富硒大豆蛋白肽对小鼠免疫及抗氧化功能的影响

硒属于人体必不可少的微量元素,具有抗氧化性等对人体健康大有裨益的生理功能。大豆蛋白肽易被人体吸收,可满足身体生长需要。为更好兼顾二者的生理特性开发新产品促进人体健康,实验利用亚硒酸钠溶液浸泡东北大豆,碱提酸沉法制备富硒大豆肽实现硒元素富集和转化,对所提取的富硒大豆蛋白体液免疫功能的影响情况。研究结果表明,利用亚硒酸钠溶液浸泡后大豆硒含量由16.53μg·g^(-1)提高到26.25μg·g^(-1),大豆肽硒含量由5.67μg·g^(-1)提高到14.37μg·g^(-1);灌胃后的小鼠体重最高为32.22 g,免疫器官胸腺指数、脾脏指数最高值为0.51%和0.31%。随着灌胃的富硒大豆蛋白肽剂量的增加,SOD和GSH-Px值也在不断增加,血清SOD为152.3 U·g^(-1),肝脏SOD为223.5 U·g^(-1);血清GSH-Px为986.3 U·g^(-1),肝脏GSH-Px为1100.7 U·g^(-1)。巨噬细胞增殖能力A490值为0.61,免疫球蛋白IgA水平,免疫球蛋白IgG水平分别为278 mg·L^(-1)和490 mg·L^(-1)。实验表明富硒大豆肽可明显提高小鼠抗氧化能力和体液免疫能力。增强巨噬细胞增殖、吞噬能力。研究旨在为大豆及相关作物硒元素富集和转化提供理论依据和数据支持,为促进人体更好地吸收食品中的硒,开发与应用富硒大豆功能性创新产品提供新途径。

富硒大豆肽的制备及体内吸收性分析

为提高硒的体内吸收速率,本实验对富硒大豆蛋白和富硒大豆肽在大鼠低硒模型的体内吸收规律进行探究。采用碱溶-酸沉法从富硒大豆中提取富硒大豆蛋白,对其酶解、超滤,制备富硒大豆肽,对所提取富硒大豆蛋白及制备的富硒大豆肽的组成、硒的分布及结合形式进行探究,分别用富硒大豆蛋白、富硒大豆肽(以硒含量18μg/kg mb,分子质量低于3 kDa)灌胃SD雄性大鼠,于灌胃0、5、10、20、30、40、60、80、90、120 min后尾部取血,同时测定血浆硒质量浓度与氨基酸浓度,分析血硒质量浓度与血浆氨基酸浓度随时间的变化规律。结果表明:富硒大豆蛋白的主要富硒亚基分子质量为26~35 kDa,11S富硒大豆蛋白硒含量显著高于7S富硒大豆蛋白(P<0.05);超滤纯化得到的3 kDa以下大豆肽组分的硒含量高达110.40μg/g,显著高于10 kDa以上与3~10 kDa组分(P<0.05),3 kDa以下大豆肽组分蛋氨酸含量(189.32μmol/g)与胱氨酸含量(47.09μmol/g)也显著高于其他组分(P<0.05);灌胃富硒肽与蛋白后大鼠血浆硒质量浓度和总游离氨基酸浓度均出现两个峰值,经灌胃富硒大豆蛋白后,大鼠血硒质量浓度达峰时间分别为20 min和80 min,最高血硒质量浓度可达1.070 mg/L,血浆总游离氨基酸浓度达峰时间分别为10 min和80 min,最高值可达4.172μmol/L;而灌胃富硒大豆肽后大鼠血硒质量浓度达峰时间分别为10 min和40 min,最高血硒质量浓度可达1.338 mg/L,总游离氨基酸浓度达峰时间分别为5 min和40 min,最高值可达5.053μmol/L,达峰时间均早于富硒大豆蛋白。研究表明富硒大豆蛋白经酶解,超滤得到富硒大豆肽可显著提高硒的体内吸收速率,具有作为口服营养功能食品开发的潜力。

富硒大豆中蛋白提取工艺优化及HPLC-MS联用测定硒代蛋氨酸

根据Box-Behnken试验设计原理和响应面分析法确定了富硒大豆中硒蛋白提取的最佳工艺;在此条件下,获取可溶性硒蛋白中的硒代氨基酸,并采用高效液相色谱-质谱联用技术对富硒大豆可溶性蛋白中的硒代蛋氨酸进行定性定量分析。结果表明,液料比11∶1(m L/g)、提取温度44℃、提取时间96 min时,可溶性硒蛋白的提取率可达到76.03%。对4种自行种植的富硒大豆中可溶性蛋白分析可知:硒-L-蛋氨酸中硒含量与可溶性蛋白中硒含量、富硒大豆中总硒量呈正相关;实验范围内硒代蛋氨酸相对于可溶性蛋白中硒含量最高可达28.46%;说明富硒大豆中不仅含有硒代蛋氨酸,还存在其他形态的硒代氨基酸,有待于进一步研究探索。对大豆进行富硒种植,不仅能提高大豆中含硒总量,而且能通过大豆的生物代谢将其转化成安全无毒营养的有机硒。

