即刻种植联合富血小板纤维蛋白固定种植体在前牙缺失治疗中的疗效及对患者龈沟液骨桥蛋白的影响

目的:探究即刻种植联合使用患者富血小板纤维蛋白(PRF)固定种植体在前牙缺失治疗中的疗效及对患者龈沟液骨桥蛋白(OPN)水平的影响。方法:选择前牙缺失患者82例,依照随机数字表法分为两组各41例,对照组即刻种植,观察组在对照组基础上联合PRF。对比两组总有效、OPN、碱性磷酸酶(ALP)、骨保护素(OPG)、软垢指数、龈沟出血指数、菌斑指数、种植体周围骨密度、唇腭向骨厚度、唇腭向骨高度。结果:观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。术前,两组OPN、ALP、OPG比较,无统计学差异(均P>0.05);术后30d,观察组OPN、ALP水平及软垢、龈沟出血、菌斑指数较对照组降低,而OPG高于对照组(均P<0.05)。在术后6、12周,观察组种植体周围骨密度、唇腭向骨厚度、唇腭向骨高度高于对照组(均P<0.05)。结论:即刻种植联合使用PRF在前牙缺失即刻种植中具有较为理想疗效,有利于改善骨代谢。

富血小板纤维蛋白膜联合西帕依固龈液治疗中度牙周炎的疗效分析

目的研究富血小板纤维蛋白膜(Platelet rich fibrin,PRF)联合西帕依固龈液治疗中度牙周炎的疗效。方法以2021年8月-2022年6月新疆军区总医院口腔颌面外科(口腔门诊)就诊的91名中度牙周炎的患者为研究对象,随机分为试验组(47人)和对照组(44人)。对照组采用常规牙周基础治疗结合西帕依固龈液含漱。试验组在对照组基础上,联合PRF治疗,术后1个月复查,比较两组治疗前后有效率、牙龈出血指数(Sulcus bleeding index,SBI)、菌斑指数(Plaque index,PLI)、附着丧失指数(Loss of attachment,AL)、探诊深度(Probing depth,PD),采用ELISA法检测炎性因子水平白细胞介素(IL)-1β、IL-8、IL-10。结果与对照组比较,试验组治疗后总有效率升高,牙周SBI、PLI、AL,PD水平均降低,牙龈沟液中IL-1β、IL-8、IL-10水平均下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PRF联合西帕依固龈液治疗中度牙周炎效果显著,值得临床推广。

富血小板纤维蛋白中生长因子含量及释放周期的实验研究

目的 比较分析富血小板血浆(PRP)与富血小板纤维蛋白(PRF)中转化生长因子-β3(TGF-β3)、血小板源生长因子-AA(PDGF-AA)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)总含量及生长因子释放周期。方法于2020年6—8月课题组招募10名健康成年人志愿者,同一时间段在双侧肘静脉各抽血5 ml,双侧均按随机数表法分为PRP组和PRF组,通过ELISA法检测两组标本中TGF-β3、PDGF-AA和IGF-1含量,比较分析生长因子含量和释放周期,通过电镜扫描观察PRF的显微结构。结果 PRP组血液标本中TGF-β3、PDGF-AA和IGF-1含量分别为(385.3±36.8)ng/ml、(113.8±17.4)ng/ml、(102.4±12.5)ng/ml,PRF组分别为(401.8±43.4)ng/ml、(128.5±19.1)ng/ml、(109.8±14.7)ng/ml,两组比较,差异无统计学意义(P> 0.05);PRP中TGF-β3、PDGF-AA和IGF-1等生长因子在3 d内达到释放高峰,1周内缓慢释放,PRF中TGF-β3、PDGF-AA和IGF-1在3周后持续缓慢释放,释放曲线相一致,但存在不同释放高峰时间点;扫描电镜观察结果显示PRF中胶原纤维束形态规则、结构清晰、表面光滑,纤维束之间相互交联缠绕,呈网状结构,内含大量细胞成分。结论 PRP与PRF标本中TGF-β3、PDGF-AA和IGF-1的释放总含量相似,但具有不同的释放高峰时间点,PRF具有独特的三维网状结构,可以容纳更多的小分子物质,因而具有更长的释放周期。

