植物富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶的生物学功能

介绍了植物富含亮氨酸重复序列(leucine-richrepeat,LRR)型类受体蛋白激酶概念、最近发现的这类蛋白激酶的亚结构域特征;总结了目前已确定其功能的LRR型类受体蛋白激酶,并分别阐述了它们在参与植物抗逆性反应、发育调控及激素的信号转导等过程中的生物学功能;着重介绍和讨论了LRR型类受体蛋白激酶复合物之间及其与下游成分KAPP之间互作而产生信号传递的分子机理。最后展望了LRR型类受体蛋白激酶生物学功能、信号转导机制、以及应用于生产实践的研究前景。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1、E-Cadherin和EGFR在胃癌中的表达和临床意义

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)、上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)和表皮生长因子受体(EGFR)在胃癌中的表达和及其与临床病理特征的相关性。方法选取50例胃癌患者作为研究对象,并选取正常胃黏膜组织50例作为对照。用免疫组化方法检测两组患者卵巢组织中的LRIG1、E-Cadherin和EGFR的表达,分析LRIG1、E-Cadherin和EGFR的阳性表达率在胃癌患者不同临床病理特征中的差异。采用spearson秩相关分析LRIG1,E-Cadherin和EGFR的阳性表达率的相关性。结果胃癌组的LRIG1、E-Cadherin的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组,胃癌组的EGFR的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组。胃癌中LRIG1、E-Cadherin和EGFR阳性表达率与临床分期、病理分级和淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄、组织学类型无关(P>0.05)。LRIG1、E-Cadherin和EGFR在胃癌患者中的阳性表达率具有相关性,共同调控参与胃癌的发生和发展。结论 LRIG1、E-Cadherin在胃癌中低表达和EGFR在胃癌中高表达,与胃癌的进展和转移相关。

乳腺浸润性导管癌患者术后癌组织中真核翻译起始因子4e、3h和富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5表达特征

目的检测乳腺浸润性导管癌患者术后癌组织中真核翻译起始因子(EIF)4e、3h和富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5的表达及其相关性。方法 132例乳腺浸润性导管癌术后组织蜡块及临床资料为研究组,经病理证实为正常乳腺小叶和导管上皮组织85例为对照组,选择EIF4e、3h和LGR5的多克隆性抗体,应用免疫组化SP法检测3种蛋白的表达。结果研究组EIF4e、3h和LGR5表达阳性率明显高于对照组,研究组EIF4e、3h和LGR5表达与肿瘤最大径、脉管浸润、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和Ki67的表达均具有相关性,EIF4e表达与淋巴结转移相关。研究组EIF4e和3h、EIF3h和LGR5表达正相关。结论乳腺浸润性导管癌患者术后组织中EIF4e、3h和LGR5高表达且具有协同作用,三者参与肿瘤的发生和进展,术后联合检测EIF4e、3h和LGR5的表达可能对判断预后有一定价值。

富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5、血管内皮生长因子及其受体2在胃腺癌组织中表达

目的应用免疫组化方法检测胃腺癌中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5、血管内皮生长因子(VEGF)和其受体(VEGFR)2的表达。方法 58例胃腺癌患者的临床资料及术后蜡块组织作为研究组,选择上述患者在距肿物边缘>5 cm、经病理主治医师证实为非癌组织的胃黏膜组织的蜡块组织47例作为对照组,应用免疫组化方法检测LGR5、VEGF和VEGFR2的表达。结果研究组中LGR5、VEGF和VEGFR2的阳性率均明显高于对照组,研究组中LGR5、VEGF和VEGFR2的阳性率与浸润深度和脉管浸润相关,LGR5的阳性率与分化程度、Ki67增殖指数相关,VEGF和VEGFR2的表达与肿瘤的最大径相关。相关性分析显示研究组中LGR5和VEGF、VEGF和VEGFR2均具有正相关性。结论 LGR5、VEGF和VEGFR2在胃腺癌术后组织中高表达,三者可以促进肿瘤的形成和进展。LGR5可能与VEGF和VEGFR2蛋白的表达有协同作用。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1基因特异性RNA干扰表达载体的构建、鉴定和稳定株筛选(英文)

