富精氨酸小肽对肉鸡肝脏功能的保护作用

为了明确富精氨酸小肽(ARSP)对肉鸡肝脏功能的保护作用,本研究选用120只1日龄肉鸡按照2×2因子设计随机分成4组,每组3个重复。肉鸡分别饲喂基础日粮或在此基础上添加0.5%富精氨酸小肽(ARSP),于27~31日龄腹腔注射1 mg/kg体重的脂多糖(LPS)或等量的生理盐水。于注射后3 h和12 h,采集血清和肝脏样品。结果发现:注射LPS显著增加肉鸡血清谷草转氨酶(AST)以及谷丙转氨酶(ALT)或碱性磷酸酶(ALP)的活性(P<0.05);在注射后3 h时,ARSP处理可显著降低血清ALP活性(P<0.05),并有降低血清AST活性的趋势(P=0.063)。注射LPS显著上调肝脏中多种白介素(IL-1β、IL-6和IL-8等)和肿瘤坏死因子α的含量(P<0.05),同时显著上调肝脏中多种白介素(IL-1β、IL-6和IL-8等)和炎症信号分子(如TLR2、TLR4和NF-κB p65等)的mRNA表达量(P<0.05);ARSP处理可显著缓解LPS引起的上述指标变化(P<0.05)。以上结果表明添加0.5%ARSP可通过抑制TLR2/NF-κB和TLR4/NF-κB通路缓解LPS导致的肉鸡肝脏炎性损伤。

富精氨酸细胞穿透肽在内化中的直接易位机制

富精氨酸细胞穿透肽(cell-penetrating peptides,CPPs)是能够有效内化到细胞内的一系列短肽,被广泛用作生物活性分子的载体。富精氨酸CPPs的内化机制至少可分为内吞途径及直接易位2类。其中,直接易位的内化途径发生在膜局部区域即膜核化区,富精氨酸CPPs与质膜反荷阴离子相互作用结合在质膜上,在膜电位的驱动下诱导局部膜结构发生动态变化如膜颗粒形成、局部膜翻转、膜曲率改变、瞬态孔隙形成及脂质排布松散等。此外,反荷阴离子芘丁酸能够有效促进富精氨酸CPPs的直接易位。肽浓度、所运送分子的性质、培养温度、质膜脂质组成、细胞系类型以及细胞氧化状态等都能够影响甚至决定富精氨酸CPPs采用何种内化机制。细胞特异性CPPs或许可以解决CPPs靶向性较差的问题。

精氨酸修饰壳聚糖提高基因转染效率的研究

富精氨酸短肽由于其独特的内在化机理而受到了广泛的关注.研究结果表明,精氨酸和胍基能有效转运穿透细胞膜,在细胞穿膜过程中扮演非常重要的角色.本文将精氨酸接枝到壳聚糖上制备了一种新型的壳聚糖衍生物——精氨酸修饰的壳聚糖(Arg-CS),并用复凝聚的方法制备了Arg-CS/DNA纳米复合物.对Arg-CS及Arg-CS/DNA复合物的物理化学性质进行了表征,并以HeLa细胞为宿主细胞研究了Arg-CS/DNA复合物的转染行为和效率.Arg-CS介导的荧光素酶质粒的表达较壳聚糖介导的荧光素酶的表达提高了大约100倍,而MTT实验表明,Arg-CS及其与DNA复合物在整个实验浓度范围内细胞毒性均很小,Arg-CS有望成为一种高效、安全的壳聚糖基非病毒载体.

蛋白质转导及其内在化机制

蛋白质转导是新近发展起来的向细胞内快速输送外源性大分子或高极性分子的有效途径。它实质上是一些蛋白质,尤其是病毒蛋白上被称为蛋白质转导区(PTD)的小片段,蛋白质和其他物质,如DNA、脂质体、纳米颗粒、环孢素A等与之结合后,即能够被携带进入细胞或穿过血脑屏障。蛋白质转导的内在化机制目前尚不清楚,可能与带正电荷(富Arg)的PTD肽与细胞膜上带负电荷的硫酸乙酰肝素有关,但不排除其他内在化机制。