富集自体骨髓间质干细胞在兔椎间关节融合中的应用研究

目的探讨富集自体骨髓间质干细胞在兔椎间关节融合中的应用效果。方法选取健康10周龄的新西兰大白兔96只,雌雄不限,随机取新西兰大白兔24只,设为空白对照组(4组)。剩余72只新西兰大白兔均经前路腹膜外行腰椎间盘切除脊柱融合术,建立新西兰大白兔动物模型。建模成功后随机分为1组(n=24)、2组(n=24)、3组(n=24)。1组建模成功后不采取任何措施处理,常规饮食、饮水;2组给予纤维蛋白胶、骨形态发生蛋白干预;3组在2组基础上联合富集自体骨髓间质干细胞移植干预,比较四组大白兔第12周时阶段活动程度、四组大白兔椎体后缘高度丢失情况、椎间关节融合情况、X线侧位片上测量Cobb角情况。结果1组关节活动范围与活动度低于2组、3组、4组(P<0.05),2组、3组关节活动范围与活动度相比,无明显差异(P>0.05),4组关节活动范围与活动度最差;四组大白兔椎体后缘高度丢失情况相比,无明显差异(P>0.05);1组椎间关节融合分级高于2组、3组、4组(P<0.05),2组、3组关节融合分级相比,无明显差异(P>0.05),4组关节融合分级最差;四组大白兔Cobb角相比,无明显差异(P>0.05)。结论兔椎间关节融合中,富集自体骨髓间质干细胞移植效果显著,可以有效促进兔椎间关节融合,应在临床上广泛推广与应用。

自体骨髓间充质干细胞移植在老年股骨头坏死髓芯减压术中的应用价值

目的观察自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植在老年股骨头坏死(ONFH)髓芯减压术中的应用效果。方法该研究为前瞻性研究,选择平顶山市第一人民医院2022年1月至2023年5月收治的113例ONFH老年患者为研究对象,以计算机随机分组法将其分为试验组(57例)和对照组(56例),对照组予以传统髓芯减压术治疗,试验组经自体BMSCs移植联合髓芯减压术治疗,比较两组治疗前后的BMSCs表面分子、骨代谢水平、骨密度、骨坏死面积、髋关节功能及疼痛症状改善情况。结果在不同治疗方案下,试验组的BMSCs表面分子CD34、CD105、CD166表达量分别为(2.48±0.76)%、(13.36±3.27)%、(37.49±5.28)%,均高于对照组[(1.92±0.36)%、(11.45±2.13)%、(34.23±5.16)%](P<0.05);试验组骨保护素(OPG)、骨钙素(BGP)、成纤维细胞生长因子(FGF-2)分别为(5.45±1.36)pg/mL、(6.27±1.45)μg/mL、(43.35±10.46)ng/L,均高于对照组[(4.41±1.36)pg/mL、(5.52±1.44)μg/mL、(37.25±10.41)ng/L](P<0.05);试验组术后1个月、术后3个月的骨密度分别为(0.32±0.11)g/cm^(2)、(0.49±0.23)g/cm^(2),均高于对照组[(0.25±0.11)g/cm^(2)、(0.35±0.16)g/cm^(2)](P<0.05);骨坏死面积分别为(26.44±5.17)%、(20.45±5.23)%,均低于对照组[(29.12±5.33)%、(23.32±5.18)%](P<0.05);试验组术后1个月、术后3个月的视觉模拟疼痛量表(VAS)评分分别为(4.25±1.27)分、(2.82±0.46)分,均低于对照组[(5.33±1.77)分、(3.21±0.52)分](P<0.05);试验组术后1个月、术后3个月的髋关节Harris量表评分分别为(70.33±10.32)分、(85.66±10.45)分,均高于对照组[(65.22±10.36)分、(80.33±10.71)分](P<0.05)。结论自体BMSCs能通过上调骨髓干细胞表面分子而改善老年ONFH患者的骨代谢水平,自体BMSCs移植联合髓芯减压术可有效提升患者骨密度水平,并减少骨坏死面积,对缓解患者髋关节疼痛、促进髋关节功能恢复均有积极意义。