背景:有研究表明富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains1,LRIG1)基因在神经胶质瘤细胞中呈低表达,LRIG1基因过表达后对神经胶质瘤细胞的LRIG1mRNA和蛋白表达均明显增强和抑制其生物学行为,但却很少有研究从阻断LRIG1基因的表达的角度进行论证。目的:构建针对LRIG1基因的特异性RNA干扰质粒,稳定转染人脑胶质瘤GL15细胞系,观察其对目的基因LRIG1表达的影响。方法:根据GenBank提供的LRIG1基因序列设计2条RNA干扰序列,命名为LRIG1-shRNA1和LRIG1-shRNA2,并设计1条非特异性序列作为阴性对照,命名为pGenesil2-negativeshRNA。合成各自的寡核苷酸链,退火后与pGenesil2质粒载体连接,转化扩增后测定序列。用不同浓度的G418作用于GL15细胞确定G418对GL15细胞的筛选浓度。将3种重组表达载体转染GL15细胞,G418筛选后挑单克隆并扩增获得稳定株。Western blot检测LRIG1蛋白的表达。结果与结论:构建的重组pGenesil2-LRIG1-shRNA质粒经限制性酶切及DNA测序分析证明其序列插入正确。转染pGenesil2-LRIG1-shRNA1(LRIG11)细胞和pGenesil2-LRIG1-shRNA2(LRIG12)细胞LRIG1蛋白表达水平较阴性对照组pGenesil2-negativeshRNA分别下降47.9%(P<0.01)和32.8%(P>0.05)。结果证实,实验成功构建了针对LRIG1基因的特异性shRNA表达载体pGenesil2-LRIG1-shRNA1,其转染GL15细胞后可抑制LRIG1的表达。

NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白

目的:寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)结构域相互作用的蛋白质分子。方法:克隆NALP3富含亮氨酸重复序列(NALP3-LRR)结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果:成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论:NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。

肺腺癌中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5、上皮型和神经型黏附素表达

目的检测肺腺癌组织中富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体(LGR)5、上皮型(E-)和神经型黏附素(N-cadherin)的表达特征。方法55例肺腺癌患者临床资料和术后蜡块组织作为观察组,45例距肿物边缘大于3 cm正常肺组织作为对照组。应用免疫组化SP法检测两组中LGR5、E-和N-cadherin的表达。结果两组中LGR5、E-和N-cadherin的阳性率差别显著。观察组中LGR5、E-和N-cadherin的阳性率均与肿瘤最大径及淋巴结转移相关,LGR5的阳性率与伴有坏死有关,E-和N-cadherin与伴有脉管内瘤栓相关。线性相关分析显示观察组中LGR5和E-cadherin的表达具有负相关性,而其他指标间未见相关性。结论肺腺癌术后组织中LGR5、E-和N-cadherin均表达异常,三者对肿瘤的形成和肿瘤的进展可能有促进作用。LGR5与E-cadherin可能具有负向协同作用。

三阴性乳腺癌组织富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5表达及其对MDA-MB-231细胞免疫微环境的调控作用

目的检测富含亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5(LGR5)在三阴性乳腺癌组织中的表达,并探究其对肿瘤细胞免疫微环境的影响。方法收集2017年1月至2019年12月于四川大学华西医院龙泉医院行手术治疗的40例三阴性乳腺癌(TNBC)患者的癌组织及癌旁组织,以及培养乳腺上皮癌细胞株MDA-MB-231作为研究对象。采用免疫组织化学染色法检测癌组织及癌旁组织中LGR5的表达水平。将MDA-MB-231细胞随机分为空白对照组、NC shRNA组和LGR5 shRNA组,采用脂质体介导法将LGR5 shRNA质粒及NC shRNA质粒分别转染至LGR5 shRNA组和NC shRNA组细胞,空白对照组细胞正常培养;转染24h后,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot检测细胞中LGR5的表达,采用MTT法和流式细胞术检测细胞存活与凋亡,采用Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-13、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中转化生长因子(TGF)-β1、白介素(IL)-2、IL-6、IL-10的含量。从健康志愿者外周血中分离自然杀伤(NK)细胞,测定NK细胞对MDA-MB-231细胞的杀伤活性。结果TNBC患者癌组织中LGR5阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);与空白对照组比较,LGR5 shRNA组细胞中LGR5 mRNA与蛋白的表达水平均下降,细胞存活率下降、凋亡率增加(P<0.05);与空白对照组比较,LGR5 shRNA组细胞上清中TGF-β1、IL-10含量下降而IL-2、IL-6含量升高,MMP-9和MMP-13蛋白表达下降,TIMP1蛋白表达升高(P<0.05);沉默LGR5表达后,NK细胞对LGR5 shRNA组细胞的杀伤率显著增加(P<0.05)。结论LGR5在TNBC患者癌组织中呈高表达,并参与免疫微环境形成,沉默该基因表达可增强NK细胞对TNBC的杀伤效应。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1(LRIG1)增强顺铂诱导的人垂体瘤细胞凋亡

