哮喘病寒饮蕴肺证病证结合大鼠病理模型的建立与思考

目的:探索大鼠哮喘寒饮蕴肺证病证结合动物模型的制作,评价造模效果。方法:将39只大鼠随机分为3组:空白对照组给予常规饲养,模型组、小青龙汤组给予支气管哮喘与寒饮蕴肺证大鼠模型联合造模。结果:模型组、小青龙汤组大鼠在体征与行为学症状上不同程度上出现了病理改变,吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)均增大,肺顺应性(Cdyn)降低,模型组大鼠肺组织支气管黏膜上皮细胞可见严重肿胀、增生,小青龙汤组也出现一定程度病变,但是较模型组相比有着较好的治疗效果。结论:本实验所建立的支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠模型,其大鼠的一般行为学表现与临床中病人所表现的症状和体征基本一致,微观指标如大鼠肺的功能、肺组织形态学等病理改变,也基本符合支气管哮喘寒饮蕴肺证的病证表现,从而在宏观及微观两层面证明了实验模型的可靠性。

寒饮蕴肺证家兔病理模型的建立及评价

目的 :复制寒饮蕴肺证家兔病理模型 ,并进行可靠性评价。方法 :应用烟熏、寒冷刺激以及控气、生理盐水输液等手段 ,复制寒饮蕴肺证家兔病理模型 ,结合一般体征的观察、动脉血气分析、肺组织ITNFαmRNA表达量测定、肺组织病理观察 ,进行该模型的可靠性评价。结果 :该模型的致病因素、病理改变、临床特征及对证方药干预方面均与临床典型的寒饮蕴肺证相似。结论 :该模型是一种比较理想的研究寒饮蕴肺证内在机制的动物模型。

小青龙汤对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠1,25二羟基维生素D_3水平的影响

目的:探讨小青龙汤对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠的可能作用机制。方法:将52只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、1,25(OH)_2D_3组和小青龙汤组,每组13只。除空白对照组外,其余各组均进行支气管哮喘寒饮蕴肺证模型造模。各组大鼠从第2天起灌胃,每次1.6 m L/100 g,1次/d,持续至第22天实验结束。空白对照组给予生理盐水灌胃,1,25(OH)_2D_3组腹腔注射1,25(OH)_2D_3混合液5×103U/100g,小青龙汤组给予小青龙汤煎剂灌胃。观察大鼠一般行为学及体征变化,检测大鼠血清IL-5和1,25(OH)_2D_3的含量。结果:通过综合评价发现小青龙汤和1,25(OH)_2D_3对大鼠支气管哮喘寒饮蕴肺证的症状和体征改善均发挥一定作用,小青龙汤组最明显,1,25(OH)_2D_3次之;与模型组比较,小青龙汤组IL-5含量有非常显著差异(P<0.01),1,25(OH)_2D_3组IL-5含量有显著差异(P<0.05),以小青龙汤组最显著;模型组与空白对照组大鼠1,25(OH)_2D_3的含量对比有显著性差异(P<0.05),小青龙汤组大鼠1,25(OH)_2D_3的含量与模型组对比有显著性差异(P<0.05),提示小青龙汤能提升大鼠体内1,25(OH)_2D_3的含量。结论:小青龙汤能有效提升支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠体内1,25二羟基维生素D3水平,从而提高多种免疫细胞的活性,增强机体免疫力,抑制支气管哮喘的炎症反应、改善哮喘气道重塑。这可能是其治疗哮喘的作用机制之一。

温阳化饮方对支气管哮喘病寒饮蕴肺证大鼠模型肺组织β-ARmRNA表达的影响

目的:探讨温阳化饮方对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠模型的干预机制。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型1d组(B组)、模型3d组(C组)、模型7d组(D组)、沙丁胺醇组(E组)、温阳化饮方组(F组),每组10只。采用动物造模、随机对照的方法,观察大鼠一般体征、体重、肛温、血气分析、肺组织β-ARmRNA表达的变化。结果:B、C、D、E、F组大鼠体重、肛温均低于A组(P<0.05),F组的体重高于D组、E组(P<0.05),F组的肛温均高于B、C、D、E组(P<0.05)。在血气分析方面,D组与A组比较,氧分压(PaO2)、血氧饱和度(SaO2)、血氧含量(tO2)降低而二氧化碳分压(PaCO2)升高(P<0.05或P<0.01);F组、E组与A组比较,PaCO2升高(P<0.05);E组与D组比较,tO2升高(P<0.05);F组与D组比较,SaO2、tO2升高(P<0.05);D组与A组相比,血液pH值、实际碳酸盐(AB)、标准碳酸盐(SB)以及标准碱剩余(SBE)均明显降低(P<0.05或P<0.01);F组、E组与B、C、D组比较,pH、SB、AB、SBE均升高(P<0.01或P<0.05)。在β-ARmRNA表达方面,B、C、D、E、F组低于A组(P<0.05或P<0.01),F组高于D、E组(P<0.01)。结论:温阳化饮方对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠模型的干预机制,可能在于其能提高体温,增加体重,上调β-ARmRNA表达,从而促进β-AR功能重建,上调β-AR,改善肺通气,减轻组织缺氧和二氧化碳潴留,保护肺组织而减少损伤。

慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠模型病理机制的初步研究

目的:从细胞分子水平观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)寒饮蕴肺证发展、变化的动态病理机制,以及温阳化饮方对COPD寒饮蕴肺证的干预作用、动态变化及时效性。方法:采用随机对照、动物造模的方法。结果:慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠模型体重减轻,吸气阻力和呼气阻力升高、肺顺应性下降,但血清IL-8浓度和血清IL-10浓度与正常组相比无显著性变化(P>0.05),MMP-9、TIMP-1表达水平及MMP-9/TIMP-1比值升高,病理切片显示肺组织出现炎性损伤和肺纤维化改变。在撤除造模因素后30天内,模型大鼠的一般情况及各项指标没有明显好转,且在20天以后出现急速恶化。用温阳化饮方干预的大鼠症状好转,肺功能改善,血清IL-8和血清IL-10浓度与COPD寒饮蕴肺证模型大鼠相比无显著性变化,MMP-9、TIMP-1表达水平及MMP-9/TIMP-1比值下降,病理切片示炎性损伤明显减轻;初期即见疗效,中期一度治疗进展缓慢,后期疗效显著。结论:MMP-9的增多引起了TIMP-1反馈性升高与MMP-9/TIMP-1失衡,尤其是此比值的过度升高,可能是COPD寒饮蕴肺证发生的重要机制。该病证在病变形成以后呈渐进性发展,温阳化饮方在改善模型大鼠的一般情况、肺功能和抑制气道炎症反应方面有比较肯定的疗效;早期治疗和长期坚持治疗有着积极的意义。

论肺失宣降是寒饮蕴肺证形成的基本病机

肺气的宣发和肃降,体现在肺的各个主要生理功能中,肺气宣发肃降是对肺生理功能的高度概括,亦是肺的最基本的生理功能。肺失宣降是肺的功能活动失常的基本病机。肺主行水功能,是靠肺气的宣发与肃降对体内水液的输布、运行和排泄起疏通和调节作用。寒饮蕴肺证是由于各种外感或内伤等原因导致肺阳亏虚,推动、输布、温化水液失司,肺主行水功能失调,水液停聚为饮,伏于肺中而致。肺阳虚,阳虚阴盛,肺阴肺阳失调,从而表现为肺气宣发肃降运动失常。

慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠模型评价

目的对已建立的慢性阻塞性肺疾病(COPD)寒饮蕴肺证大鼠模型的可信性作出评价。方法建立大鼠COPD模型与COPD寒饮蕴肺证模型,观察各给药组动物一般情况,肺功能测定、血清中白细胞介素-8(IL-8)与白细胞介素-10(IL-10)及病理组织的变化。结果COPD寒饮蕴肺证大鼠模型的一般情况与寒饮蕴肺证的临床表现相符,各项指标的变化(除IL-8和IL-10外)也与COPD的指标变化相一致:大鼠体重减轻,吸气阻力和呼气阻力升高、肺顺应性下降,但IL-8升高和IL-10浓度与正常组相比无显著性变化(P>0.05),病理切片显示肺组织出现炎性损伤。在撤除造模因素4w后,模型大鼠的一般情况及各项指标没有明显好转。用温阳化饮方和布地奈德干预的模型大鼠症状好转,肺功能改善,IL-8和IL-10浓度与模型大鼠相比无显著性变化(P>0.05),病理切片示炎性损伤明显减轻。结论用本实验方法建立COPD寒饮蕴肺证大鼠模型是可行的。

