子隔离细菌效果好,精子活动力显著提高。

密度梯度离心法与直接上游法在宫腔内人工授精中的应用效果分析

目的探讨密度梯度离心法与直接上游法两种方法优化处理精液行宫腔内人工授精对精子动态参数和受孕率的影响。方法对116例患者共254个IUI治疗周期作回顾分析,将254个周期随机分为A、B两组,两组精子的动态参数无显著性差异,A组采用直接上游法,B组采用密度梯度离心法优化处理精液后行宫腔内人工授精,比较两种方法的精子检测结果与妊娠结局。结果两种方法处理前后精子密度、活率、活力(a+b)、畸形率的差异均有显著性(P<0.05);两种方法处理后精子密度的差异有显著性(P<0.05);密度梯度离心法高于直接上游法,但活率、活力、畸形率的差异无显著性(P>0.05),两组间的临床妊娠率及流产率的差异也无显著性(P>0.05)。结论两种方法处理精液均可改善精子动态参数,但行宫腔内人工授精得到的临床妊娠率差异无显著性(P>0.05)。

直接上游法与梯度离心结合上游法优选精子的比较研究

目的应用直接上游法和梯度离心结合上游法处理不明原因不孕患者的精液,探讨两种优选精子的方法。方法回顾性分析2015年1月至2016年12月在我中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术助孕的夫妇1 329对,分别采用直接上游法和密度梯度离心结合上游法进行精液标本的优选,对照分析两组卵子的受精率。结果直接上游法检测501个周期,获得卵子5 251枚,受精率为75.29%;密度梯度离心结合上游法检测828个周期,获得卵子8 753枚,受精率79.32%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过两种方法的比较分析,密度梯度离心结合上游法可以明显提高卵子的受精率。

精液优化处理后DNA碎片指数与IVF-ET胚胎质量及妊娠结局的关系

目的:评估经密度梯度离心联合上游法优化处理后的精子DNA碎片指数(DFI)与辅助生殖体外受精-胚胎移植(IVF-ET)胚胎质量及妊娠结局的关系。方法:回顾性分析2022年4月至12月在郑州大学第一附属医院生殖医学中心因单纯输卵管因素行IVF-ET的257个周期,比较男方精液优化前后精液参数和精子DFI;按优化后精子DFI将其分为高DFI组(DFI>5)与低DFI组(DFI≤5),比较两组的胚胎发育及妊娠结局;根据临床妊娠情况分为妊娠组与非妊娠组、持续妊娠组及早期流产组,比较精子DFI情况。结果:与处理前相比,精液优化处理后前向运动精子及正常形态精子百分比提高,精子DFI下降(P<0.001)。精子优化处理后高DFI组的早期流产率高于低DFI组(P<0.05)。105例临床妊娠周期中早期流产组精液优化处理前、后DFI均高于持续妊娠组(P<0.05)。结论:密度梯度离心联合上游优化处理是一种有效的精液制备方法,可提高精子前向运动能力和正常形态精子比例,降低精子DFI;优化后精子高DFI可能增加临床妊娠后早期流产的风险。

浮游器优选精子方法对体外受精胚胎发育结局的影响

目的探讨密度梯度离心结合上游法和浮游器上游法优化精子对两种体外受精IVF/ICSI胚胎发育的影响。方法回顾性分析2021年3月~2022年2月在海南省妇女儿童医学中心生殖医学中心行IVF/ICSI治疗周期的病例。分为密度梯度离心结合上游法(IVF周期:n=276;ICSI周期:n=79)和浮游器上游法(IVF周期:n=126;ICSI周期:n=78),比较两组精子优化方法在IVF/ICSI治疗周期中的受精率、卵裂率、优质胚胎率、囊胚形成率及可利用囊胚率等指标之间的差异。结果IVF周期浮游器上游法组的双原核受精率为(72.2±19.9)%显著高于密度梯度离心结合上游法组(68.0±18.0)%,差异有统计学意义(P<0.05)。浮游器上游法组多原核受精率显著低于密度梯度离心结合上游法组(5.3±9.1)%vs(7.4±9.9)%;浮游器上游法组优质囊胚率(62.6±33.0)%显著高于密度梯度离心结合上游法组:(53.2±34.0)%,差异均有统计学意义(P<0.01)。ICSI周期的浮游器上游法组D3优质胚胎率为(38.0±27.7)%,显著高于密度梯度离心结合上游法组(28.2±25.3)%;浮游器上游法组优质囊胚率为(52.6±37.0)%,显著高于密度梯度离心结合上游法组(40.2±38.3)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论浮游器上游法优化精子后可获得更高的正常受精率和优质胚胎率,降低多原核受精率,减少精子损伤,提高胚胎质量。

