富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在肿瘤中的研究进展

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine, SPARC)是肿瘤微环境中重要的基质成分,它作为正常细胞恶变和肿瘤发生发展过程中一个重要的分子,能够调节多种肿瘤相关细胞因子及其受体的相互作用,并调节多种信号通路以及蛋白水解酶的表达水平。由于它抑制和促进肿瘤进展的能力取决于细胞类型、肿瘤分期等,因此在多种类型的肿瘤中差异表达,并可能成为肿瘤早期诊断的新型生物标记物以及治疗的新靶点。本文就近年来SPARC在肿瘤研究中的进展作一综述。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在心血管疾病中的研究进展

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)为典型的基质细胞蛋白,参与组织发育和修复,通过调节细胞黏附、增殖和生长因子信号转导,以及细胞外基质与细胞的相互作用,在心肌损伤过程发挥重要作用。该文介绍SPARC在高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病、心力衰竭、病毒性心肌炎等心血管疾病中的相关研究进展。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在喉癌和下咽癌间质组织中表达及功能

目的:通过研究富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)在喉癌及下咽癌的蛋白表达与相关功能,探讨SPARC对头颈鳞癌发展所起的作用。方法:免疫组织化学染色检测SPARC在51例肿瘤组织中的表达,观察外源性SPARC对体外细胞系生长及迁移的影响。结果:免疫组化染色显示SPARC在46.3%(19/41)喉癌及60.0%(6/10)下咽癌的间质组织表达下调,外源性SPARC抑制头颈鳞癌细胞株的增殖及迁移。结论:肿瘤间质SPARC表达下调促进了喉癌及下咽癌细胞的增殖。

血管内皮生长因子对体外培养的人Tenon’s囊成纤维细胞的纤维化及其富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白表达的作用

目的·探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对体外培养的人Tenon's囊成纤维细胞(humanTenon's fibroblast,HTF)的纤维化及其富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)表达的作用。方法·取斜视手术患者的Tenon's囊组织进行培养,并采用免疫荧光技术对获得的HTF进行鉴定。采用不同浓度的VEGF刺激培养HTF,并依据刺激条件将HTF分为4组,即0 ng/mL组、25 ng/mL组、50 ng/mL组和100 ng/mL组。采用蛋白质印迹和实时定量PCR分析SPARC、Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein 9,MMP-9)的表达以及胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路磷酸化活性的改变。采用细胞活力测定实验(MTS法)和划痕实验检测HTF的增殖和迁移能力。结果·通过免疫荧光技术及倒置相差显微观察可以鉴定,所培养的原代细胞为HTF。在VEGF刺激作用下,与0 ng/mL组相比,其他3组HTF中的SPARC、collagen-Ⅰ和MMP-9蛋白及其mRNA表达均有所增加,HTF中ERK通路的磷酸化活性均有所上调,HTF细胞的增殖及迁移能力亦均有所增加,且在50 ng/mL组中影响最大。结论·VEGF在促进HTF纤维化的过程中伴随着细胞基质蛋白SPARC的上调,提示SPARC可能是这一过程的潜在调控位点。

家蚕富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白基因BmSPARC的表达及亚细胞定位

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)是一种小分子酸性糖蛋白,在有机体内广泛分布,通过与胞外基质蛋白相互作用而表现出多种生物活性。从家蚕蛹cDNA文库中获得SPARC基因(BmSPARC)的cDNA序列,GenBank登录号为FJ602783。利用生物信息学方法对此序列进行分析表明,BmSPARC的cDNA序列全长1 626 bp,含有1个954 bp的开放阅读框(ORF),编码317个氨基酸残基;同源性比较显示该基因编码蛋白的氨基酸序列在无脊椎动物中具有较高的保守性。将BmSPARC片段在大肠杆菌BL21中表达并纯化后,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,通过亚细胞定位研究发现该基因表达蛋白主要存在于细胞质中。利用实时荧光定量PCR的方法,对BmSPARC在家蚕不同发育时期、不同组织中的mRNA转录水平进行比较,并采用Western blotting方法对BmSPARC蛋白的表达进行分析,结果表明:BmSPARC在家蚕卵期和5龄幼虫丝腺组织中无表达,而在5龄幼虫、蛹、蛾发育时期及5龄幼虫的头部、脂肪体、中肠、马氏管、卵巢、表皮和气门等7个组织中均有不同程度的表达,其中在蛾期和5龄幼虫卵巢中的表达量较高。研究结果为进一步探讨BmSPARC在家蚕生长发育过程中的生物学功能打下了基础。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白对青光眼滤过泡瘢痕化影响的研究进展