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白结构域1(LRIG1)在人垂体瘤组织中表达情况,并观察过表达LRIG1后对顺铂(DDP)诱导的垂体瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测45例垂体瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中的LRIG1表达,分析LRIG1阳性表达与患者临床病理指标的相关性。选取原代分离培养的人垂体瘤细胞,采用脂质体介导的基因转染技术将LRIG1基因过表达质粒p EGFP-N1-LRIG1转染进细胞中,筛选LRIG1过表达的细胞,同时选取转染空质粒p EGFP-N1的细胞作为对照组。两组细胞均经20μg/m L DDP诱导48 h,流式细胞术检测细胞凋亡情况,平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白BAX、胱天蛋白酶3(caspase-3)和Bcl2的相对表达量。结果垂体瘤患者肿瘤组织中LRIG1阳性率显著低于瘤旁组织,且LRIG1在侵袭性肿瘤表达显著降低。与对照组相比,过表达LRIG1后,DDP诱导的细胞凋亡率显著增加、细胞增殖显著降低、BAX、caspase-3的水平显著增加,而Bcl2水平显著降低。结论过表达LRIG1增加DDP诱导的人垂体瘤细胞凋亡并抑制其增殖。

富含亮氨酸重复序列蛋白1通过上调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白表达促进乳腺癌细胞迁移和侵袭

目的:探究富含亮氨酸重复序列蛋白1(leucine-rich repeat protein 1,LRR1)在乳腺癌细胞中的表达及对其生物学功能的影响。方法:培养人乳腺癌MDA-MB-231、HCC70细胞株和正常乳腺上皮MCF-10A细胞;采用蛋白免疫印迹法检测LRR1表达。将人乳腺癌MDA-MB-231、HCC70细胞株分为干扰对照组、LRR1干扰组、LRR1过表达组和空载体对照组,分别转染LRR1对照、干扰、过表达、空载体序列;采用Transwell实验检测乳腺癌细胞迁移和侵袭能力;采用蛋白免疫印迹法检测细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m-TOR)表达。结果:与正常人乳腺上皮MCF-10A细胞相比,乳腺癌MDA-MB-231和HCC70细胞中LRR1表达水平显著增加(P均<0.01)。在人乳腺癌MDA-MB-231、HCC70细胞中,与干扰对照组相比,LRR1干扰组细胞迁移和侵袭数显著降低(P均<0.01),m-TOR表达水平明显降低(P<0.01);与空载体对照组相比,过表达LRR1组细胞迁移和侵袭数显著增加(P均<0.01),m-TOR蛋白表达水平明显增加(P均<0.01)。结论:LRR1在乳腺癌细胞中呈高表达,并可促进其迁移和侵袭。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1在垂体瘤中的表达及其预后意义

目的 探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1（LRIGl）在垂体瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法检测74例垂体瘤、20例正常脑组织中LRIG1的表达,分析其表达与患者预后的关系.结果 LRIG1在正常脑组织中的阳性表达率为100.0％,明显高于垂体瘤中的表达（54.1％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.同时,LRIG1在非侵袭性垂体瘤中的阳性表达率为66.7％,明显高于在侵袭性垂体瘤中的表达（20.0％）.Kaplan-Meier生存分析表明LRIG1及垂体瘤类型与患者的预后明显相关（P＜0.05）.Cox多因素生存分析表明LRIGI可作为患者预后评估的独立因素.结论 LRIG1参与了垂体瘤的发生及发展,低表达患者预后较差.

