富血小板血浆凝胶缓解CCI模型大鼠周围神经痛及其改善中枢海马组织炎性机制研究

目的建立大鼠坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)模型,观察富血小板血浆凝胶(PRP)对CCI大鼠坐骨神经病理性疼痛进展期痛域的影响,并探讨其对中枢海马组织的抗炎作用机制。方法选择SPF级雄性SD大鼠50只,其中10只用于制备PRP,其余40只采用随机数表法分为空白对照组、假手术组、CCI组和CCI+PRP组,每组10只。比较各组大鼠在术前1 d、术后6 h、1 d、3 d、7 d足底机械性缩足反射阈值(MWT)和热辐射缩足潜伏期(TWL)变化;比较术后7 d时各组大鼠海马区肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和高迁移率组蛋白1(HMGB1)及其下游Toll样受体-4(TLR4)、糖基化终产物受体(RAGE)mRNA表达水平。结果空白组与假手术组各时间点大鼠MMT和TWL比较差异均无统计学意义(P>0.05);CCI组和CCI+PRP组大鼠术后MMT和TWL值与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05);CCI组和CCI+PRP组大鼠术后各时间点MWT和TWL比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术后7 d时,对照组和假手术组大鼠海马组织的TNF-α、IL-1β、HMGB1含量以及HMGB1、TLR4和RAGE mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),而CCI组和CCI+PRP组与对照组或假手术组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);术后7 d时,CCI+PRP组与CCI组大鼠海马组织的TNF-α、IL-1β、HMGB1含量以及HMGB1、TLR4和RAGE mRNA表达水平比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论富血小板血浆可有效延缓CCI大鼠神经病理性疼痛进展期痛域,抑制中枢海马组织炎性反应,其机制可能与富血小板血浆通过HMGB1-TLR4/RAGE信号通路抑制TNF-α、IL-1β表达水平有关。

富血小板血浆与浓缩生长因子修复糖尿病足创面的临床观察

目的:探究富血小板血浆(Platelet rich plasma,PRP)与浓缩生长因子(Concentrated growth factor,CGF)修复糖尿病足创面的临床效果。方法:回顾性分析2017年6月-2022年10月笔者医院收治的90例糖尿病足患者临床资料,按照治疗方法的不同将患者分为CGF组、PRP组和常规治疗组各30例。统计比较三组创面换药次数、愈合时间、细菌培养阳性率、不良反应及治疗总有效率。结果:三组换药次数及创面愈合时间比较均CGF组<PRP组<常规组(P<0.05);治疗1、2周后,三组创面细菌感染阳性率比较,均CGF组<PRP组<常规组(P<0.05)。三组总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05);CGF组、PRP组总有效率均高于常规组(P<0.05);CGF组与PRP组总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组均无明显不良反应。结论:CGF和PRP作为血小板活性物质,能够促进创面愈合,发挥抗炎抑菌作用。与PRP相比,CGF更能缩短创面愈合时间,减少换药次数,抑菌效果更好,但两者在治疗总有效率方面效果相当。

冷冻保存富血小板血浆对创伤修复的影响及体外机制研究

目的评估-80℃超低温冷冻保存后冻融的富血小板血浆(PRP)对伤口愈合相关细胞的影响,揭示超低温冻融的PRP在创伤修复中的机制,明确低温冷冻保存PRP对促进伤口愈合应用的可行性和有效性。方法使用未激活的新鲜PRP、钙离子激活的新鲜PRP和冻融后PRP分别与巨噬细胞、成纤维细胞和血管形成细胞共培养,测定比较巨噬细胞极化与炎症反应相关因子的表达及细胞迁移率和增殖率等多项指标,分析PRP对巨噬细胞极化、炎症及细胞增殖的影响。结果与对照组比较,超低温冻融后的PRP使巨噬细胞M1样极化基因iNOS表达降低(P<0.0001),NO分泌减少(P<0.001),尿素含量增加(P<0.0001),M1相关炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)降低(P<0.001),白细胞介素(IL)-1分泌降低(P<0.001),M2相关抗炎因子IL-10、IL-12分泌水平增加(P<0.01,P<0.05)。此外,冻融PRP共培养明显促进细胞迁移,提高了血管形成效率,高于新鲜PRP组(P<0.01),与激活PRP组效果相当。细胞活死染色和CCK-8增殖实验也显示与冻融PRP共培养的L929和HUVEC细胞增殖率均显著增加(P<0.01)。结论-80℃超低温冷冻保存后的PRP能够显著增强细胞的迁移、分化和增殖能力,同时抑制炎症因子产生,促进巨噬细胞的M2样极化。低温冷冻保存可被视为一种有效的PRP保存方法。