滤过泡瘢痕化是导致青光眼滤过术失败的主要原因。目前,临床上多应用结膜下注射丝裂霉素及5-氟尿嘧啶等抗代谢药物以减少瘢痕化的发生,一定程度上提高了手术成功率,但其伴随的细胞毒性等不良反应不可忽视。富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)作为一种基质细胞蛋白在眼内广泛分布,在创伤修复和组织重塑的过程中发挥重要作用。结膜下瘢痕化的小鼠模型中可观察到SPARC表达明显升高。研究表明SPARC可通过多种途径参与并调控滤过泡瘢痕化的形成,有望成为抗瘢痕化治疗的特异性新靶点。

过表达富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白对非小细胞肺癌细胞白蛋白结合型紫杉醇敏感性的影响

目的探讨上调富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)表达对非小细胞肺癌A549白蛋白结合型紫杉醇敏感性的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和特异性甲基化PCR法检测白蛋白结合型紫杉醇对A549细胞SPARC基因表达的影响。分别设置空白对照组(未作任何处理)、阴性对照组(转染阴性对照序列)和SPARC组(转染SPARC序列),分别采用噻唑蓝、流式细胞术、Transwell小室法和划痕实验检测白蛋白结合型紫杉醇对过表达SPARC A549细胞生物学行为的影响。采用蛋白质印迹法检测过表达SPARC对A549细胞半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-8、剪切的多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白表达的影响。结果经特异性甲基化PCR法检测,白蛋白结合型紫杉醇可逆转A549细胞SPARC基因启动子区高甲基化状态,并增加SPARC m RNA表达量(1.44±0.23),较处理前(1.00±0.00)明显升高(t=4.962,P<0.001)。经不同浓度白蛋白结合型紫杉醇(0.01、0.1、1、10、100、1000 mg/L)作用于SPARC组A549细胞后,增殖抑制率分别为(2.88±0.18)%、(10.96±1.23)%、(19.35±2.14)%、(48.97±5.31)%、(72.73±8.91)%、(75.46±8.26)%,从1 mg/L起SPARC组高于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05)。白蛋白结合型紫杉醇作用于SPARC组细胞,其凋亡率、侵袭率和迁移率分别为(23±3)%、(33±12)%、(51±15)%,与空白对照组和阴性对照组相比,SPARC组A549细胞凋亡率更高,侵袭率和迁移率降低(均P<0.05)。另外,上调SPARC蛋白表达后,SPARC组A549细胞caspase-2、caspase-8、剪切的PARP蛋白表达量分别为(0.93±0.15)、(2.11±0.34)、(1.08±0.17),明显高于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05)。结论上调SPARC可增加A549对白蛋白结合型紫杉醇的敏感性,可能与降低SPARC基因启动子甲基化状态有关。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白与巨噬细胞相互作用对肿瘤进展的影响

肿瘤微环境对肿瘤的发生、发展具有重要的调节作用。富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(cysteine-rich acidic secreted protein,SPARC)和巨噬细胞作为肿瘤微环境重要基质成分,不仅对肿瘤细胞有直接的调节作用,两者的相互作用也可以影响肿瘤的各种生物学行为变化。SPARC通过维持细胞外基质紧密结构,减少巨噬细胞等免疫细胞向肿瘤区域的浸润,或通过减少巨噬细胞向M2功能表型方向转换,抑制肿瘤进展;另一方面,M2型巨噬细胞可以通过吞噬SPARC,从而消除SPARC对肿瘤的抑制作用。此外,巨噬细胞还可通过自身分泌的SPARC抑制肿瘤增殖和迁移等生物学行为。本文将就SPARC维持细胞外基质紧密结构,减少巨噬细胞等免疫细胞向肿瘤区域的浸润;抑制巨噬细胞向M2功能表型方向转换,从而发挥抑瘤作用;M2可以通过吞噬SPARC,消除SPARC对肿瘤的抑制作用;巨噬细胞来源SPARC决定细胞外基质沉积,抑制肿瘤迁移和增殖;SPARC与巨噬细胞相互作用在肿瘤免疫治疗的应用5个方面进行综述,为巨噬细胞来源SPARC对肿瘤不同生物学行为的调节的作用深入研究提供借鉴。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在肺癌和肺纤维化中的研究进展