补肾痹通方联合骨髓间充质干细胞对损伤软骨细胞的保护机制及SOX9、MMP-13表达的影响

目的:探讨补肾痹通方(BSBT)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对白介素(IL)-1β诱导的损伤软骨细胞的保护机制及性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)表达的影响。方法:使用10 ng/ml的IL-1β建立损伤软骨细胞模型,实验分为对照组、模型组(IL-1β)、中药组(IL-1β+BSBT)、干细胞组(IL-1β+BMSCs)和联合组(IL-1β+BSBT+BMSCs);CCK-8法检测各组软骨细胞增殖情况;RT-qPCR法和Western blot法分别检测软骨细胞内SOX9、MMP-13、Ⅱ型胶原α1重组蛋白(COL2A1)、IL-10的基因和蛋白表达;ELISA检测各组细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的水平。结果:与模型组比较,各组软骨细胞活性显著增强(P<0.01),软骨细胞中的SOX9、COL2A1、IL-10的基因和蛋白水平显著升高(P<0.01),MMP-13的基因和蛋白水平明显降低(P<0.01),软骨细胞培养上清中TNF-α、IL-6的含量显著降低(P<0.01),IGF-1、bFGF的水平升高(P<0.01),其中联合组变化最明显(P<0.05)。结论:BSBT联合BMSCs可有效保护损伤软骨细胞,其机制可能是通过上调SOX9,下调MMP-13,抑制炎症,改善软骨细胞微环境,促进关节软骨的修复与再生。

SDF-1对骨髓间充质干细胞迁移和细胞外基质形成的影响

目的探讨基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)迁移、胶原RNA表达及细胞膜片细胞外基质表达的影响。方法CCK-8和Transwell细胞迁移实验观察SDF-1对BMSCs增殖和迁移的影响;实时荧光定量PCR检测BMSCs胶原RNA的表达水平;蛋白质印迹法检测BMSCs细胞膜片胶原蛋白的表达水平;酶联免疫吸附试验检测BMSCs细胞膜片培养基上清透明质酸(HA)的表达水平。结果SDF-1趋化BMSCs迁移作用的强度与浓度相关,对细胞的增殖无明显影响;SDF-1降低BMSCsⅠ型胶原与Ⅲ型胶原RNA和蛋白相对表达量的比值,并显著升高BMSCs细胞膜片透明质酸表达水平(P<0.05)。结论SDF-1在适宜的浓度范围内,可显著促进BMSCs的迁移,降低Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原RNA和蛋白相对表达量的比值,并可提高透明质酸的表达水平。

小鼠骨髓和脂肪间充质干细胞定向分化能力的比较研究

目的探讨小鼠骨髓源性间充质干细胞(BM-MSCs)和脂肪源性间充质干细胞(AD-MSCs)的定向分化能力。方法从C57BL/6J小鼠股骨骨髓和腹股沟白色脂肪组织中分别分离和培养BM-MSCs和AD-MSCs,分别使用成骨、成软骨和成脂诱导分化培养基诱导两种细胞定向分化。采用茜素红、阿利新蓝和油红O染色检测成骨、成软骨和成脂分化程度;实时荧光定量PCR(q PCR)鉴定MSCs并检测定向分化相关基因Runx2、Sp7(成骨),Sox9、Col2a1(成软骨),Pparg和Cebpa(成脂)表达水平,确定细胞的定向分化能力。基于GEO数据库中GSE43804和GSE122778数据集的小鼠和人类BM-MSCs和AD-MSCs基因表达谱数据,分析差异表达基因及其富集的信号通路。结果分离培养得到的BM-MSCs和AD-MSCs细胞形态不同,AD-MSCs梭形形态更明显;两种细胞均表达CD29、CD44和CD90,不表达CD34和CD45。定向诱导后AD-MSCs的成骨和成脂分化程度高于BM-MSCs,而成软骨分化程度低于BM-MSCs(P<0.05);定向诱导后AD-MSCs中Runx2、Pparg和Cebpa mRNA表达水平高于BM-MSCs,Sox9 mRNA表达水平低于BM-MSCs(P<0.05)。小鼠和人的AD-MSCs高表达的基因富集于PPAR和WNT信号通路,BM-MSCs高表达的基因富集于软骨和骨发育信号通路。结论小鼠AD-MSCs成骨和成脂分化能力强于BM-MSCs,而成软骨分化能力弱于BM-MSCs,PPAR、WNT、软骨和骨发育信号通路的活化状态在决定BM-MSCs和AD-MSCs不同定向分化潜能中起重要调节作用。