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2基因全长及胞外段慢病毒表达载体的构建及对胶质瘤细胞增殖的影响

目的构建富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2（LRIG2）基因全长及胞外段的慢病毒表达载体并转染人胶质瘤细胞株，观察其对胶质瘤细胞增殖的影响。方法运用基因重组技术将LRIG2基因全长（LRIG2）和胞外段（LRIG2ecto）片段分别插入慢病毒载体pLVX—Puro-3×Flag：然后用pLVX—Puro-3×Flag-LRIG2和pLVX。Puro-3×Flag—LRIG2ecto分别转染胶质瘤细胞株U87；荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Westernblot分别检测LRIG2及LRIG2ecto的mRNA和蛋白表达；细胞增殖检测试剂盒（CCK-8）检测转染后细胞的增殖；流式细胞术检测细胞周期。结果West-ernblot鉴定Flag标签蛋白表达成功；LRIG2及LRIG2ecto过表达组mRNA表达分别是对照组的8．42和29．58倍（P〈0．01）；LRIG2及LRIG2ecto过表达组细胞增殖率明显高于对照组；LRIG2及LRIG2ecto过表达组细胞增殖指数（PI）分别为（50．63±1．29）％和（48．61±0．55）％，明显高于对照组（42．48±0．72）％（P〈0．01）。结论成功建立稳定表达外源性LRIG2基因全长及胞外段的人胶质瘤细胞株，且证实均促进胶质瘤细胞增殖。

RNA干扰富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2后对胶质瘤细胞生长的影响及其机制

目的探讨RNA干扰富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2（LRIG2）基因表达后对胶质瘤细胞生长的影响及其机制。方法用携带U6启动子和LRIG2特异性短发夹RNA（shRNA）序列的质粒载体pGenesil2-LRIG2-shRNA（siRNA）及含非特异性shRNA编码序列的对照质粒pGenesil2-scramble—shRNA（set）转染胶质瘤细胞系GL15、G418（600mg/L）筛选出稳定株，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westemblot法检测LRIG2和表皮生长因子受体（EGFR）表达的改变。噻唑蓝（MTT）比色法检测稳定转染对照组和实验组细胞的增殖，流式细胞仪检测对照组和实验组细胞的细胞周期改变。结果实验组细胞LRIG2mRNA和蛋白水平与对照组比较分别下降了68．6％和62．3％，EGFR蛋白水平下降了32．6％。MTT结果显示实验组细胞增殖率低于对照组。细胞周期分析表明对照组G0／G1期为（26．72±2．10）％，实验组为（36．58±3．29）％（P〈0．05），LRIG2表达下调后GL15细胞细胞周期部分阻滞在G0／G1期。结论GL15细胞经RNA干扰基因表达后，LRIG2mRNA和蛋白水平明显降低，同时EGFR蛋白水平下降，从而抑制细胞增殖和使细胞周期阻滞在G0／G1期。LRIG2可通过EGFR信号系统影响胶质瘤细胞的生长。

富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1过表达对膀胱癌细胞免疫相关基因的影响

目的利用基因表达谱芯片技术筛选过表达富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1（LRIG1）的膀胱癌细胞与对照组膀胱癌细胞间差异表达的免疫相关基因，探讨LRIG1对膀胱癌细胞免疫功能影响的机制。方法分别提取转染LRIG1基因的膀胱癌细胞BIU87-LRIG1和未转染LRIG1基因的膀胱癌细胞BIU87的总核糖核酸（RNA），反转录成cDNA并标记后，同22K人类基因表达谱芯片杂交后筛选出与免疫相关的差异表达基因，并进一步使用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）验证。结果在21522条基因中，两组细胞间差异表达的免疫相关基因有9条，其中BIU87-LRIG1细胞中上调基因4条，下调基因5条。RT-PCR提示BIU87-LRIG1组的程序化死亡基因5（PDCD5）表达水平（1．22±0．04）较BIU87组（0．43±0．06）明显增高。结论使用基因芯片技术筛选出了LRIG1过表达可影响膀胱癌免疫功能的9种相关基因。