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)可调控细胞基本功能如黏附、增殖和分化,同时也调控生长因子以及细胞外基质(ECM)降解和转化必需的基质金属蛋白酶(MMPs)的表达和活性。在非小细胞肺癌(NSCLC)和特发性肺纤维化(IPF)中,SPARC通过促进微血管改造和ECM中蛋白过度沉积发挥作用。而SPARC在慢性呼吸道疾病如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的作用一直不被重视。为此,本文综述了SPARC在NSCLC和IPF中的作用研究,并提出未来应研究SPARC在哮喘和COPD中的作用。

基质金属蛋白酶-9、富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白检测在原发性肝癌严重程度和预后评估中的价值分析

目的探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,M M P9)、富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)在原发性肝癌病情和预后评估中的价值.方法选取2012-04/2014-04在宁海县中医医院进行手术的54例原发性肝癌患者作为研究组,其中25例癌旁肝组织作为对照组,利用免疫组织化学染色法检测两组研究对象中MMP9、SPARC的表达,分析原发性肝癌组织和癌旁肝组织中MMP9、SPARC表达的差异,并分析其表达与临床病理特征和预后的关系.结果 M M P9、SPARC在肝癌组织中表达的强阳性率和评分均显著高于癌旁肝组织(P<0.05).MMP9的表达在原发性肝癌组织不同T分期、N分期、AJCC分期和分化程度的表达中具有统计学差异(P<0.05).SPARC的表达在原发性肝癌组织不同T分期、N分期、AJCC分期和肿瘤分化程度的表达中具有统计学差异(P<0.05).单因素分析结果显示,MMP9、SPARC强阳性表达及T分期、N分期、AJCC分期均是影响肝癌患者总生存期(overall survival,OS)和无病生存期(disease-free survival,DFS)的独立预后因素(P<0.05).多因素分析结果显示,MMP9、SPARC强阳性表达是肝癌患者OS和DFS的预后因素(P<0.05).结论 MMP9、SPARC在肝癌组织中表达明显较高,且在不同T分期、N分期、AJCC分期和肿瘤分化程度的肝癌组织中具有差异.MMP9、SPARC强阳性表达是影响肝癌患者OS和DFS的预后因素,可能为肝癌严重程度和预后评估提供帮助.

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在原发性开角型青光眼领域的作用机制

原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)是一种慢性、进行性的视神经病变,其发病机制尚不明确。而眼内敏感区域[如小梁网邻管组织、筛板(lamina cribrosa,LC)等]的细胞外基质代谢异常在其中起关键作用。富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein, acidic and rich in cysteine,SPARC)作为一种基质细胞蛋白在眼内广泛分布,具有沟通细胞与细胞外基质信号传递的作用。研究表明SPARC可通过多种途径参与并调控青光眼的发生发展过程,有望成为疾病治疗的新靶点。

乌头碱对室间隔缺损模型大鼠血清锌指蛋白41和富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白的影响研究

目的探究乌头碱对室间隔缺损模型大鼠血清锌指蛋白41和半胱氨酸的酸性分泌蛋白(Secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)的影响。方法选取80只室间隔缺损模型大鼠,随机分为2组,其中实验组40只经尾静脉注射,给予0.05mg/kg乌头碱,连续7 d;对照组40只予等量生理盐水经尾静脉注射,连续7 d。实验结束后,各组大鼠腹主动脉取血,分别采用Western blot法和ELISA法测定血清中锌指蛋白41和SPARC,表达并进行比较。结果 Western blot结果表明,2组血清样本中,锌指蛋白41和SPARC均有所表达,但实验组锌指蛋白41和SPARC相对表达均明显低于对照组(P<0.05);ELISA结果表明,实验组锌指蛋白41和SPARC的浓度均明显低于对照组(P<0.05)。结论乌头碱能够明显降低室间隔缺损模型大鼠血清锌指蛋白41和SPARC的表达水平。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白与糖尿病肾病的相关性研究

