富硒碎米荠对镉诱导非酒精性脂肪性肝病拮抗作用研究

目的研究富硒碎米荠对重金属镉诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的拮抗作用。方法将40只C57BL/6J小鼠随机分为4组:对照组(Con,正常饲养)、模型组(Cd,腹腔注射氯化镉溶液2 mg/kg,1次/2 d,连续4周)、富硒碎米荠组(SEC,7.5μg/20 g,灌胃,1次/周,连续5周)、富硒碎米荠+模型组(SEC+Cd,7.5μg/20 g灌胃+2 mg/kg腹腔注射)。观察临床症状及精神状态,记录体质量变化。末次注射后禁食12 h,取血清测定肝功能、血脂指标;取肝脏组织,HE染色观察肝细胞损伤及炎症程度;油红O染色肝脏组织切片观察脂质沉积情况;qRT-PCR分析代谢脂质与炎症趋化因子的mRNA水平。结果与Con组比较,Cd组血清ALT、AST、TG、TC显著升高(P<0.01或P<0.001),肝细胞出现空泡变性及炎性细胞浸润,脂肪沉积明显,代谢脂质与炎症趋化因子mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。与Cd组比较,SEC+Cd组血清ALT、AST、TG、TC显著降低(P<0.05或P<0.001或P<0.0001),肝细胞空泡变性及炎性细胞浸润有所减轻,脂肪沉积减少,代谢脂质与炎症趋化因子mRNA表达降低(P<0.05或P<0.001或P<0.0001)。结论SEC能显著降低镉诱导的ALT、AST、TG、TC升高,减轻肝细胞损伤及脂肪变性与沉积,降低脂质代谢与炎症趋化因子mRNA的过表达,有效拮抗镉诱导的NAFLD。

空间金属组学与空间代谢组学助力碎米荠富硒机制研究

碎米荠(Cardamine violifolia)是我国发现的一种能富集硒的草本植物,植株中硒含量可达几千mg·kg-1。硒不是植物必需元素,因此研究碎米荠对硒的富集机制有利于探究植物解硒毒机制,同时也为利用富硒碎米荠做富硒原料打下良好基础。本研究首先利用ICP-MS、HPLC-ICP-MS、同步辐射XRF及同步辐射XAS等技术对富硒碎米荠植株中不同部位的硒含量、形态、分布及化学种态进行了研究。

微生物青贮羊粪和堇叶碎米荠制作富硒饲料在山羊生产中的应用研究

试验探究了微生物青贮羊粪生产富硒饲料在山羊生产中的应用效果,旨在解决集约化、规模化畜禽养殖生产中的废弃物污染问题。试验采用10%、15%、20%、25%、30%的羊粪混合不同比例的黑麦草、粉碎玉米及富硒碎米荠残渣,并添加发酵菌剂进行厌氧青贮,检测富硒羊粪青贮饲料的感官评定、营养成分、安全性评价指标、含硒量,并分析富硒羊粪青贮饲料对山羊生长性能的影响。结果显示,羊粪和黑麦草混合青贮后,粪臭味、氨味完全消失,由之前的黏性、颗粒状变为质地松软、不成团且带有面包香味的发酵饲料,各试验组发酵饲料的感官评定等级均为二级及以上。所有试验组发酵饲料的黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))均小于10μg/kg,符合《饲料卫生标准》(GB 13078—2017)。试验组Ⅳ发酵饲料的干物质、粗蛋白含量最高,酸性洗涤纤维及中性洗涤纤维最低。20%的富硒饲料可以显著提高山羊的试验末重、平均日增重,显著降低料重比(P<0.05)。研究表明,羊粪、黑麦草、玉米、富硒碎米荠残渣发酵的适宜比例为25∶65∶5∶5,其可以提高山羊的生长性能。

