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碱性磷酸酶标记寡核甘酸探针检测致病性大肠杆菌成束菌毛基因
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作者 毕振强 本田武司 《中国卫生检验杂志》 CAS 1997年第6期323-325,共3页
An alkaline phosphatase-conjugated 27 - basc oligonucleotide probe was developed to detect the gene, bfPA, encoding the bundle-- forming pilus of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC). The probe was proven to be hi... An alkaline phosphatase-conjugated 27 - basc oligonucleotide probe was developed to detect the gene, bfPA, encoding the bundle-- forming pilus of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC). The probe was proven to be highly specific to EPEC, hybridizing only toEPEC strains, but not to Salmonella spp. Shigella spp., Vibrio spp., and other E. coli isolates. one hundred seventy eight E. colistrains belonging to traditional EPEC sergroups isolated from patients with diarrhoea were tested the probe, the prevalence rate of bfpAgene was 25. 28%. The frequency of the bfpA gene in relation to serogroups varied widely among EPEc The bfPA gene was morecommonly detected in strains of class l serogroups of EPEC(41.0% ) than in class I serogroups of EPEC(11.6% 6 % ). HEP- 2 cell adhesion assay and the fluorescent actin staining (FAS) test are 100% argreement, with all the localized adherence (LA) positive strainsproucing positive FAS activity. The results of bfpA probe hybridization were of 98.9% agreement with those obtained by using HEP- 2 cell adhesion assay and the FAS test. the sensitivity and specifity of the probe versus the FAS test and the HEP- 2 cell assay were95.7% and 100%, respectively. This probe was proven to be useful in identifying EPEC which carries the bfpA gene. 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 成束菌毛 寡核甘酸探针
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单克隆抗体法、PCR-SSP法及PCR-SSOP法在HLA-DR分型中的比较
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作者 毕熲 廖灿 +2 位作者 陈连周 傅茜 陈规划 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2001年第1期31-32,共2页
关键词 单克隆抗体 顺序特异引物聚合酶链反应 序列特异性寡核甘酸探针杂交抗原 HLA-DR
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反相斑点杂交快速检测结核分枝杆菌rpoB基因突变 被引量:11
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作者 刘洋 王甦民 +6 位作者 郭艳玲 姜广路 刘宇红 付育红 毕志强 赵丽萍 李云絮 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期394-396,共3页
目的建立以聚合酶链反应(PCR)为基础的寡核甘酸探针反相斑点杂交方法快速检测对利福平耐药的结核菌相关的rpoB基因突变,并评价其临床应用价值。方法应用PCR反相斑点杂交方法对利福平耐药的62株结核菌和对其敏感的40株结核菌进行检测,所... 目的建立以聚合酶链反应(PCR)为基础的寡核甘酸探针反相斑点杂交方法快速检测对利福平耐药的结核菌相关的rpoB基因突变,并评价其临床应用价值。方法应用PCR反相斑点杂交方法对利福平耐药的62株结核菌和对其敏感的40株结核菌进行检测,所得结果与传统药敏试验结果以及102株结核菌的直接测序结果进行比较。结果62株对利福平耐药的菌株中,54株碱基突变被准确鉴定,灵敏度为87.1%(54/62),阳性预测值为100%;40株对利福平敏感的菌株均被准确鉴定,特异性为100%,阴性预测值为83.3%(40/48);准确度为92.2%(94/102)。与测序法结果符合率为99%。结论以PCR为基础的反相斑点杂交方法其敏感度和特异性均高,无假阳性结果,因此适用于大批量结核菌对利福平耐药性的初筛。 展开更多
关键词 RPOB基因突变 快速检测 分枝杆菌 反相斑点杂交 聚合酶链反应(PCR) 斑点杂交方法 利福平耐药 寡核甘酸探针 临床应用价值 阳性预测值 阴性预测值 假阳性结果 直接测序 试验结果 碱基突变 特异性 灵敏度 准确度
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