富硒大豆多肽对高脂致大鼠脂肪肝和抗氧化功能的影响

目的:探讨富硒大豆多肽改善高脂所致脂肪肝大鼠肝抗氧化功能的影响及机制。方法:将40只Wistar大鼠分成4组(n=10),分别饲喂标准饲料+水(NC)、标准饲料+富硒大豆多肽液(SeN)、高脂饲料+水(HC)、高脂饲料+富硒大豆多肽液(SeH),10周后处死,用苏丹Ⅲ染色肝脏组织切片观察脂肪变性程度,免疫组织化学方法测定肝组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达情况,并分析其肝功能、血脂及血清和肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化情况。结果:HC组在血清TC、TG水平、肝脏脂肪化程度、GRP78表达情况都明显高于NC、SeN、SeH组(P<0.01)。SeH组血清和肝组织中MDA含量较HC组降低(P<0.01),GSH-Px、SOD活性升高。NC和SeN两组各项指标之间无明显差异。结论:富硒大豆多肽能有效提高脂肪肝大鼠肝内抗氧化酶活性,抑制脂质过氧化反应,降低肝组织内GRP78表达。

富硒大豆蛋白的研制

以黄豆芽为富硒载体,采用喷淋和浸泡相结合的方式添加不同浓度的硒溶液,通过黄豆的发芽过程实现对硒元素的生物富集,制备出富硒黄豆芽并分离得到富硒大豆蛋白。结果表明:当硒培养液浓度为10μg/mL、培养时间为120h时富硒效果最佳,制备出的富硒大豆蛋白富硒量为21.23μg/g。富硒大豆蛋白与普通大豆蛋白相比,氨基酸含量有明显提高,其中谷氨酸的含量提高最为显著,大约提高了35%。

富硒大豆低聚肽的抗氧化活性研究

研究了富硒大豆低聚肽在抗氧化方面的作用。将3周龄SD雄性大鼠90只,随机分为6组,即Ⅰ(对照组)、Ⅱ(大豆蛋白组)、Ⅲ(大豆多肽组)、Ⅳ(亚硒酸钠组)、Ⅴ(大豆低聚肽组)、Ⅵ(富硒大豆低聚肽组),在实验环境下,对各组饲喂低硒基础饲料的同时,对第Ⅱ组口腔灌喂大豆蛋白,对第Ⅲ组口腔灌喂大豆多肽,对第Ⅳ组口腔灌喂亚硒酸钠,对第Ⅴ组口腔灌喂大豆低聚肽,对第Ⅵ组口腔灌喂富硒大豆低聚肽,第Ⅰ组口腔灌喂同体积的饮用水。饲喂4周,处死后分别测定各实验大鼠血清和肝脏中的MDA(丙二醛)含量、GSH-Px和SOD活性。结果显示:第Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅳ、Ⅵ组均能降低血清和肝脏中MDA的含量,提高GSH-Px和SOD活性,但第Ⅱ、Ⅲ组作用不显著,第Ⅴ组作用显著,第Ⅳ、Ⅵ组作用极显著。各组样品对血清和肝脏中MDA含量和GSH-Px活性的影响效果趋于一致,但对血清SOD活性的影响明显强于对肝脏SOD活性的影响,实验结果说明富硒大豆低聚肽具有抗氧化功能,这种功能主要通过降低大鼠血清和肝脏中MDA的含量,提高GSH-Px和SOD活性来实现,富硒大豆低聚肽的抗氧化功能要强于无机硒,明显强于不含硒的大豆低聚肽,推测富硒大豆低聚肽中发挥抗氧化功能的主要是微量元素硒。

富硒大豆低聚肽降血压作用的研究

为了研究富硒大豆低聚肽在降血压方面的作用,本研究采用5周龄SD雄性大鼠60只,随机分为4组,按设计进行饲喂实验,测定各试验大鼠的体重和血压,饲喂4周,停喂次日处死所有大鼠,测定血清和肺组织中ACE活力及血清中K、Na、Se的含量。结果显示:富硒大豆低聚肽能促进试验大鼠的体重增加,降低大鼠血清中ACE活性,但对肺组织ACE活性无显著影响,能导致大鼠血清中Na离子浓度下降、Se含量增加。说明富硒大豆低聚肽具有降低SHR血压的作用,这种作用是Se和大豆低聚肽共同作用的结果,除与ACE活力被抑制有关外,还可能与导致大鼠体内Na+浓度下降、Se含量增加有关。