骨髓间充质干细胞

存在于骨髓中的间充质干细胞,具有定向或多向分化的潜能,呈成纤维细胞样,不仅可以分化为造血基质细胞,还可以分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞等。

自体骨髓间充质干细胞复合髓核脱细胞基质修复椎间盘退变的实验研究

目的探讨自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)辅以髓核脱细胞基质(DNPM)的细胞治疗作用。方法在本研究中,我们制作了一种优化的DNPM并通过评估其生化组成、水含量、生物安全性和力学性能来评估其性能。进一步研究DNPM在体外对BMSCs的NP样分化的刺激作用,以及在体内动物模式下,对退变椎间盘髓核的再生作用。实验分组:(1)sham组:非椎间盘损伤组;(2)退变组:椎间盘退变造模后未处理;(3)BMSCs组:椎间盘退变单纯注射BMSCs;(4)复合组:椎间盘退变注射BMSCs复合DNPM。结果4周后,约68%和43%的胶原蛋白和sGAG分别保留在NPCs中。NPCs也表现出与新鲜NP相似的力学性能。此外,NPCs具有生物相容性,能够诱导椎间盘退变(IVDD)中髓核样分化和细胞外基质(ECM)的合成。在体外实验中,12周后,复合组的椎间盘高度指数(DHI)(近81%)和MRI指数(349.05±38.48)显著高于造模组,接近sham组。NPCs还部分恢复了体内退化NP组织的ECM含量和结构。结论自体BMSCs辅以DNPM具有良好的生物和力学性能,并具有促进退化NPCs再生的能力,对椎间盘退变有较好的修复能力。

自体骨髓富集间质干细胞与羟基磷灰石磷酸三钙材料复合在脊柱融合中的应用

背景:脊柱融合过程中使用一定的骨移植材料可以达到促进骨融合、增强脊柱稳定性的效果。目的:探讨自体骨髓富集的间质干细胞复合羟基磷灰石磷酸三钙在脊柱融合中的应用效果。方法:回顾性分析64例行脊柱融合患者的临床资料,按照植骨融合材料的不同分为对照组(32例)和观察组(32例),分别予以自体髂骨移植和自体骨髓富集的间质干细胞复合羟基磷灰石磷酸三钙移植。治疗后随访12个月,对两组患者腰背疼痛、脊柱融合、伤椎复位情况等进行评估。结果与结论:治疗后两组患者LBOS评分、LBOS评分优良率、脊柱融合Lenke分级、Cobb角经比较差异无显著性意义(P>0.05)。两组患者均未出现感染和炎症表现,内固定物对皮肤无刺激现象。两组患者凝血功能、肾功能、炎性因子相关指标均处于正常水平,差异无显著性意义(P>0.05)。试验结果表明,自体骨髓富集的间质干细胞复合羟基磷灰石磷酸三钙应用于脊柱融合可以获得与自体髂骨移植基本相当的临床效果。