不孕症患者宫腔内人工授精精子优选方法分析

目的:比较分析精子不同优选方法与宫腔内人工授精(IUI)成功率的相关性,以提高IUI妊娠率。方法:回顾性分析本院生殖中心门诊不孕症患者452例671个IUI周期,按精子优选方法分为3组:含5%人血清白蛋白(HSA)的Earle's液上游法、SpermR inse上游法、SupraSperm密度梯度离心法。比较各组患者的处理前后精子密度与活动率及临床妊娠结局。结果:3种精子优选方法处理后精子活动率及a+b级精子百分率显著增加(P<0.01)。含5%HSA的Earle's液上游法221个IUI周期,妊娠21个周期,周期临床妊娠率9.5%;SpermR inse上游法215个IUI周期,妊娠34个周期,周期临床妊娠率15.8%,与含5%HSA的Earle's液上游法比较有显著性差异(P<0.05);SupraSperm密度梯度离心法235个IUI周期,妊娠34个周期,周期临床妊娠率14.5%,与含5%HSA的Earle's液上游法比较无统计学差异(P>0.05)。结论:SpermR inse上游法的IUI临床妊娠率明显高于含5%HSA的Earle's液上游法,适用于各类不孕症患者。SupraSperm密度梯度离心法也具有较高的周期临床妊娠率,洗涤效果好,操作便捷高效,尤其适用于含炎症细胞、死精子和畸形精子等不良成分较多的精液。

精子优选方法对人工授精治疗结局的影响

目的:回顾分析不同精子优选方法对人工授精治疗结局是否有影响。方法:选择2010年1月～2011年12月在本中心行AIH治疗的504对夫妇共732个周期为研究对象,按精子优选处理方法进行分组:上游法314个周期,密度梯度离心法418个周期,比较两种精子优选方法行人工授精在临床妊振率、流产率和子代性别的差异。结果:上游法和密度梯度离心法的周期妊娠率分别为8.6%、6.7%,流产率分别为25.9%、17.9%,差异无统计学意义(P>0.05);两种方法处理后行人工授精的婴儿性别比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:上游法和密度梯度离心法应用在夫精人工授精中临床妊娠率、流产率无差异,精子优选方法对子代性别无影响。

两种精子优选法对正常形态活动精子回收率的对比研究

目的:探讨两种精子优选法对正常形态活动精子回收率的对比情况。方法:选取我院生殖中心门诊就诊的50例正常精液样本作为研究对象,每份标本分成上游法组和PureSperm法组,观察两组精子优选法优选后精子运动参数、回收效果以及回收率。结果:上游法和PureSperm法其优选后a级精子率、a+b级精子率、VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、LIN、WOB、STR等指标均明显优于优选前(P<0.05),但两组优选法后精子运动参数比较均无统计学差异(P>0.05);优选后上游法和PureSperm法其密度、活力、头部、中段和尾端畸形率、SDI均明显优于优选前(P<0.05),其中PureSperm法优选后密度明显高于上游法,但活力明显低于上游法(P<0.05),活力、头部、中段和尾端畸形率、SDI等两种优选法比较无统计学差异(P>0.05);PureSperm密度梯度离心法a级活动精子和a+b级活动精子和正常形态活动精子回收率明显高于上游法(P<0.05),差异有统计学意义。结论:两组精子优选法均可获得较好的优选精子,PureSperm密度梯度离心法的精子回收率更高,但活力较低。

两种精子处理方法的卵细胞胞质内单精子显微注射结局的比较

目的：评价密度梯度离心和改良上游法两种处理活动精子的分离方法在卵细胞胞质内单精子显微注射（ICSI）中的效果，从而指导临床应用。方法：选取2004年10月-2005年4月在本中心完成的42例患者42个周期为研究对象，前瞻性比较了两种精子分离方法的受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、精子畸形率、精子回吸收率等。结果：两种方法分离精子所获得的ICSI胚胎移植（ICSI—ET）中，受精率、卵裂率、优胚率、临床妊娠率均无明显差异，但是改良上游法所获得的精子畸形率明显高于密度梯度离心法（P〈0，01）；重度少精子症密度梯度离心法回吸收精子优于改良上游法（P〈0．01）。结论：在辅助生育技术ICSI—ET中，密度梯度离心法分离活动精子临床妊娠结局与改良上游法无明显差异；除对重度少精子症者外，均可以采用改良上游法。

两种精液优化法在宫腔内人工授精中的应用效果分析

目的探讨密度梯度离心法与直接上游法两种方法优化处理精液行宫腔内人工授精(IUI)对精子动态参数和妊娠率的影响。方法根据精液检查结果将IUI妇女分为2组,A组:采用直接上游法;B组:采用密度梯度离心法,优化处理精液后行IUI。比较两种方法处理后的精子检测结果与妊娠结局。结果两种方法处理前、后精子密度、活率、活力(a+b)、前向运动精子总数(PTMS)的差异具有统计学意义(P<0.05);两种方法处理后,各项指标的差异无统计学意义(P>0.05),两组间临床妊娠率的差异也无统计学意义(P>0.05)。结论两种方法处理精液均可改善精子动态参数,但行IUI后临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。