同种异体富血小板血浆在创面修复中的应用及展望

富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)在创面修复领域的应用越来越受到重视。然而,部分患者由于存在相对或者绝对禁忌证无法采集或者使用自体PRP,将来源于严格的捐献者筛选和标准化制备方法和技术的同种异体PRP作为自体PRP的替代品可能对此类患者具有积极意义。本文旨在就异体PRP在创面愈合的机制、优势以及局限性、疗效和安全性进行总结和展望,为其应用于创面修复提供依据。

局部注射富血小板血浆联合水凝胶敷料对糖尿病足溃疡患者创面修复的影响及安全性研究

目的:探究局部注射富血小板血浆(PRP)联合水凝胶敷料对糖尿病足溃疡患者创面修复的影响及安全性。方法:将糖尿病足溃疡患者80例随机分为观察组(43例,接受PRP局部注射联合水凝胶敷料治疗)和对照组(37例,接受常规治疗)。比较两组患者的治疗效果、创面血流灌注量、细菌定量、治疗前后创面组织生化指标[血管内皮生长因子(VEGF)和透明质酸(HA)]、创面愈合情况以及并发症发生率。结果:观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组创面血流灌注量、创面组织VEGF和HA水平高于治疗前,细菌定量低于治疗前,且观察组变化幅度大于对照组(均P<0.05)。观察组在肉芽组织生长厚度、肉芽组织覆盖率、创面缩小率、创面愈合时间和植皮时间方面优于对照组(均P<0.05)。两组并发症总发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:局部注射PRP联合水凝胶敷料治疗能显著促进糖尿病足溃疡患者创面愈合,提升创面修复的生化环境,具有较高的安全性。

滑膜间充质干细胞联合富血小板血浆在软骨损伤修复中的研究

目的:对比滑膜间充质干细胞(SMSCs)、富血小板血浆(PRP)及两者联合的膝关节腔注射3种治疗方式对于兔软骨损伤的修复效果。方法:选取新西兰大耳兔24只,采用手术在兔膝关节中建造软骨损伤模型,采用随机数表法将软骨损伤模型分为空白组、单独SMSCs关节腔注射组(SMSCs组)、单独PRP关节腔注射组(PRP组)和SMSCs联合PRP关节腔注射组(SMSCs+PRP组)4组,每组6只。剔取4组兔关节滑膜进行SMSCs的体外培养,并进行SMSCs的形态学观察及鉴定。抽取兔静脉血,离心制备PRP,对比PRP与全血中血小板及生长因子的含量。将SMSCs和PRP注射入已造模的3组兔膝关节腔中,于注射治疗2、4和6周后根据国际软骨修复协会(ICRS)软骨修复评分对各组的软骨缺损区的修复情况进行评价。结果:兔膝关节滑膜的原代滑膜细胞分离初为圆形,传代后均为梭形。4组的SMSCs表面抗原CD73、CD90和CD105检测阳性率分别为100%、99.22%和99.99%,CD45检测0.5%,具备干细胞的性质。4组的血小板计数显示PRP中血小板浓度约为全血的6倍。PRP中血小板源性生长因子(PDGF)、转化生长因子-β(TGF-β)和血管内皮生长因子(VEGF)的浓度水平分别为(569.15±57.48)ng/ml、(633.56±63.90)ng/ml和(1243.55±106.04)ng/ml,约为全血中的5倍、6倍、7倍。关节腔注射治疗后2周时,4组的软骨修复评分差异均无统计学意义(P>0.05);注射治疗4周、6周后,SMSCs+PRP组软骨修复宏观形态学及组织学评分较空白组显著提高,差异均有统计学意义(t4周=6.35、9.15,t6周=8.16、8.60,P<0.05);结论:SMSCs联合PRP对于兔软骨损伤的修复效果明显优于单独进行PRP和单独SMSCs的治疗,且均优于未进行治疗情况,SMSCs联合PRP能够显著提高软骨损伤自我修复的效果。