SDF-1表达升高促进骨髓间充质干细胞(BMSC)迁移减轻哮喘大鼠气道炎症

目的 观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)与骨髓间充质干细胞(BMSC)迁移及哮喘大鼠气道炎症的相关性。方法 取24只清洁级SD大鼠,随机均分为正常对照组、模型组、BMSC组;除对照组外,其余两组予卵清蛋白致敏激发制备哮喘模型,BMSC组于造模完成当天由尾静脉注射1 mL 106个BMSC。采用HE染色观察肺组织病理形态变化;Wright-Giemsa染色,光镜下计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中各种炎细胞数量;ELISA检测BALF中白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、IgE、IgG1、IgG2a含量;反转录PCR检测肺组织中SDF-1、信号转导子与转录激活子6(STAT6)的mRNA表达;免疫荧光细胞化学染色检测支气管上皮细胞中SDF-1的蛋白表达;Western blot法检测肺组织SDF-1、STAT6蛋白水平。结果 与对照组相比,模型组BALF中炎细胞计数及IL-4、IL-5、IL-13、IgE、IgG1、IgG2a含量显著升高;肺组织SDF-1、STAT6 mRNA和蛋白表达量显著升高;支气管上皮细胞SDF-1表达明显升高。与模型组相比,BMSC组BALF中炎细胞数目及炎性细胞因子含量均减少;肺组织STAT6 mRNA和蛋白表达降低,SDF-1基因表达量有所升高;支气管上皮细胞SDF-1蛋白表达增加。结论 哮喘炎症过程中,受损部位的趋化因子SDF-1的表达升高,并促进BMSC向哮喘大鼠肺组织迁移。BMSC通过归巢至受损肺组织发挥调节Th1细胞/Th2细胞免疫失衡的作用,从而抑制哮喘气道炎症。

脉冲电磁场对骨髓间充质干细胞成骨分化影响的研究进展

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是临床常见病,脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)是治疗OP的新方法,其可以通过共振效应促进成骨细胞的增殖和分化,从而发挥治疗OP的作用。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stemcell,BMSC)是一种具有多向分化能力的干细胞,其对OP的预防和治疗具有重要作用。本文概述了PEMFs和BMSC,就PEMFs对BMSC的作用、PEMFs促进BMSC成骨分化的相关信号通路进行了综述。

Wnt5a基因沉默对骨髓间充质干细胞向睾丸间质细胞分化的影响

目的 通过siRNA干扰技术研究Wnt5a基因沉默对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向睾丸间质细胞(LC)分化的初步机制。方法 采用流式细胞仪检测由中国科学院干细胞库提供的Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓间充质干细胞株表面蛋白(CD29、CD44、CD45、CD90)的表达。BMSCs分为NC组、siRNA1组和siRNA2组,分别转染空载siRNA,Wnt5a-siRNA-1,Wnt5a-siRNA-2;采用RT-qPCR法检测Wnt5a-siRNA转染后Wnt5a及Wnt/β-catenin信号轴中LRP-5、β-catenin、TCF mRNA的表达;采用ELISA法检测Wnt5a-siRNA转染后Wnt5a及Wnt/β-catenin信号轴中LRP-5、β-catenin、TCF的蛋白表达;免疫荧光实验通过检测转染3 d的细胞表面标志物3β-羟化类固醇脱氢酶(3β-HSD),分析BMSCs向LC分化水平;倒置显微镜观察转染5 d细胞的形态学变化。ELISA法检测转染后LC的睾酮生成水平。结果 购买的大鼠BMSCs细胞株表面抗体CD29、CD44及CD90阳性表达及CD45阴性表达符合大鼠BMSCs的特异性抗体特征。与NC组比较,siRNA1组和siRNA2组Wnt/β-catenin信号轴中LRP-5、β-catenin、TCF的mRNA及蛋白表达量下降(P<0.05),睾酮分泌量均显著升高(P<0.05)。siRNA1组和siRNA2组LC特异性标记物3β-HSD染色阳性面积百分比明显高于NC组(P<0.01);细胞转染后形态学变化符合LC的形态特点。结论 Wnt5a-siRNA转染BMSCs细胞可显著抑制Wnt5a的mRNA和蛋白表达;Wnt5a基因沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号通路发挥促进BMSCs向LC分化的作用。