富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5基因沉默对结肠癌干细胞生物学行为的影响

目的观察富含亮氨酸重复序列G-蛋白耦联受体5（LGR5）基因沉默对具有＂干性＂结肠癌球囊细胞生物学行为影响。方法采用RNA干扰技术沉默LGR5基因表达。利用脂质体Lipofectamine RNAi MAX将LGR5小干扰RNA （LGR5-siRNA）转染至HT29结肠癌球囊细胞，而转染对照siRNA细胞和未转染细胞分别作为阴性对照组和空白对照组。实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot法检测转染48 h后球囊细胞LGR5 mRNA和蛋白表达；细胞计数试剂盒（CCK-8）法转染1、2、3、4 d球囊细胞增殖能力，球囊形成实验、Transwell小室实验、流式细胞术检测转染48 h后细胞自我更新、侵袭能力和细胞周期。结果转染48 h后，实验组LGR5 mRNA表达量（0.32±0.02）较空白对照组（1.00±0.16）和阴性对照组（0.99±0.12）明显下降（P＝0.000），蛋白表达亦显著下调（P＝0.000）；CCK-8实验结果显示，实验组细胞增殖能力明显减弱，4 d时空白对照组、阴性对照组和实验组吸光度（A）值分别为0.540±0.010、0.528±0.016、0.390±0.022（P＝0.000）；球囊形成实验结果显示实验组形成子代球囊数目[（21.33±2.08）个]明显少于空白对照组[（72.33±3.06）个]和阴性对照组[（70.67±2.52）个，P＝0.000]；流式细胞术检测结果显示实验组细胞明显阻滞于G0/G1期（P＝0.000）；Transwell小室实验结果显示，实验组穿膜细胞数[（35.60±6.74）个]较空白对照组[（86.47±7.85）个]和阴性对照组[（83.53±8.58）个]明显减少（P＝0.000）。结论LGR5基因沉默可抑制结肠癌球囊细胞增殖、自我更新及侵袭，LGR5对结肠癌干细胞生物学行为有重要调控作用。

Survivin和富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2在人膀胱移行细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Survivin和富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白2（LRIG2）基因及其产物在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学检测72例膀胱癌组织病理标本中的Smvivin和LRIG2的表达，每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织及其远端正常黏膜对照。结果免疫组织化学显示Survivin蛋白在正常膀胱黏膜中无表达，在膀胱癌组织中表达明显高于癌旁组织，阳性率分别为90．28％、33．33％，Survivin蛋白在膀胱癌不同病理分级中的阳性表达率分别为Gl组72．22％、G2组90．48％、G3组100．00％；在膀胱癌临床分期Ta～Tis、T1～12的阳性表达率分别81．25％、97．50％；在淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性表达率为96．00％、85．11％，随着病理分级、临床分期的升高和淋巴结转移的卅现，Survivin蛋白表达水平逐渐升高，各组间差异有统计学意义（P〈0．05）；LRIG2在膀胱移行细胞癌中的阳性表达率显著低于癌旁组织和正常膀胱黏膜组织，并随组织病理分级、分期的增高和淋巴结转移的卅现，LRIG2阳性表达率逐渐下降，差异有统计学意义（P〈0．05）；提示Survivin和LRIG2表达呈负相关（r=-0．487，P〈0．01）。结论Survivin和LRIG2基因表达与膀胱移行细胞癌的分级、分期、淋巴结转移有关，Survivin过表达和LRIG2基因突变或缺失在膀胱移行细胞癌的发生发展中可能起重要作用。

富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2调控血小板源性生长因子受体β信号通路促进胶质母细胞瘤细胞周期进展

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白2(LRIG2)调控血小板源性生长因子受体β(PDGFRβ)信号通路促进胶质母细胞瘤(GBM)细胞周期进展的机制。方法免疫组织化学法检测肿瘤组织中蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期进展;裸鼠皮下移植瘤模型检测细胞在体成瘤能力;免疫荧光共聚焦及免疫共沉淀检测蛋白结合;Western blot检测信号通路蛋白表达。结果人GBM组织中LRIG2与PDGFRβ蛋白表达呈正相关(χ^2=6.411,P<0.05)。PDGF-BB刺激下,LRIG2过表达组S期及G2/M期细胞百分比均明显高于对照组[(22.74±1.23)%比(11.60±0.82)%,t=13.052,P<0.05;(19.06±1.04)%比(9.36±0.65)%,t=13.699,P<0.05]。裸鼠皮下移植瘤LRIG2过表达组肿瘤体积明显高于对照组[(1 372.56±167.88) mm3比(413.34±76.79) mm3,t=11.619,P<0.05]。GBM细胞中LRIG2蛋白与PDGFRβ蛋白存在共表达,且存在物理性结合。PDGF-BB刺激下,LRIG2过表达组U87细胞中PDGFRβ、磷酸化PDGFRβ(p-PDGFRβ)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化信号转导与转录激活因子-3(p-STAT3),细胞周期蛋白(Cyclin) B1和Cyclin D1表达水平均明显高于对照组。结论LRIG2通过调控PDGFRβ信号通路促进GBM细胞周期进展。