富硒壶瓶碎米荠对青鱼幼鱼生长、生理生化、硒代谢、抗氧化及先天免疫的影响

为探究富硒壶瓶碎米荠(Cardamine hupingshanensis)对青鱼(Mylopharyngodon piceus)幼鱼生长、血清生理生化、肝脏硒代谢、抗氧化能力和先天免疫指标的影响,选取360尾初始体重为(5.51±0.02)g的青鱼幼鱼随机分配至4个实验组中,每组3个重复。在基础饲料中添加富硒壶瓶碎米荠的量为0、0.5、1.0和2.0 g/kg(硒的实际含量分别为0.04、0.43、0.75和1.57 mg/kg),同时添加矿物质混合物(无硒添加)和维生素混合物,配置成4种等氮等能的青鱼幼鱼试验饲料,养殖周期为60d。结果显示:饲料中添加0.5和1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠时,鱼体增重率(WG),特定生长率(SGR)较对照组和过量组(2.0 g/kg)显著升高,饲料系数(FCR)显著降低(P<0.05)。当饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量为0.5—1.0 g/kg时,血清中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)和白蛋白(ALB)含量呈上升趋势,而葡萄糖(GLU)含量显著下降(P<0.05)。饲料中添加0.5—1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠时可显著提高肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)、Mn超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)相关基因表达量,同时显著提高肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量(P<0.05)。肝脏中硒代半胱氨酸裂解酶(SCLY)、硒磷酸合成酶1(SPS1)、15 kD硒蛋白(SEP15)、硒蛋白T2(SEPT2)、硒蛋白H(SEPH)和硒蛋白P(SEPP)相关基因表达量在饲料中富硒壶瓶碎米荠添加量为1.0 g/kg时较对照组显著升高(P<0.05)。此外,饲料中添加0.5—1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠可显著提高肝脏表达抗菌肽2b(Leap2b)、铁调素(HEPC)、溶菌酶(LYZ)和补体C3(C3)相关基因表达量(P<0.05)。由此可见,在饲料中添加0.5—1.0 g/kg富硒壶瓶碎米荠可以促进青鱼幼鱼生长,增加鱼体的蛋白沉积,促进机体硒代谢,提高肝脏抗氧化和先天免疫能力。

堇叶碎米荠富硒多肽对乙醇诱导THLE-2肝细胞损伤的保护作用

采用堇叶碎米荠富硒多肽(selenium-enriched peptide of Cardamine violifolia,SPE)处理人源肝细胞,研究SPE能否干预由乙醇引起的肝细胞损伤。利用酒精诱导损伤THLE-2肝细胞构建氧化应激模型,通过不同浓度有机硒的SPE处理后,测定细胞损伤和氧化应激相关指标,评价其细胞保护和抗氧化能力。结果显示,乙醇浓度为1000 mmol/L,乙醇作用时间为12 h时,可对THLE-2细胞造成明显损伤(P<0.05)。SPE处理可明显提高细胞存活率(P<0.05),在12μmol/L硒浓度作用下可达78.02%。与损伤组相比较,SPE处理组上清液的谷草转氨酶、谷丙转氨酶和乳酸脱氢酶含量显著减少(P<0.05),并且,SPE处理后,THLE-2细胞内活性氧含量减少,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽水平显著上升(P<0.05),最高分别为34.68 U/mg、974.75 nmol/g、1.76 U/mg和55.58μmol/g,其中,谷胱甘肽过氧化物酶高度表达,约为损伤组的5.6倍,可能因为SPE为谷胱甘肽过氧化物酶合成提供硒离子。另外,SPE处理组的细胞凋亡率降低,线粒体膜电位升高。综上所述,堇叶碎米荠富硒多肽可以通过调控氧化应激相关指标来达到缓解酒精性肝损伤的目的。

富硒堇叶碎米荠中硒化合物的形态分析与鉴定

该文以富硒堇叶碎米荠为研究对象,通过酶解法提取其中的硒化合物,采用高效液相色谱-电感耦合等离子质谱(HPLC-ICP-MS)定量分析已知的硒化合物;对于未知的硒化合物,将酶解液经3 kDa超滤离心管浓缩除杂、冻干后,用初始流动相复溶,选取Kinetex F5超高效液相五氟苯基柱(100 mm×2.1 mm,2.6µm),以0.1%(体积分数)甲酸-水溶液和0.1%(体积分数)甲酸-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,通过超高效液相色谱-电喷雾电离源高分辨串联质谱(UPLC-ESI-Triple TOF MS),利用硒独特的同位素模式、一级质谱(TOF MS)和二级质谱(TOF MS/MS)进行筛选与鉴定。结果表明:HPLC-ICP-MS定量分析了堇叶碎米荠中的5种硒化合物,分别为硒代胱氨酸(SeCys_(2))、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)、四价硒[Se(Ⅳ)]、六价硒[Se(Ⅵ)];UPLC-ESI-Triple TOF MS鉴定了其他15种硒化合物,包括7种已报道和8种未报道的硒化合物,并提出了C_(4)H_(7)NO_(2)Se、C_(5)H_(8)O_(2)Se和C_(7)H_(9)NO_(2)Se 3种未报道硒化合物的结构。