骨髓间充质干细胞治疗激素性股骨头坏死的研究进展

激素性股骨头坏死的病因和发生机制尚未完全阐明,且缺乏有效的治疗方法。随着干细胞治疗技术在各大学科的应用,许多学者开始研究干细胞的性质和功能,并应用于激素性股骨头坏死的治疗中。单纯的干细胞移植效果不佳,但对干细胞进行移植前修饰可以提高其疗效。该文就骨髓间充质干细胞治疗激素性股骨头坏死的研究进展进行综述。

自体骨髓间充质干细胞体外扩增后移植治疗糖尿病足

背景:国外动物实验表明体外扩增自体骨髓间充质干细胞移植治疗糖尿病足效果较好。目的:观察自体骨髓间充质干细胞体外扩增后患肢移植的效果和安全性。设计:随机对照临床观察。对象:解放军第三军医大学西南医院2006-10/2008-10住院确诊的糖尿病足患者40例,男22例,女18例,年龄(64.3±12.7)岁,按wagner分级2级8例,3级18例,4级14例。按查表法随机分为细胞移植组22例,常规治疗组18例,实验经医院伦理委员会讨论批准。方法:常规治疗组给予常规降糖、降压、调脂、抗感染、抗凝、营养神经、扩张血管等药物治疗,局部常规换药,有坏疽者行截趾治疗;细胞移植组在常规治疗的基础上,按密度梯度离心和贴壁法分离制备骨髓间充质干细胞悬液,经流式细胞仪鉴定、染色体检测、细胞悬液皮试后,予肌肉注射法行扩增后自体骨髓间充质干细胞移植。主要观察指标:细胞移植后1个月两组患者治疗效果的比较,鉴定可能不良事件和副反应。结果:移植后1个月,细胞移植组患者肢体疼痛、冷感、间歇性跛行均有所改善,踝肱指数明显升高,双下肢血管显像血流灌注有所增加,与常规治疗组比较差异均有显著性意义(P<0.01)。移植后3个月随访患者均无异常症状体征出现,血、尿、便常规检测正常,心电图和肝肾功能无特殊改变,出凝血时间正常。结论:体外扩增自体骨髓间充质干细胞移植患肢治疗糖尿病足简便、有效、安全。

miR-31促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移

背景:骨髓间充质干细胞已被广泛应用于临床治疗神经退行性相关疾病,但由于细胞在受损伤部位的存活率和迁移率低,从而降低了其疗效。目的:探讨miR-31是否能提高骨髓间充质干细胞的迁移和增殖能力。方法:培养和鉴定C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,将细胞分为对照组、miR-31 agomir组和miR-31 antagomir组。将第3代骨髓间充质干细胞接种于6孔板(1×105/孔),待细胞达到50%-80%融合度,将miR-31 agomir和miR-31 antagomir用不含血清的DMEM/F12培养基稀释后添加到6孔板,转染24 h后,用CCK-8分析细胞的增殖水平以及Transwell实验分析细胞的迁移能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4的蛋白表达。结果与结论:①在不加转染试剂的情况下将miR-31成功转染至骨髓间充质干细胞,并发出红色荧光;②转染后,与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的增殖能力增强,与时间呈正比(P<0.05);与对照组相比,miR-31 agomir组细胞的迁移能力增强(P<0.05),基质金属蛋白酶2和CXC趋化因子受体4蛋白表达上调(P<0.05);③结果表明,miR-31可以提高骨髓间充质干细胞的增殖能力,并且促进骨髓间充质干细胞的迁移,这为间充质干细胞高效靶向迁移至损伤部位奠定了基础。