富血小板血浆在子宫内膜损伤修复中的研究进展

子宫内膜损伤是生殖医学中面临的棘手问题,常由严重创伤或感染所致。临床上常表现为不孕,反复流产以及反复种植失败。改善生育结局仍是子宫内膜损伤治疗中的难点。富血小板血浆是抽取外周血液,通过离心方式获取的血小板浓缩物,富含多种生长因子,近年来被广泛应用于组织的再生修复。本文旨在通过综述富血小板血浆在子宫内膜损伤修复中的作用机制以及研究现状,为修复子宫内膜损伤提供新思路。

富血小板血浆对兔膝关节软骨缺损模型软骨修复重塑的效果及其机制初步研究

目的:评价富血小板血浆(PRP)对兔膝关节软骨缺损模型软骨的修复重塑作用及机制探讨。方法:选取18只成年新西兰大白兔,建立兔膝关节软骨缺损模型,随机分为实验组和对照组,每组9只。实验组对兔膝关节软骨缺损模型进行PRP关节腔注射0.4 mL(每4周1次),对照组仅进行兔膝关节软骨缺损模型造模,不给予任何干预措施。实验组注射后行组织学检测,采用苏木精-伊红染色(HE染色)、番红-固绿染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP染色)及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测软骨中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,观察两组关节软骨修复及血管化情况。结果:(1)对兔膝关节软骨缺损模型进行HE染色,结果显示软骨表面粗糙,完整性破坏,表层软骨出现纤维化变性及软骨严重缺损,造模成功。(2)与对照组比较,实验组HE染色显示软骨表面无裂隙,软骨细胞数量增多,排列紊乱程度减轻,潮线相对完整。通过番红-固绿染色发现,实验组潮线相对完整,软骨组织与骨组织分界线相对明显,软骨中间层细胞呈圆形,着色较淡,排列规律,软骨基质呈均匀浅红色。(3)通过免疫染色TRAP发现,实验组炎症程度相对较低,破骨细胞数量大幅度降低,骨丢失情况较对照相对降低。(4)通过实时荧光定量PCR检测软骨中VEGF mRNA发现,4周后实验组VEGF mRNA表达高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PRP可以加速兔膝关节软骨缺损模型软骨的修复,并与VEGF促进损伤组织的血管化作用密切相关。

富血小板血浆联合人工皮负压吸引修复腓骨长短肌腱外露及软组织缺损的临床研究

目的 评价富血小板血浆联合人工皮负压吸引修复腓骨长短肌腱外露及软组织缺损的临床疗效。方法 2018年1月至2020年12月荆门市第一人民医院采用PRP联合VSD治疗腓骨长短肌腱外露及软组织缺损创面20例,观察创面愈合率及创面愈合时间。结果 20例患者中18例直接愈合,2例肉芽组织生长丰富,覆盖肌腱组织后创面植皮均愈合;创面平均愈合时间为55 d。结论 自体PRP移植治疗联合人工皮负压吸引治疗腓骨长短肌腱外露及软组织缺损创面,能有效缩短足踝部骨、肌腱创面缺损愈合时间,促进创面修复。

富血小板血浆疗法在特应性皮炎中的研究进展

特应性皮炎(AD)以剧烈的瘙痒和皮肤干燥为主要特点,表现为慢性的、反复发作的湿疹样皮疹。富血小板血浆(PRP)通过所含的生长因子,与局部环境相互作用,促进相互分化和增殖,从而形成抗炎、再生与修复作用机制。应用PRP治疗AD在国外已有相关报告,但由于PRP治疗机制尚未明确,制备及应用无统一规范,国内鲜有报告。本文就PRP的制备、作用机制、应用疗效、局限和前景做一综述,从而总结PRP在AD的研究进展。