两种精子处理方法对精子活力及正常形态率影响比较

目的比较上游法和密度梯度离心法对正常精液的处理效果。方法回顾性分析2014年1月~2015年12月男方精液正常因女方因素来我院进行IUI的临床资料,比较上游法和密度梯度离心法后处理前后精子活力及正常形态率。结果两种方法处理后精子活力和正常形态精子率均较处理前升高,精子活力的提高差异有统计学意义（P〈0.05）,与上游法相比,密度梯度离心法处理的精液具有更高的密度和正常形态精子比率（P〈0.05）。结论对正常的精液,两种处理方法均能得到合适的精子,但对于液化不好的,或者精子总数少的以及精液正常精子比例少的患者,可采用密度梯度离心法处理精液。

改良精液优化方法对胚胎发育结局的影响

目的探讨不离心直接上游法精液优化对胚胎发育的影响。方法随机选取560例在本院行常规体外受精的患者,其中198例为精液处理为上游法,362例为精液处理为梯度离心法,比较两组间受精率、卵裂率、优质胚胎、囊胚形成率和优质囊胚率。结果两组在受精率、卵裂率、囊胚形成率及优质囊胚率方面并无统计差异(P>0.05),在优质胚胎率方面,上游组高于梯度离心组(44.98%vs 40.64%,P<0.05),差异有统计学意义。结论不离心直接上游法精液优化能够给胚胎发育产生积极影响,可有效提高优质胚胎率,且操作方法简单快捷,应用价值高。

宫腔内人工授精助孕患者精子制备方法的选择策略

目的为丈夫精液正常行自然周期宫腔内人工授精(IUI)第一周期患者选择最佳的精子制备方法。方法采用区组随机分组的方法将研究对象分为4组(标准上游组,直接上游组,密度梯度离心组和密度梯度离心和直接上游组)。精子计数应用Makler计数板,形态学分析采用伊红-苏木精染色法,妊娠结果的判定为IUI28d后行超声监测到胎囊及胎心。结果四组患者的妊娠率、活产率及流产率无差异。密度梯度离心组的精子处理时间最少(13.5分)。密度梯度离组的a+b级精子回收率(42.5±15.7)%及a+b级精子总回收数最高(55.3±25.7)百万。密度梯度离心组(26.5±11.6)%和密度梯度离心加上游组的回收精子畸型率低(24.7±12.8)%。结论丈夫精液正常行第一周期IUI自然周期助孕的患者,精子制备方法首选直接上游法。

3类洗涤法处理不同质量精液标本的效果比较及在IUI中的应用选择

目的:通过比较密度梯度离心法(density-gradient centrifugation,DGC)、上游法(swim-up,SU)和简单洗涤法(simple washing,SW)处理不同质量精液标本的效果,优选出最合适的宫腔内人工授精(Intrauterine insemination,IUI)精液洗涤方法。方法:选取男科实验室行精液常规检查的患者中收集精液量≥3 m L的精液标本90份,其中精子浓度<15×10~6/m L的少精症患者精液标本23份,浓度与活力正常(浓度≥15×10~6/m L,PR≥32%且PR+NP≥40%)的精液标本67份,每份精液标本各取3个1 m L分别用密度梯度离心法、上游法和简单洗涤法处理。通过不同方法的洗涤处理,比较各组精子洗涤前后的浓度、活力(PR)及回收率。结果:3种处理方法洗涤后的PR较洗涤前均有显著提高(P<0.05);在处理后的精子浓度方面,简单洗涤法处理要显著高于其余两类方法(P<0.05);在处理后的PR和活率(PR+NP)方面,密度梯度离心法和上游法又要高于简单洗涤法(P<0.05);在回收率方面,密度梯度离心法和简单洗涤法则显著高于上游法组(P<0.05)。结论:在处理少精症患者精液标本时,上游法因其较低的回收率不适宜被采用;当精子浓度<15×10~6/m L且精子总数小于正常值(39×10~6个)时,为保证处理后最终前向精子总数>10×10~6个,精子标本不适合过多次数的洗涤处理,宜采用简单洗涤法;而只有当精液体积较大时,在保证IUI精子终浓度的同时,密度梯度离心法较简单洗涤法能更好地去除白细胞和不成熟生殖细胞等杂质,而更适宜被采用;在处理浓度活力正常精液标本时,密度梯度离心法和上游法较之简单洗涤法能获得更高的精子活力(P<0.05)而更适宜被采用;同时,密度梯度离心法因较之上游法具有更高的回收率(P<0.05),且具备操作易标准化和操作时间短等特点而更具实用价值。