COPD寒饮蕴肺证大鼠病证结合模型的建立

目的:建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)寒饮蕴肺证大鼠模型,初步探讨该病证的发病机制。方法:采用随机对照、动物造模的方法。结果:一般体征的观察,肺功能、肺组织病理观察以及血清中TNF-α、IL-8测定,显示该模型的病理改变、活动体征、对证方药干预方面均与临床典型的COPD寒饮蕴肺证类似。结论:COPD寒饮蕴肺证大鼠模型是一种研究该证发病机制的较理想的动物模型,温阳化饮方对于该病证有较好的干预效果。

哮喘病寒饮蕴肺证大鼠病理模型的建立与评价

采用卵蛋白致敏,结合形寒饮冷与劳倦刺激相结合的方法,建立哮喘病寒饮蕴肺证病证结合的大鼠病理模型。结果:模型组大鼠的体重减轻、体温下降;症状与临床患者症状基本一致;肺泡灌洗液(BALF)中IL-4含量增高、IFN-γ含量降低、WBC计数升高、EOS百分比增多;血清中IFN-γ的含量降低。结论:与以往模型相比,该模型的中、西医两种造模手段,更符合人的发病条件;其出现的症状,更符合该病证的临床表现;微观指标的检测结果,也从深层次上证明了该模型的可靠性。说明该大鼠病理模型是一种比较成功的研究哮喘病寒饮蕴肺证深层机制的病证结合的动物模型。

温阳化饮方对寒饮蕴肺证家兔肺通气作用的机理研究

为研究肺阳化饮改善肺通气的机制 ,将家兔随机分为对照 (A)组、造模 (B)组、治疗 (C)组。B组与C组采用控制通气量、生理盐水输液和置于寒冷环境的方法 ,建立寒饮蕴肺证的家兔病理模型 ,C组以温阳化饮方 (小青龙汤加人参、黄芪 )模拟治疗 ,测定和分析相关指标如呼吸、心率、血压、尿量、动脉血气变化、血浆皮质醇、醛固酮含量变化、肺组织形态学改变等。结果 :C组与B组比较 ,颈动脉血PaCO2 减低 (P <0 .0 0 1) ,PaO2 、pH值、SBE升高 (P <0 .0 5 ) ,血浆皮质醇升高 (P <0 .0 5 ) ,醛固酮降低 (P <0 .0 5 )。结论 :温阳化饮方有使支气管扩张 ,抗炎利尿以改善肺通气的作用 。

寒饮蕴肺证大鼠模型建立方法探索

【目的】比较寒饮蕴肺证大鼠模型3种不同造模方式的差异,探求更简便易行且可靠的造模方法。【方法】将20只大鼠随机分为正常对照组、脂多糖组、烟熏组和冷水浴组,每组5只。除正常对照组外,其余3组采用不同方法建立模型[对目前常用的寒饮蕴肺证大鼠模型的造模方法 (气管滴注脂多糖、烟熏、冷水浴、冰水灌胃)加以组合]。其中脂多糖组予气管滴注脂多糖、烟熏、冷水浴,烟熏组给予烟熏、冷水浴,冷水浴组给予冷水浴、冰水灌胃;各组造模时间均为15 d。实验结束后,观察记录各组大鼠一般情况、体质量、痰液分泌量及肺组织病理检查。【结果】1各造模组较正常对照组大鼠活动减少,体温降低,气促,唇鼻青紫并有分泌物,喷嚏(咳嗽)现象明显。2与正常对照组比较,各造模组大鼠体质量均显著下降(P<0.01),排痰量均显著增多(P<0.05);脂多糖组、烟熏组和冷水浴组体质量及排痰量值虽依次降低,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组肺组织病理检查结果显示:脂多糖组肺损伤程度最重,烟熏组次之,冷水浴组炎症较轻微。【结论】脂多糖组、烟熏组和冷水浴组的造模方法均可成功复制出寒饮蕴肺证大鼠模型;综合多方面因素,以烟熏组造模方法可行性与可靠性更高。

单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠LN、HA影响的实验研究

目的:观察单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠层粘连蛋白(LN)及透明质酸(HA)含量的影响。方法:将40只SPF级Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、辽细辛组、单叶细辛组,后3组用中医理论复制寒饮射肺动物模型,各组分别灌胃给予相应中药水提取液及生理盐水,连续28天。检测比较大鼠血清、肺泡灌洗液LN和HA的含量。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清、肺泡灌洗液LN和HA含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),说明造模成功;与模型组比较,两细辛组LN和HA含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),两细辛组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单叶细辛可显著改善寒饮射肺模型大鼠LN和HA的含量,对寒饮射肺证有一定治疗作用,且药物作用与辽细辛相近。