富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4基因缺陷导致寿命缩短和多器官组织衰老

目的:研究富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4(LGR4)基因缺失对小鼠寿命以及衰老相关表型的影响。方法:在正常繁殖、饲养状态下,观察LGR4基因敲除小鼠与衰老相关的表型,并记录每只小鼠的出生时间和死亡时间,比较LGR4基因敲除小鼠与正常小鼠的自然寿命差异;此外,收集2组老年小鼠的不同组织(如皮肤、眼睛、肺脏、肝脏、脾脏等),进行病理切片和苏木精-伊红(HE)染色,观察各组织形态学改变。结果:LGR4基因敲除小鼠中位生存期为17.25个月,野生型小鼠中位生存期为22.75个月,2组生存率存在明显差异(P<0.001);但是,年龄>20个月的2组小鼠生存率并无统计学差异。组织学结果提示,老龄LGR4基因敲除小鼠的皮肤出现明显的结构异常,包括角质层不平整、毛囊稀少、皮下脂肪层变薄、血管减少。结论:LGR4基因缺失缩短小鼠的全程寿命,但并不影响老龄小鼠的生存率。

富含亮氨酸重复序列激酶2调控自噬影响甲状腺癌可能机制的研究进展

甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤,且发病率逐年上升,严重威胁人们的身体健康。自噬是一种程序性死亡方式,能够作为抗肿瘤治疗潜在的作用靶点,发挥重要的调控作用。富含亮氨酸重复序列激酶2(LRRK2)是由PARK8基因编码的一种蛋白激酶。最近研究证实,细胞自噬和甲状腺癌关系密切。文章就LRRK2通过自噬影响甲状腺癌的可能调控机制进行分析,为甲状腺癌的基础研究和临床诊疗提供新思路。

胰腺癌组织富含亮氨酸重复序列蛋白55基因的表达和启动子区甲基化状态及其临床意义

目的分析胰腺癌组织富含亮氨酸重复序列蛋白55(LRRC55)基因mRNA表达和启动子区甲基化状态并探讨其临床意义。方法收集2019年5月至2021年5月间海军军医大学第一附属医院普外科37例行手术切除并经病理学证实的胰腺导管腺癌组织及其癌旁正常组织。另收集2例正常胰腺组织标本、2例健康成人外周血标本作为对照。记录患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、临床分期、是否淋巴结转移及血CEA、CA19-9水平。采用亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测2例胰腺癌组织及癌旁组织、2例正常胰腺组织、2株胰腺癌细胞株(PaTu8988、ASPC1)LRRC55基因启动子区CpG岛甲基化状态。应用实时定量PCR法检测35例胰腺癌及癌旁组织LRRC55基因mRNA的表达水平,并分析其与胰腺癌临床特征之间的关系。结果胰腺癌组织和胰腺癌细胞株LRRC55基因启动子区CpG岛呈高甲基化状态,平均甲基化率分别为53%、71%,而癌旁组织和正常胰腺组织LRRC55基因为低甲基化状态,平均甲基化率分别为8%、11%;胰腺癌组织和对应癌旁胰腺组织LRRC55基因mRNA的相对表达量分别为0.21(0.02,1.00)、0.98(0.33,3.66),胰腺癌组织LRRC55基因mRNA表达量显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.003)。相关性分析结果显示,胰腺癌组织LRRC55基因mRNA表达与肿瘤分化、CEA显著相关,而与患者年龄、性别、肿瘤部位及大小、CA19-9水平、有无淋巴结转移及临床分期均无相关性。结论胰腺癌组织及腺癌细胞株均存在LRRC55基因异常甲基化;LRRC55基因高甲基化与其基因表达降低有关,与胰腺癌组织的分化程度和CEA水平相关。该基因可能是胰腺癌的潜在抑癌基因。