基于“瘀去-新生-骨合”理论研究富血小板血浆联合中药治疗股骨头坏死作用机制

非创伤性股骨头坏死(ONFH)是一种由于血供受损导致股骨头坏死、塌陷的骨科疑难性疾病。以辨证论治为基础,运用化痰祛瘀中药内服治疗早期ONFH,往往能取得较好的疗效。此外,富血小板血浆(PRP)含有多种生长因子,具有强大的再生能力,在ONFH治疗中呈现巨大潜力。“瘀去-新生-骨合”理论是中医骨伤科关于骨修复的重要理论,其原本用于描述骨折愈合的持续、渐进过程,而股骨头坏死的血供破坏,必有血瘀,整个股骨头坏死修复过程需要良好的血供支持,瘀血不去,新血不生,新生则骨合,这与骨折修复的过程不谋而合,因此,本文将基于“瘀去-新生-骨合”理论,探讨PRP联合化痰祛瘀中药治疗早期非创伤性股骨头坏死的作用机制,为临床治疗本病提供一定的理论参考。

富血小板血浆在神经病理性疼痛中的作用机制研究进展

神经系统的组织损伤、炎症、创伤及原发性病变等损害性因素可导致伤害性神经元过度兴奋而诱发异位电活动产生神经病理性疼痛(NP)。富血小板血浆(PRP)富含大量细胞因子及生长因子,可阻止促炎介质释放并促进抗炎介质释放,进而促进炎症消退,并促进受损神经轴突再生和局部神经再支配,加快感觉、运动神经传导速度的恢复,降低神经元的过度兴奋,改善和消除NP。PRP所释放的细胞因子的抗炎及镇痛作用可能会为NP的治疗提供一种新思路。

富血小板血浆联合静电纺丝纳米支架在骨及软组织修复中的应用

背景:静电纺丝和富血小板血浆均在组织再生与修复方面展现出巨大的应用前景,而对于负载富血小板血浆的静电纺丝纳米纤维复合支架的研究并不多见。目的:综述近年来负载富血小板血浆的静电纺丝纳米纤维复合支架在骨及软组织工程中的研究进展,以期为复合支架后续的深入研究和临床应用提供思路与理论支持。方法:以“Tissue engineering,Platelet-rich plasma,Electrospun scaffolds,Stem cell,Regenerative medicine”为英文检索词,以“组织工程、富血小板血浆、静电纺丝、干细胞、组织再生、骨再生、软骨再生、软组织再生”作为中文检索词,在PubMed,Web of Science,Ovid,SpringerLink,Wiley Oline Library,Medline,万方和中国知网数据库进行检索,最终纳入64篇文献进行综述。结果与结论:(1)负载富血小板血浆的静电纺丝纳米复合支架兼顾富血小板血浆与静电纺丝纳米支架的优点,更具弹性,不易撕裂,具备适当力学强度,生物相容性良好。(2)将富血小板血浆与三维取向纤维支架结合可更好地模拟天然组织的微环境,能更好地促进细胞的生长、增殖和分化,促进骨及软组织的修复与再生。(3)在骨组织再生方面,能在不同应力条件下有一定的抗压能力,具有良好细胞相容性;(4)在软组织再生方面,通过调控材料的孔隙率和表面积,既有益于细胞呼吸,又可以促进伤口愈合、神经细胞的生长和血管再生。(5)然而,目前能应用于临床的理想的能促进骨及软组织再生修复的材料仍然较少,如何利用各种材料的优点及如何优化各种材料的理化性能,从而加强支架与种子细胞的相互作用,使其对富血小板血浆源性生长因子保持较高的缓释效能,仍然是未来研究亟待解决的难题之一,有待进一步的体内研究和临床试验。