富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件优化

以富硒大豆为原料,采用液体发酵技术对富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件进行研究。富硒大豆经浸泡、磨浆、过滤、煮沸后接种灵芝菌种发酵,以水解度为指标,通过单因素和正交试验对温度、初始pH值、摇瓶转速及豆浆质量分数等发酵条件进行优化。结果表明:富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵最佳条件为发酵温度28℃、培养基初始pH5.8、摇瓶转速160r/min、豆浆质量分数5%、发酵时间132h。在最佳发酵条件下,大豆蛋白的水解度达27.8%、大豆多肽产量7.0178mg/L、多糖产量1.75mg/L、灵芝酸产量0.66mg/L。

冬虫夏草液体发酵富硒大豆对脂类和硒含量的影响

采用冬虫夏草菌丝体发酵富硒大豆,对冬虫夏草菌丝体发酵富硒大豆不同时间发酵液的脂类总量、酸价、碘价、游离脂肪酸、硒含量进行测定。结果表明:发酵48h的发酵液与对照相比,脂类总量变化不明显,酸价增加2.8倍,碘价增加1.2倍,亚麻酸、亚油酸、油酸、花生四烯酸分别增加5.3、2.9、6.8倍和5.6倍。48h以后发酵液中脂类成分变化不明显。不同时间发酵液中硒含量基本不变。

富硒大豆低聚肽的制备及其抗疲劳功能的研究

为探究富硒大豆低聚肽对抗运动性疲劳的影响,实验以富硒大豆为原料制备大豆蛋白,并以超滤萃取辅助中性蛋白酶和风味蛋白酶双酶酶解法制取富硒大豆低聚肽,并通过ICP-MS对硒含量进行鉴定,最后通过小鼠运动性疲劳实验综合评估富硒大豆低聚肽的抗疲劳活性。结果显示:富硒大豆低聚肽的总硒含量为(90.03±3.23)μg/kg,主要形态为硒代蛋氨酸、硒代半胱氨酸。在运动性疲劳小鼠模型下,四组剂量组均能够延长小鼠负重力竭游泳时长,其中富硒大豆低聚肽高剂量组时间最长约为(37.47±1.33)min,同时,血清生化指标显示小鼠的SOD酶、GSH-Px酶活性相较于模型组显著提高(P<0.05),MDA含量显著降低,肌糖原与肝糖原含量提高。富硒大豆低聚肽对小鼠抗运动性疲劳具有积极作用,在100 mg/(kgbw·d)剂量组下抗疲劳效果显著。

灵芝菌液态发酵富硒大豆过程中酶活性的研究

以富硒大豆豆乳为培养基,接种灵芝菌种进行发酵,对发酵过程中的酸性蛋白酶、中性蛋白酶、淀粉酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶活力变化趋势进行研究.结果表明,在0～132 h范围内,酸性蛋白酶、淀粉酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶活力呈增加趋势,发酵至132 h,酸性蛋白酶、淀粉酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶活力达最大值,分别为9.87、0.87、0.951、.07、1.85 U/mL,中性蛋白酶活力在发酵108 h达最大值5.35 U/mL.

富硒大豆栽培技术研究

富硒大豆栽培技术研究伊春市农业技术研究推广中心，１５３０００张含生东北农业大学·哈尔滨，１５００３０金益都昌杰硒是人和动物必需的微量元素之一。黑龙江省属于缺硒地区。主要粮食作物的硒含量不到２５毫克／千克。大豆及其制品是人们日常生活不可缺少的食物。因此...

富硒大豆优质高产栽培技术

介绍了富硒大豆优质高产栽培技术,主要包括选种及种子处理、适时播种、及时摘心、合理施肥、中耕除草、适时采收等内容,以供参考。

富硒大豆低聚肽口服液的制备及其主要成分分析

富硒大豆蛋白经过酶解、超滤、调配、杀菌等工艺,制备成富硒大豆低聚肽口服液,分析了产品中的硒含量、大豆低聚肽含量及氨基酸组成,其中硒含量2.45 mg/100 ml,大豆低聚肽含量(分子量1000 D以下)达到638.25 mg/100 ml,含有Se-Cys在内的19种氨基酸,研究结果为富硒大豆低聚肽产品的质量标准制定提供了一定的理论依据.