富血小板纤维蛋白渗出液对脂肪干细胞成骨分化及纳米羟基磷灰石支架生物相容性的影响

目的:观察Beagle犬脂肪干细胞在向成骨细胞分化过程中富血小板纤维蛋白(Platelet-richfibrin,PRF)渗出液的作用,及其与支架材料纳米羟基磷灰石支架生物相容性的实验研究。方法:酶消化法获得Beagle犬脂肪干细胞,将收集的富血小板纤维蛋白渗出液分为成骨诱导矿化液组(含成骨矿化液+5%PRF渗出液)、B组对照组(含成骨矿化液的10%FBS的DMEM)和C组空白组(普通10%FBS的DMEM培养液),观察PRF渗出液对成骨的影响,并用环境扫描电镜观察Beagle犬脂肪干细胞与经PRF渗出液孵育的纳米羟基磷灰石支架复合培养后的附着增殖情况。结果:在PRF渗出液的作用下,脂肪干细胞能够更加有效地向成骨细胞分化,形成更多的钙化结节,结节细小致密。环境扫描电镜观察,脂肪干细胞能在支架上充分地附着伸展。结论:PRF渗出液能够有效促进脂肪干细胞向成骨细胞分化,纳米羟基磷灰石三维支架材料具有很好的生物相容性。

富白细胞-血小板纤维蛋白联合聚己双胍复合液治疗Wagner3级糖尿病足创面的效果

目的探讨富白细胞-血小板纤维蛋白(L-PRF)联合聚己双胍复合液治疗Wagner3级糖尿病足创面的效果。方法选取2021年7月至2022年10月南昌大学第四附属医院内分泌科收治的60例Wagner3级糖尿病足患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组(30例)与观察组(30例)。对照组采用L-PRF治疗,观察组采用L-PRF联合聚己双胍复合液治疗。比较两组患者的溃疡面积、创面愈合率、创面细菌培养阳性率、创面治疗总有效率、患者住院时间及住院费用。结果两组患者治疗前的溃疡面积比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗后的溃疡面积均小于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后的溃疡面积小于对照组,创面愈合率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后的创面细菌培养阳性率均低于治疗前,观察组患者治疗后的创面细菌培养阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的住院时间短于对照组,住院费用少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论L-PRF联合聚己双胍复合液治疗Wagner3级糖尿病足创面,能有效促进创面愈合,提高细菌清除率和治疗效果,缩短住院时间,降低治疗成本,值得临床推广应用。

富血小板纤维蛋白提取液对经TNF-α刺激下人牙周膜细胞的影响

目的:检测富血小板纤维蛋白提取液(PRFe)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激下的人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化能力的影响。方法:组织块法分离培养hPDLCs,免疫组化鉴定其来源;Choukroun法制取PRFe;实验分为空白对照组、TNF-α(10 ng/ml)组、PRFe组和PRFe+TNF-α(10 ng/ml)组。碱性磷酸酶试剂盒检测ALP活性;茜素红染色观察细胞矿化功能;Western blotting检测Runx2、Osterix蛋白含量。结果:ALP活性检测、茜素红染色和Western blotting结果显示TNF-α组各项指标均低于空白对照组(P<0.05),PRFe组各项指标均高于空白对照组(P<0.05),PRFe+TNF-α组各项指标均高于TNF-α组(P<0.05),PRFe组各项指标均高于PRFe+TNF-α组(P<0.05)。结论:PRFe可促进经TNF-α刺激的hPDLCs成骨分化。

比较浓缩生长因子提取液和富血小板纤维蛋白提取液对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响

目的:比较浓缩生长因子提取液(concentrated growth factor extract,CGFe)和富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法:制备CGFe和PRFe。分别采用含CGFe(10%,20%,30%)与PRFe(10%,20%,30%)的DMEM培养基培养MC3T3-E1。分别于培养的第1,3,5,7天,采用MTT法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法检测细胞中ALP的活性;采用定量RTPCR(quantitative RT-PCR,RT-qPCR)检测培养第3和7天细胞中核心结合蛋白因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix,Osx)mRNA表达水平。结果:在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe与PRFe均能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe与PRFe比较,CGFe组细胞的增殖活性高于PRFe组,差异有统计学差异(均P<0.05)。在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组的ALP活性均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组的ALP活性高于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。在3,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组Osx和Runx2 mRNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组Osx mRNA表达水平明显高于PRFe组,Runx2 mRNA表达水平明显低于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:CGFe比PRFe更能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,这可能与其增加ALP活性及上调成骨相关基因Osx的表达有关。