富血小板血浆来源的血小板细胞外囊泡分离技术与应用

背景:血小板细胞外囊泡是循环中最丰富的囊泡,富含丰富的生物活性分子、遗传物质及蛋白质等信息分子,参与细胞通讯和物质交换,不仅具有良好的促凝活性,还具有促进组织修复和再生的巨大潜力,在再生医学具有广泛的应用前景。目的:从血小板细胞外囊泡的分泌机制、在再生医学领域的应用及临床转化的限制因素进行阐述,为血小板细胞外囊泡的临床转化提供一些理论支撑。方法:应用计算机检索2005年1月至2023年8月PubMed数据库与血小板细胞外囊泡有关的文章,英文检索词为“platelet-derived,plateletrich plasma,extracellular vesicles,isolated,microvesicles exosomes,applications”,最后纳入符合主题标准的文献62篇进行综述分析。结果与结论:(1)活化的血小板细胞外囊泡可产生血小板微囊泡和血小板外泌体两种类型的囊泡,前者的分泌可能与肌动蛋白细胞骨架的不对称性相关,后者的分泌可能与H^(+)-ATP酶的调节相关。(2)血小板细胞外囊泡是血小板浓缩物和血小板本身的潜在效应物,可能通过促进血管生成、影响细胞行为、促凝与止血以及发挥炎症作用等几方面影响组织再生。(3)血小板细胞外囊泡在组织损伤、肌肉再生、软骨再生、骨关节炎等再生医学领域已有临床前报道,作为伤口愈合的潜在治疗方法已有临床试验数据,但血小板细胞外囊泡的分离方法、样本来源以及激活剂的种类等因素限制了血小板细胞外囊泡在再生医学领域的临床转化。(4)未来血小板细胞外囊泡可能成为再生医学中替代富血小板血浆的无细胞疗法,其临床转化还需要积极寻找鉴别血小板细胞外囊泡和血小板外泌体的特异性标志物,在激活剂刺激血小板细胞外囊泡产生的机制以及血小板细胞外囊泡的最佳收集方式、最佳储存方法、保质期限、临床应用的推荐剂量和最佳临床适应证还需要继续深入研究。

可缓释富血小板血浆生长因子的新型自组装多肽水凝胶制备及性能表征

背景:富血小板血浆水凝胶由于生长因子的突发释放与伤口部位蛋白酶的快速清除,导致生长因子在伤口部位的停留时间较短,近年来研究者关注利用水凝胶材料包封富血小板血浆,以改善富血小板血浆水凝胶的不足。目的:制备自组装多肽-富血小板血浆水凝胶,探究其对富血小板血浆生物活性因子释放的影响。方法:采用固相合成法合成自组装多肽,以D-PBS配制成溶液。将不同体积的多肽溶液分别与富血小板血浆、氯化钙/凝血酶溶液混合制备水凝胶,使体系中多肽的最终质量分数分别为0.1%,0.3%,0.5%,观察成水凝胶状态,并体外检测富血小板血浆中生长因子释放情况。将质量分数1%多肽溶液与质量分数1%人血清白蛋白溶液混合激发多肽自组装,使多肽的最终质量分数分别为0.1%,0.3%,0.5%,观察液体流动状态,并检测自组装多肽的流变力学性能。通过扫描电镜与透射电镜观察多肽(质量分数分别为0.1%,0.001%)-人血清白蛋白溶液的微观结构。结果与结论:①不同体积多肽溶液与富血小板血浆均可形成水凝胶,与富血小板血浆水凝胶相比,0.1%,0.3%多肽-富血小板血浆凝胶可缓解表皮生长因子、血管内皮生长因子的突发释放,延长释放时间至48 h。②添加人血清白蛋白后,0.1%多肽组仍呈流动液体,0.3%多肽组呈半液体状态,0.5%多肽组激发自组装形成水凝胶,确定富血小板血浆中人血清白蛋白可激发多肽自组装;随着多肽质量分数的提高,自组装多肽的存储模量越高,越容易成胶。③透射电镜下可见,添加人血清白蛋白前,多肽纳米纤维较短且无序堆积;添加人血清白蛋白后,多肽纳米纤维明显变长,并且相互交联成束,形成致密的纤维网络结构。扫描电镜下可见,添加人血清白蛋白前,多肽呈无序堆积的片状结构;添加人血清白蛋白后,多肽自组装成相互交联且有序密集排列的多孔状结构。④结果显示,新型自组装多肽可由富血小板血浆激发自组装,根据人血清白蛋白与多肽的比例可精准调节自组装效果,且多肽对富血小板血浆生长因子有缓释作用,可作为一种新型的生物材料应用于组织修复。