生姜对COPD寒饮蕴肺证大鼠的干预作用研究

目的:观察生姜水煎液对COPD寒饮蕴肺证大鼠的干预作用,并初步探讨其作用机制。方法:烟熏结合气管滴注脂多糖(LPS),饮用冰水加寒冷刺激的方法建立COPD寒饮蕴肺证病证结合大鼠模型,使用生姜水煎液进行干预,通过观察大鼠一般形态,HE染色观察肺组织病理学改变,小动物呼吸机Anires2005检测肺功能,ELISA法检测血液中炎性因子IL-13、IL-10、IL-8、TNF-α以及肺组织中水通道蛋白AQP1、黏蛋白Muc5ac的表达,初步探讨生姜水煎液对此病证的作用机制。结果:与模型组比较,生姜水煎液各给药组均可改善大鼠的一般形态和呼吸功能。并可显著降低大鼠血清中IL-13、IL-10、IL-8、TNF-α的表达;改善肺组织的病理形态,并显著增加肺组织中AQP1的表达、降低Muc5ac的表达。以生姜水煎液高剂量组效果最佳。结论:生姜水煎液可改善COPD寒饮蕴肺证大鼠的一般形态和呼吸功能,其作用机制与降低炎性反应、增加肺组织AQP1蛋白的表达和降低Muc5ac蛋白的表达有关。

基于ERK1/2和p38 MAPK信号通路探讨温阳化饮方对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠的作用机制

目的探讨温阳化饮方对支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠的作用以及对ERK1/2和p38 MAPK信号通路的调节作用。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组、实验组(n=15);先以卵蛋白(OVA)致敏刺激和雾化进行造模形成支气管哮喘模型大鼠,后以冰水喂养给以“饮冷”刺激,冰箱冷冻给以“形寒”刺激进行寒饮蕴肺证造模。实验组和对照组大鼠以剂量为30 mg/kg的温阳化饮方和雷帕霉素溶液(以医用生理盐水进行溶解)进行灌胃给药,正常组和模型组以等剂量的医用生理盐水灌胃,连续灌胃22 d。小微动物肺功能分析仪测定大鼠的肺功能;TUNEL检测肺组织中的细胞凋亡;ELISA法检测血清中细胞因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Western blot检测肺组织中p-ERK1/2、p-p38 MAPK、凋亡相关蛋白Bax、Bcl2的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠吸气时的气道阻力(Rinsp)和呼气时的气道阻力(Rexp),血清中IL-6和TNF-α的含量,细胞凋亡率,p-ERK1/2、p-p38 MAPK、Bax的表达出现明显升高,肺胸通气时的动态顺应性(Cdyn)、Bcl-2的表达出现明显下降(均P<0.05),与模型组相比,对照组和实验组大鼠Rinsp和Rexp、血清中IL-6和TNF-α的含量,细胞凋亡率,p-ERK1/2、p-p38 MAPK、Bax的表达出现明显下降,Cdyn、Bcl-2出现明显升高(均P<0.05)。结论在支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠模型中,温阳化饮方能明显抑制炎性因子的释放,降低肺组织的细胞凋亡,这可能与抑制ERK1/2和p38MAPK信号有关。

温肺定喘膏辅助治疗儿童支气管哮喘寒饮停肺证96例临床研究

[目的]评价温肺定喘膏辅助治疗儿童支气管哮喘寒饮停肺证的有效性和安全性。[方法]将96例患者按随机、安慰剂平行对照、双盲加载试验的方法分为试验组和对照组,在氨茶碱基础治疗的基础上,分别给予温肺定喘膏和安慰剂,治疗前后记录临床症状、体征、最大呼气流速(PEFR)、嗜酸粒细胞等情况。[结果]试验组疾病疗效与中医证候疗效均优于对照组,且试验组对证候计分和、主症计分和以及喘息、哮鸣、恶寒怕冷单项症状均有明显改善作用,与对照组比较有显著性差异。试验组1例药物周围黏膜处皮肤红痒,考虑系黏膜基质过敏所致,实验室检查未发现有临床意义的改变。[结论]温肺定喘膏对儿童支气管哮喘寒饮停肺证具有辅助治疗作用,安全性好,具有临床使用价值。