目的 检测富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC）在糖尿病肾病患者血清中的含量及在db/db糖尿病肾病小鼠肾脏组织中SPARC mRNA和蛋白的表达,探讨SPARC在糖尿病肾病发生发展中的作用.方法 采用夹心酶联免疫吸附法检测正常人、2型糖尿病患者（无肾病）、慢性肾功能不全患者（无糖尿病）以及糖尿病肾病患者血清SPARC水平;以RT-PCR、Western印迹法和免疫荧光染色法检测12周龄db/db小鼠肾脏组织的SPARC mRNA和蛋白表达.结果 糖尿病肾病患者血清中的SPARC含量明显高于正常组、2型糖尿病组及慢性肾功能不全组[（5.78±1.41对3.58±0.41、4.51±1.08和3.81±1.16）μg/L,P＜0.05或P＜0.01],2型糖尿病组高于正常组（P＜0.05）,2型糖尿病患者与慢性肾功能不全患者相比无明显差异,慢性肾功能不全患者与正常人相比无明显差异.db/db小鼠肾脏组织SPARC mRNA和蛋白表达明显高于对照组（P＜0.05）.结论 糖尿病肾病时长期高血糖导致肾脏病理改变的同时,肾脏组织产生和分泌的SPARC蛋白增加导致其血清浓度升高,可能参与糖尿病肾病病理改变的形成.

ob/ob小鼠脂肪组织中富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白的表达及临床意义

目的观察富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)在ob/ob小鼠脂肪组织中的表达情况。方法选择10周龄的ob/ob小鼠(C57BL/6J-Lepob/J)与其同窝野生对照型小鼠各6只,取其腹部皮下脂肪组织,RT-PCR方法检测脂肪组织中 SPARC基因的表达,Western blot法测定SPARC目的蛋白的表达水平,免疫荧光染色法对脂肪组织进行染色观察。结果 SPARC在ob/ob小鼠脂肪组织中表达明显升高。结论 SPARC在ob/ob小鼠脂肪组织中呈现高表达,可能参与肥胖和糖尿病的发生发展。

2型糖尿病患者血清富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白与血脂的相关性研究

目的探讨T2DM患者血清富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)与血脂的关系。方法选取T2DM合并血脂异常组(T2DM+血脂异常)42例,单纯T2DM(T2DM)组40例,单纯血脂异常组42例及正常对照(NGT)组38名,采用ELISA测定各组血清SPARC浓度,并分析其与BMI、WHR、HbA1c、血脂和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等的关系。结果 T2DM+血脂异常组、T2DM组、单纯血脂异常组血清SPARC水平均高于NGT组[(5.43±1.32),(4.57±1.62),(3.23±0.65)vs(2.93±0.53)μg/L,P<0.05]。Pearson相关分析显示,SPARC与BMI、WHR、FIns、TG、HbA1c、HOMA-IR呈正相关(P均<0.05),与FPG、TC、HDL-C、LDL-C无相关性(P>0.05)。Logistic回归分析显示,TG、HOMA-IR是血清SPARC的独立影响因素。结论 T2DM合并血脂异常患者SPARC水平升高,其与TG、HOMA-IR相关。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 观察外源性富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（SPARC）对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭力等生物学行为的影响.方法 将胰腺癌细胞Mia PaCa-2和PANC-1中加入不同浓度的外源性SPARC（0、0.5、1.0、3.0、5.0、10.0 mg/L）作为实验组,以空白组作对照,采用噻唑蓝（MTT）实验分析胰腺癌细胞增殖能力的变化;将胰腺癌细胞Mia PaCa-2和PANC-1中加入5 mg/L外源性SPARC,以空白组为对照,培养24 h,采用单个细胞移动实验分析胰腺癌细胞迁移能力的变化,采用Matrigel侵袭力实验分析胰腺癌细胞侵袭能力的变化.结果 外源性SPARC能够抑制胰腺癌细胞的增殖,且抑制作用具有浓度依赖性,10.0 mg/L外源性SPARC可使Mia PaCa-2和PANC-1细胞的增殖能力分别下降（32.8±7.4）％和（32.5±1.8）％.5.0 mg/L外源性SPARC能够使Mia PaCa-2和PANC-1细胞在24 h的移动距离分别下降26％和39％,细胞侵袭转移数目分别下降30％和56％.结论 外源性SPARC可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,细胞外基质成分对恶性肿瘤的生物学行为可产生影响.