养血固肾汤通过刺激骨髓间质干细胞对破骨细胞形成的调控及对IGF1R-PI3K-AKT信号通路的作用

目的分析养血固肾汤通过刺激骨髓间质干细胞(BMSCs)对破骨细胞形成的调控及对胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)信号通路的作用。方法选取SPF级健康雌性SD大鼠30只,破骨细胞动物SPF级健康雌性SD大鼠(鼠龄15~20 d)。30只SD大鼠随机选取10只分为假手术组,另外20只建立骨质疏松模型,成功18只,随机分为模型组和养血固肾汤组各9只。养血固肾汤组给予8.3 ml养血固肾汤煎液(1 ml/100 g)灌胃,假手术组、模型组均给予1 ml/100 g纯净水灌胃干预。BMSCs培养后建立BMSCs与破骨细胞共同培养,分为假手术+OC组、模型+OC组、养血固肾汤+OC组。观察破骨细胞形态,检测IGF1R-PI3K-AKT信号通路相关蛋白。结果养血固肾汤+OC组破骨细胞数量高于假手术+OC组,明显低于模型+OC组(P<0.05)。与假手术+OC组相比,模型+OC组IGF1R、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶(Caspase)3蛋白表达明显升高,PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达明显降低;养血固肾汤+OC组IGF1R、Bax、Caspase3蛋白表达明显降低,PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05)。养血固肾汤+OC组IGF1R、Bax、Caspase3蛋白表达明显低于模型+OC组,PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达明显高于模型+OC组(P<0.05)。结论养血固肾汤通过刺激调控BMSCs细胞,激活IGF1R-PI3K-AKT信号通路抑制破骨细胞分化形成。

自体骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤疗效观察

目的:观察自体骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤患者的近期疗效及其安全性。方法:选择2005-04/2006-02在山东省残疾人康复中心住院的脊髓损伤患者24例,采用随机表法分为治疗组和对照组。患者知情同意并签署知情同意书。治疗组11例,对照组13例,均经CT或MRI确诊并行手术治疗。两组在年龄、病程、损伤程度(ASIA分级)等方面均具有可比性(P>0.05)。治疗组在综合康复治疗的基础上给予自体骨髓间充质干细胞治疗,经髂骨穿刺采集自体骨髓156～180mL,分离提取骨髓间充质干细胞后经静脉途径和/或蛛网膜下腔1次性或分次注射。对照组仅给予综合康复治疗。两组均于入院当天、治疗后7,15,30,60,90d进行运动与感觉、日常生活能力、膀胱功能评定。结果:24例患者均进入结果分析。①治疗组11例患者均有不同程度的感觉、运动和自主神经功能改善,与对照组比较,差异不显著。②治疗组ASIA分级A级8例,有2例在第60天、1例在第90天评估中恢复为B级。C级1例,在第30天评估中恢复为D级,第90天评估中恢复为E级,能独立行走,生活完全自理。D级2例,其中1例在第90天评估中恢复为E级。对照组A级9例,1例在第90天评估中恢复为B级。B级1例,治疗后无变化。C级2例,1例在第90天评估中恢复为D级。③骨髓间充质干细胞移植常见的不良反应包括低热(7/11例)、头痛(2/11例)、腹胀(1/11例),其中1例于蛛网膜下腔注射后出现双下肢麻木和脑膜刺激征,均于两三天内自行消失。结论:骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤近期有一定疗效而且安全,但远期疗效有待于进一步观察。

