寡核苷酸骨架对CpG基元诱导人巨噬细胞释放细胞因子的影响

目的 探讨不同寡核苷酸骨架对GG 寡核苷酸CpGODNs导致小鼠死亡、诱导细胞因子释放能力的影响。方法 实验前 1h经腹腔注射 6 0 0mg/kgD 氨基半乳糖敏化小鼠 ,采用磷酸硫化CpG 寡核苷酸 (PsCpGODN)、Psnon CpGODN、磷酸二酯CpG 寡核苷酸 (PoCpGODN )和Ponon CpGODN腹腔注射小鼠 ,注射剂量为每只小鼠 10nmol ,观察 7d内小鼠死亡率的差异。体外培养THP 1细胞系 ,在THP 1细胞培养体系中加入上述制剂后 ,37℃、5 %CO2 孵箱中培养 2 0h后离心取上清 ,测定上清中TNF α、IL 6、IL 12的浓度。同时观察CpGODN刺激THP 1细胞 4h后TLR9的表达情况。结果 PsCpGODN可诱导小鼠的死亡以及细胞因子的大量释放 ,而其它三种制剂则无此能力 ;而且PsCpGODN诱导TNF α释放的能力随浓度的增加而增加 ;CpGODN导致的细胞TLR9的表达增加与细胞因子的释放密切相关。结论 磷酸硫代骨架的CpGODN具有导致动物死亡和诱导巨噬细胞大量释放细胞因子的作用 ,磷酸二酯骨架的CpGODN则无此能力。