寒凉因素在慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠模型形成中的作用

目的:研究寒凉因素在慢性阻塞性肺疾病(COPD)寒饮蕴肺证形成过程中的作用。方法:40只Wistar大鼠随机分为对照组(A组)、COPD寒饮蕴肺证冷冻组(B组)、COPD寒饮蕴肺证冰水组(C组)、COPD寒饮蕴肺冷冻加冰水组(D组)。在冬季寒冷环境中冷冻大鼠,给大鼠饮冰水,配以熏烟、气管滴注脂多糖的方法,建立COPD寒饮蕴肺证大鼠模型。观察大鼠的一般情况、肺组织病理学改变,检测肺功能有关指标和血清IL-8、IL-10。结果:慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠模型的一般情况与临床表现相符,大鼠体质量减轻,吸气阻力和呼气阻力升高,肺顺应性下降,病理切片显示肺组织出现炎性损伤,并且D组的病理改变程度最重。结论:内外合邪之寒凉因素对建立慢性阻塞性肺疾病寒饮蕴肺证大鼠模型效果更好。

单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠氧自由基代谢及肺组织病理变化的实验研究

目的:观察单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠肺组织和血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平及肺组织病理变化的影响。方法:Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、辽细辛组、单叶细辛组,后3组采用中医理论制作大鼠寒饮射肺模型,各组分别灌胃给予中药水提取液及生理盐水,1次/天,第7、14、28天各组分别随机选取5只大鼠,处死,取肺组织行HE染色,检测肺部炎症程度;其余大鼠连续灌胃28天,检测比较肺组织、血清SOD、MDA、NO含量。结果:与对照组比较,模型组大鼠肺部出现明显的炎症改变,肺组织、血清SOD、NO含量均降低,MDA含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,给药组肺部炎症程度较模型组明显减轻,肺组织、血清SOD、NO含量均显著升高,MDA含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);两治疗组大鼠各项指标比较差异无统计学意义(P<0.05)。结论:单叶细辛调节SOD、MDA、NO的表达,提高抗氧化能力,减轻寒饮射肺模型大鼠肺部炎症,对肺组织具有保护作用。

单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠IL-8及CRP表达水平的实验研究

目的:利用单叶细辛水提取液对寒饮射肺模型大鼠进行干预,检测白介素-8(IL-8)、C-反应蛋白(CRP)、炎症细胞变化,初步探讨其炎症发生机制。方法:40只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、辽细辛组、单叶细辛组4组,每组10只,后3组用中医理论复制寒饮射肺动物模型,造模成功后第2天分别灌胃给予生理盐水及相应药物,对照组、模型组给予生理盐水灌服,给药组给予中药水提取液治疗,1次/天,28天。检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液白细胞总数和中性粒细胞比率,血清、肺组织匀浆IL-8、CRP的水平。结果:模型组大鼠肺部出现明显的炎症改变,两给药组也出现炎性细胞浸润,但程度较模型组轻;模型组炎症细胞总数增加,肺组织匀浆、血清IL-8、CRP显著升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);两给药组大鼠炎症细胞总数,肺组织匀浆、血清IL-8、CRP均明显较模型组降低,差异有显著性(P<0.05)。结论:单叶细辛水提取液可降低寒饮射肺模型大鼠肺组织、血清IL-8、CRP,对肺组织炎症有抑制作用,对寒饮射肺证有一定的治疗作用。

中药外敷治疗儿童支气管哮喘寒饮停肺证88例的临床观察

目的观察湖南长沙福沁堂中药技术开发有限公司研制的(治喘贴)中药穴位外敷治疗小儿哮喘急性发作期的疗效。方法将88例哮喘专科门诊就诊的儿童支气管哮喘患者,采用随机、平行对照、单盲加载方法进行分组,其中观察组(X组)66例,对照组(Y组)22例。观察组采用中药“治喘贴”穴位外敷,1次/d,每次4-6h,分别贴于双侧肺俞、膏盲、定喘。“治喘贴”主要药物为麻黄、细辛、白芥子、矮地茶等。对照组采用安慰贴外敷。两组同时服用氨茶碱,每次4mg/kg,3次/d,连续治疗4d。结果试验组疾病控显率为92.31%,两组疾病疗效比较差异有显著性意义。试验组中医证候控显率为80%,两组中医证候疗效比较,差异有显著性意义。两组各中医证候指标治疗前后自身比较,全部症状均有显著性意义差异,两组患者PEFR治疗前后差值、疗后增加量比较,差异均有显著性意义。结论中药“治喘贴”外敷穴位治疗儿童支气管哮喘寒饮停肺证具有较好的辅助治疗作用。