自体骨膜复合骨髓间充质干细胞移植修复兔关节软骨缺损

背景:自体骨髓间充质干细胞及骨膜移植等方法可促进关节软骨缺损的修复,但其各自的成软骨能力有限,治疗效果欠佳。目的:观察自体骨膜复合向软骨细胞诱导的骨髓间充质干细胞移植修复软骨缺损的疗效。设计、时间及地点:随机分组对照动物实验,于2005-08/2007-03在山西医科大学第二医院骨科实验室完成。材料:6～8月龄新西兰白兔18只,按随机数字表法分为3组,即骨膜复合骨髓间充质干细胞组、单纯骨膜组及空白对照组,每组6只12个膝关节标本。方法:骨膜复合骨髓间充质干细胞组采用胰酶消化法采集骨髓间充质干细胞进行贴壁培养,加入转化生长因子β1向软骨细胞进行诱导分化,同时进行PKH-26细胞膜免疫荧光标记。在全部兔双侧股骨内侧髁造成直径3mm,深度3mm的全层软骨缺损,骨膜复合骨髓间充质干细胞组、单纯骨膜组取同侧胫骨上段内侧骨膜,骨膜生发层朝向骨髓腔覆盖软骨缺损,骨膜复合骨髓间充质干细胞组先期缝合3针,向缺损区注入1×109L-1骨髓间充质干细胞细胞悬液20μL,植入细胞后缝合最后1针。单纯骨膜组只进行单纯骨膜覆盖缺损处理;空白对照组只钻孔不作任何处理。主要观察指标:术后6,12周时,对缺损部位进行大体观察、组织学观察、Wakitani评分以及Ⅱ型胶原免疫组化及原位杂交检测。结果:所有缝合骨膜未发现脱落,骨膜复合骨髓间充质干细胞组6周时,软骨缺损已由透明软骨样修复组织填充,12周时修复组织进一步改建,且修复组织中细胞主要为带有PKH-26荧光标记的植入细胞。单纯骨膜组缺损区修复组织为乳白色,表面光滑稍微凹陷,与周围正常软骨组织之间界限清晰;空白对照组缺损区多数比较凹陷,或缺损部位形状不规则,周围软骨组织断裂。术后6,12周时,骨膜复合骨髓间充质干细胞组Wakitani组织学评分均优于单纯骨膜组和空白对照组(P<0.05),单纯骨膜组的评分优于空白对照组(P<0.05)。同时,骨膜复合骨髓间充质干细胞组修复组织内细胞周围基质Ⅱ型胶原免疫组化及原位杂交染色阳性,证实修复组织内的细胞为植入细胞。结论:自体骨膜复合向软骨细胞诱导的骨髓间充质干细胞移植可形成透明软骨样修复组织修复关节软骨缺损。

自体骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白促进拔牙窝骨愈合（英文）

背景:牙槽骨骨量不足将不能满足种植修复的审美和功能重建的要求。目的:观察自体第3代骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白修复新西兰兔拔牙创窝骨缺损的效果。方法:将27只新西兰兔随机等分为模型组、富血小板纤维蛋白组和骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组,均拔除下颌左侧中切牙。骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组牙槽窝内植入自体骨髓间充质干细胞与富血小板纤维蛋白的复合物,富血小板纤维蛋白组牙槽窝植入富血小板纤维蛋白,模型组牙槽窝不植入任何材料。结果与结论:1模型组兔牙槽嵴及黏膜明显凹陷,宽度变窄;而富血小板纤维蛋白组和骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组兔牙槽骨骨壁厚度、牙槽骨宽度、高度差值、骨密度增加,且骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组牙槽骨骨壁厚度、牙槽骨宽度、高度差值、骨密度大于富血小板纤维蛋白组;骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组骨小梁排列情况优于富血小板纤维蛋白组和模型组。2结果说明骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白填充在拔牙窝内能够起到促进拔牙窝骨质生长,达到促进牙槽骨生长与修复的目的。

经冠脉移植自体骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的实验研究

目的 观察骨髓间充质干细胞 (MSC)植入急性心肌梗死 (AMI)区的转归及治疗作用。方法 通过冠脉转运的方法将幼猪自体骨髓MSC移植至AMI区 ,8周后观察MSC的分化、促血管生长情况 ,用核素门控心肌灌注显像观察心肌灌注的改善及心脏功能变化。结果 移植的细胞表达β肌球蛋白重链 (β MHC)和连接蛋白Connexin4 3,8周后 ,治疗组心肌灌注显像明显改善 ,毛细血管密度、左室射血分数均明显高于对照组 (P <0 0 0 1)。结论 骨髓MSC经冠脉转运在心肌微环境下可向心肌细胞分化 。