华支睾吸虫富甘氨酸2a类抗原Cs4重组蛋白的免疫学特性与定位

目的对华支睾吸虫富甘氨酸2a（glycine rich antigen 2a，GRA2a）类抗原Cs4重组蛋白（rCs4）进行免疫学特性分析，并对GRA2a类抗原进行组织定位。方法使用蛋白质印迹（Western印迹）分析rCs4与华支睾吸虫病患者混合血清的免疫反应性，并分析GRA2a类抗原的分泌性。应用ELISA法检测rCs4免疫小鼠血清中抗rCs4特异性IgG水平，并动态检测华支睾吸虫感染兔0～44周的血清中抗rCs4特异性IgG水平。通过免疫荧光实验（immunofluorescence assay，IFA）对华支睾吸虫GRA2a类抗原进行组织定位。结果纯化的rCs4可被华支睾吸虫病患者混合血清识别。rCs4单抗（mAbCs4—31）与华支睾吸虫排泄分泌抗原和可溶性抗原在相对分子质量（Mr）26000与55000之间分别有13、15个反应条带，均呈阶梯状分布。ELISA检测rCs4免疫小鼠抗rcs4和ESA的IgG效价均达1：64000，感染兔的抗rCs4特异性抗体平均水平自感染第4周开始上升，于第6周达到高峰，此后逐步递减，至第20周已呈较低水平。IFA检测发现GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫的表皮。结论Cs4蛋白是华支睾吸虫在感染早期的分泌型蛋白，具较好的抗原性。GRA2a类抗原定位于华支睾吸虫成虫表皮。