卵巢子宫内膜样腺癌中富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白/骨连接素2与基质金属蛋白酶2表达及相关性研究

目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白/骨连接素2(SPOCK2)及基质金属蛋白酶2(MMP2)在卵巢子宫内膜样腺癌发生发展过程中的作用。方法通过免疫组化技术检测中国医科大学附属盛京医院2008年1月至2013年1月收治的卵巢子宫内膜样腺癌40例、正常卵巢组织10例及卵巢异位内膜组织11例中SPOCK2及MMP2蛋白表达,比较各组织中SPOCK2及MMP2的表达差异及两种蛋白表达的相关性。结果卵巢子宫内膜样腺癌组织中SPOCK2蛋白表达显著低于正常卵巢组织及异位内膜组织(P<0.05),SPOCK2蛋白表达与卵巢子宫内膜样腺癌的分化程度及分期无关(P>0.05);卵巢子宫内膜样腺癌组织中MMP2蛋白表达显著高于正常卵巢组织及卵巢异位内膜组织(P<0.05),MMP2蛋白表达与卵巢内膜样腺癌分化程度及临床分期具有相关性(P<0.05)。SPOCK2及MMP2蛋白在卵巢子宫内膜样腺癌组织中的表达呈负相关(P<0.05)。结论 SPOCK2表达缺失可能与卵巢子宫内膜样腺癌的发生相关,MMP2蛋白表达增加可能与卵巢子宫内膜样腺癌的进展具有相关性,参与卵巢子宫内膜样腺癌的的侵袭、转移过程。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白、基质金属蛋白酶-2在结直肠癌和结直肠腺瘤中的表达及其临床意义

目的研究富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白（SPARC）和基质金属蛋白酶（MMP）-2在结直肠癌和结直肠腺瘤中的表达、临床意义及两者之间的关系。方法采用免疫组化SABC法检测65例结直肠癌、32例结直肠腺瘤（腺瘤直径均≥1Cnl）及29例正常结直肠组织中SPARC及MMP-2的表达，并分析其相关性。结果免疫组化结果显示SPARC和MMP-2在结直肠腺管细胞及间质细胞中均有不同程度表达。结直肠癌、结直肠腺瘤及正常组织三者间比较，SPARC在腺管细胞中的阳性表达率无明显差异（P〉0．05），而在间质细胞中阳性表达率的差异有统计学意义（P〈0．05）；MMP-2在腺管细胞中阳性表达率的差异有统计学意义（P〈0．05），而间质细胞中MMP．2阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。在结直肠腺癌组织中，腺管细胞中MMP-2的表达与间质细胞中SPARC的表达呈明显负相关（r=-0．465，P〈0．001），而与腺管细胞中SPARC的表达无明显相关（r=0．156，P=0．214）。结论SPARC及MMP-2在结直肠腺癌和结直肠腺瘤中的表达存在差异，提示两者可能在大肠肿瘤的发生、发展、浸润、转移过程中发挥重要作用。

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在人大肠癌、大肠腺瘤的表达及其临床意义

[目的]探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)在人大肠癌、大肠腺瘤中的表达及其临床意义。[方法]采用免疫组化SABC法检测65例人大肠癌、32例人大肠腺瘤及29例正常人大肠组织中SPARC的表达。[结果]免疫组化结果显示SPARC在人大肠腺癌细胞及间质细胞均有不同程度表达。大肠癌、大肠腺瘤及正常组织三者之间比较,SPARC在组织腺管细胞中的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),而在间质细胞中的表达率差异显著(P<0.05)。另外,在人大肠癌间质细胞中,SPARC的阳性表达率与癌组织分化程度、淋巴结转移与否呈明显相关性(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤部位无关(P>0.05)。[结论]SPARC有可能作为评估大肠肿瘤浸润转移及其预后的生物学指标,为进一步研究大肠肿瘤的早期筛查与诊断提供了新的思路与方法。