富血小板纤维蛋白提取液对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响

目的研究富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)及其释放的血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)对牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)增殖活性的影响,为其应用于辅助促进牙龈软组织增量提供实验依据。方法通过组织块培养法分离培养牙龈成纤维细胞,将收集的富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)转化为PRFe,电镜观察PRF三维结构并通过ELISA定量测定PRF中PDGF含量,并将PRFe配比为2.5%PRFe、5%PRFe、7.5%PRFe、10%PRFe、12.5%PRFe、15%PRFe,通过CCK8法检测不同浓度PRFe对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响,确定最佳PRFe浓度后,流式细胞周期实验检测PRFe对细胞增殖周期的影响,并通过中和其释放的PDGF,观察PDGF对牙龈成纤维细胞增殖活性的影响。结果PRF为三维网状结构,其间含有大量的生长因子,其中PDGF释放在第7天达到峰值;不同浓度PRFe对HGFs增殖活性结果显示,HGFs对PRFe呈浓度依赖性,但在5%PRFe浓度时效果最佳(P<0.05),其后浓度增加对HGFs增殖影响差异无统计学差异(P>0.05);流式细胞周期实验结果表明,5%PRFe可以刺激牙龈成纤维细胞S期分裂增殖;而PDGF中和实验结果表明,中和部分PDGF对牙龈成纤维细胞的增殖呈抑制作用。结论5%浓度的PRFe体外促进牙龈成纤维细胞的效果最佳,PRF所释放的PDGF在促进牙龈成纤维细胞的增殖中起着重要作用。

富血小板纤维蛋白凝胶析出液对人牙髓细胞体外矿化的影响

目的探索富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)凝胶析出液对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)体外矿化的影响。方法组织块法培养hDPCs。采用Choukroun一步离心法制备PRF凝胶。将新鲜制备的PRF凝胶浸泡于DMEM培养基中,于第7d取析出液。用PRF凝胶析出液孵育hDPCs 3d后更换矿化诱导液。采用茜素红染色和RT-PCR检测人牙髓细胞矿化的潜能。结果矿化诱导21d后,茜素红染色观察到实验组有少量钙结节生成,而对照组无钙结节生成;RT-PCR结果显示,实验组hDPCs碱性磷酸酶(ALP)的表达为对照组的1.5倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PRF凝胶析出液可促进人牙髓细胞矿化。

WHBE兔膝骨关节炎模型的建立与PRFr的干预研究

目的采用内侧副韧带和部分髌韧带切除术建立WHBE兔KOA模型并用富血小板纤维蛋白释放液(PRFr)干预,探讨WHBE兔KOA模型软骨损伤和炎症的机制以及PRFr干预疗效。方法取WHBE兔24只,随机分成3组,即对照(NC)组(n=6)、模型(KOA)组(n=12)和治疗(PRFr)组(n=6);其中KOA组和PRFr组分别于术后第7天和第14天时向两侧关节腔内注射生理盐水和PRFr 0.5 mL。造模4、8周时,各组动物进行行为学评分、X线影像学观察,并取血清进行ELISA检测IL-1β、TNF-α、MMP-13水平,4周时KOA组处理6只,8周时处理各组剩余动物,取兔双侧膝关节,进行大体评分,脱钙后行病理切片制作,然后进行HE染色、甲苯胺蓝染色和番红O固绿染色以及TGF-β、BMP3和NF-κB免疫组化表达检测。结果与NC组比,造模后WHBE兔Lequesne MG行为学评分,Mankin’s评分,Pelletier评分均显著升高(P<0.01),可见膝关节肿胀明显、关节疼痛刺激和活动受限明显,且X光显示软组织呈高密度阴影,关节积液较多,解剖观察显示关节面粗糙,病理观察显示软骨表面缺损,软骨细胞丢失或部分丢失,表明WHBE兔KOA模型成立。与KOA组比较,PRFr干预治疗后血清炎症水平(IL-1β、TNF-α、MMP-13)均显著降低(P<0.05,P<0.01),软骨表面粗糙程度低,大部分软骨细胞分布整齐;同时TGF-β、BMP3和NF-κB表达水平亦显著降低(P<0.01)。结论本研究成功建立了WHBE兔KOA模型,且PRFr可通过TGF-β/BMP和NF-κB途径改善WHBE兔KOA模型软骨损伤和炎症。

血小板衍生物在组织再生研究和应用中的标准化管理

目的总结血小板衍生物在组织再生研究与应用中的标准化管理方式。方法查阅近年来国内外血小板衍生物在组织再生研究与应用中出现的瓶颈问题和标准化管理措施的相关文献,并进行分析和总结。结果尽管血小板衍生物越来越多地用于骨关节、皮肤、神经、肌腱韧带、颌面外科等多种组织再生重建研究,但因制备方法差异大、命名不规范、报告系统不完善以及缺乏制备过程的量化和标准化管理等问题,造成了研究与应用结果的不确定性和不可比性。近年来国际发展呈现出标准化研究与质量管理趋势。结论实行标准化研究与质量管理将有助于促进血小板衍生物在再生修复领域的研究与应用。