富血小板血浆与胶原蛋白海绵联合用于创面修复的研究进展

创面的形成原因与发病机制比较复杂,创面的愈合又是通过细胞因子和生长因子等多种因子共同作用的过程,愈合所需时间较长,严重时还会引发感染。创面迁延不愈会给患者的生活和工作造成不良影响,同时还会增加其经济负担。临床上修复创面的方法除了包括手术治疗外,还会使用外源性生长因子以及新型生物材料。近年来富血小板血浆(PRP)和胶原蛋白海绵在创面修复中被广泛应用。本文就PRP与胶原蛋白海绵联合用于创面修复的研究进展进行综述。

自体富血小板血浆治疗深二度烧伤合并感染创面的探讨——附1例报道

目的探讨自体富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)治疗深二度烧伤合并感染创面的可行性。方法回顾性分析1例深二度烧伤合并创面细菌感染患者,结合临床治疗要点与门诊随访情况,探讨自体PRP在烧伤创面合并感染的患者治疗中的可行性及临床效果。结果患者左下肢深二度烧伤创面合并凝固酶阴性葡萄球菌感染,经一般换药治疗及抗感染治疗1周,体温降至正常,但创面愈合缓慢且仍有黄色分泌物;后烧伤创面经联合外用自体PRP治疗,创面疼痛评分由8分逐渐下降至1分,2周后创面分泌物细菌培养阴性,18 d后创面完全愈合;PRP治疗后1、3、6个月创面瘢痕评分由5分降至2分,未见明显瘢痕形成;PRP疗程中亦未出现创面炎症反应加重、血常规、肝肾功能化验结果异常等不良反应。结论在深二度烧伤患者合并局部创面细菌感染,拒绝手术或不适合手术的情况下,自体PRP是1种较安全的替代方案,能够有效促进组织再生和创面愈合,本例患者在短期内达到治愈效果。

富血小板血浆凝胶在5例糖尿病患者难愈性植入物外露创面的临床应用

目的观察富血小板血浆(PRP)凝胶在糖尿病患者难愈性植入物外露创面的临床疗效,为植入物外露创面修复提供另一种选择。方法收集本院骨科2020年8月—2023年1月住院糖尿病行踝关节骨折术后难愈性植入物外露创面患者,通过纳入/排除标准,选取其中5例患者,以血液分离机采集自体PRP,并分5次制备成PRP凝胶,每隔7 d用自体PRP凝胶通过纱布包覆创面,及时观察创面愈合情况,待PRP凝胶治疗愈合率超过80%后停止使用PRP凝胶覆盖,改为常规换药。结果治疗2周后5名患者创面皆愈合明显,平均愈合率为50.3%,治疗4周后2名患者创面100%愈合、3例患者仅余小窦道,平均愈合率85.2%,再常规换药2周后100%愈合。结论自体PRP凝胶对于糖尿病患者的难愈性植入物外露创面修复效果明显,减少患者拆除植入钢板二次手术的机率,为此类创面修复提供新思路,值得临床应用。

富血小板血浆

通过自体全血通过离心获得的血小板浓缩制品。自体血小板可释放大量的生长因子,包括血小板源性生长因子、转化生长因子-β1、转化生长因子-β2、胰岛素样生长因子、表皮生长因子和血管内皮细胞生长因子等,对于软组织和硬组织的愈合有重要作用。

富血小板血浆及所含相关因子在组织修复再生中的应用与作用

富血小板血浆是自体血离心后的产物,目前已广泛用于整形外科和口腔颌面外科。近年来研究发现富血小板血浆可以促进骨再生,血管发生,软组织修复以及和干细胞复合用于骨科领域和组织工程,这使得富血小板血浆成为热门的研究课题。另有报道富血小板血浆具有促进难愈合伤口的作用。文章简要叙述了富血小板血浆的主要组成成分、临床应用、对骨愈合和软组织修复等方面的作用机制以及富血小板血浆的最新研究进展,并讨论其目前临床应用上主要存在的问题。