硫酸铵沉淀分离富硒大豆蛋白的初步研究

本文采用碱提酸沉法从天然富硒大豆中提取分离蛋白(SPI),再分别用质量分数为40%、60%、80%的硫酸铵溶液对其进行分级沉淀,比较研究分离得到的不同富硒SPI组分间的差异,以探讨硫酸铵分离富硒SPI的方法。结果表明:浓度为60%硫酸铵溶液分离得到的富硒SPI组分中总硒含量和可溶性蛋白含量最高;圆二色光谱和SDS-PAGE结果表明不同浓度硫酸铵溶液分离的富硒SPI组分的二级结构和亚基组成有明显不同;通过X-射线衍射分析和原子力显微观察,发现三种富硒蛋白组分的晶型和表面形态也区别较大。因此,硫酸铵法对于沉淀分离富硒SPI的差异组分,是一种有效的初筛方法,且以60%的硫酸铵浓度为较佳。

富硒大豆蛋白的酶解及抗氧化性能研究

研究发现，介于蛋白质和氨基酸之间的肽类，与其他生物分子相比，具有极强的生物活性和多样性，安全性高，抗氧化作用更为显著。为制备抗氧化性能及水溶性更好的富硒产品，本文利用Alcalase碱性蛋白酶SDNeutrase中性蛋白酶对制得的富硒大豆蛋白进行酶解，研究了酶解时间对水解度（DegreeofHydrolysis，DH值）、酶解产物抗氧化能力的影响。结果表明，随着酶解时间的延长，体系的DH值逐渐增加，抗氧化能力逐渐增强；这一变化趋势在水解时间达到3h后逐渐变缓，5h时接近顶点；在本实验条件下，两种蛋白酶对底物的水解能力没有显著差异；与普通大豆蛋白相比，经过富硒处理后制得的富硒大豆蛋白更容易被蛋白酶水解，且水解产物具有更强的抗氧化能力。

分析富硒大豆优质高产栽培技术

随着社会的不断发展进步,人们生活水平的不断提高,对于食品的质量也有了更高的要求。作者深入分析了我国现今广泛使用的富硒大豆优质高产栽培技术,并将其分成选种及种子处理、适时播种、及时摘心、合理施肥、中耕除草、适时采收等几个环节进行了深入研究,希望能够为今后的大豆栽培工作提供一定的借鉴。

富硒发芽对大豆蛋白凝胶性质的影响

以10 mg/L Na2SeO3溶液浸泡的大豆为材料,采用碱提酸沉法制备大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI),以葡萄糖酸-δ-内酯(GDL)为凝固剂制备大豆蛋白凝胶,系统研究了富硒处理及发芽时长对大豆蛋白凝胶性质的影响。结果发现:发芽48 h内大豆GDL凝胶与SPI凝胶的硬度快速下降,分别由25.25 g和27.73 g降至10.77 g和13.37 g,持水性从61.42%和62.64%分别降至51.55%和55.54%。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图谱显示,富硒大豆与对照SPI谱带变化基本一致,其中7S球蛋白的β亚基与11S球蛋白的碱性亚基B较稳定,而7S球蛋白的α'亚基和α亚基与11S球蛋白的酸性亚基A3和A则被内源蛋白酶逐渐降解为相对分子质量较小的组成,从而影响发芽大豆凝胶性质。而富硒处理对发芽大豆蛋白凝胶性质影响较小。

脂质自由基AAPH体外氧化对富硒大豆分离蛋白性质和结构的影响

本文采用2,2'-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸(AAPH)在有氧条件下热分解制备过氧自由基,代表脂肪氧合酶诱导多不饱和脂肪酸脂质过氧化反应产生脂质自由基,研究AAPH体外氧化对富硒大豆分离蛋白性质和结构的影响。随着AAPH添加浓度的增加,FT-IR结果表明大豆分离蛋白(SPI)的α-螺旋、β-转角和无规卷曲结构增加,β-折叠结构相对减少;SDS-PAGE结果表明SPI的亚基在浓缩胶顶端逐步聚集;蛋白溶解性、游离巯基含量下降;表面疏水性、乳化性、乳化稳定性呈现先上升后下降趋势;內源荧光峰位(λmax)表现为逐渐蓝移,且荧光强度先增加后减少。富硒大豆分离蛋白(SSPI)在结构、亚基分布、性质等多项测试指标方面均优于普通大豆分离蛋白(OSPI),可能与SSPI中含有较高的硒含量,因而表现出更强的抗氧化性有关。

浸泡及萌发条件对大豆富硒作用的影响

为开发一种新的富硒食品,本文以亚硒酸钠为硒源,以大豆为富硒载体,通过浸泡和萌发处理,实现大豆对无机硒的吸收和转化,制备富含有机硒的大豆产品。本文研究了浸泡温度、浸泡时间、浸泡液中亚硒酸钠浓度、萌发温度及萌发时间对大豆富硒作用的影响。以单因素实验为基础,然后通过正交实验对大豆富硒的最佳工艺条件进行优化,结果表明,大豆富硒的最佳工艺条件为:浸泡时间8h,浸泡温度30℃,萌发时间36h,萌发温度25℃,亚硒酸钠浓度80μg/mL。在此条件下得到富硒大豆产品总硒含量为27.31μg/g,其蛋白质中的硒含量可达31.95μg/g。本研究将为富硒食品研究开发提供基础。