不同发育时期小鼠胚泡表面Lewis寡糖抗原的表达

在胚泡表面表达的Lewis寡糖抗原 (LewisX ,LewisY)在胚胎发育以及着床过程中起重要作用 .应用免疫印迹和免疫荧光等方法对着床前小鼠胚泡表面的Lewis寡糖抗原进行分析 .结果发现 :小鼠胚泡LewisX寡糖蛋白有 2 7kD、2 9kD、6 8kD和 80kD 4种 ,LewisY寡糖蛋白有 70kD和 90kD 2种 ;2种寡糖抗原均在 8细胞时期开始表达 ,其中 ,LewisY寡糖抗原在胚泡表面的表达持续升高 ,直至胚泡着床 ;而LewisX寡糖抗原的表达则在桑椹期后逐渐降低 ,但仍在胚胎期的囊胚腔侧的顶端可见有部分表达 ;应用RT PCR的分析结果显示 ,LewisX合成的关键糖基转移酶FUT9基因在 4细胞及桑椹期高表达 ,到胚泡期虽然强度明显减弱 ,但仍有表达 ;而LewisY合成关键酶FUT1基因在 4细胞未见表达 ,在桑椹和胚泡阶段均有表达并逐渐升高 ,表达趋势与相应寡糖的表达趋势基本一致 .结果说明 。

人子宫内膜LewisY寡糖抗原的表达和调控

目的 :探讨雌、孕激素对月经周期中 Ley寡糖抗原表达的影响。方法 :取 32例子宫肌瘤术后患者的内膜 ,经病理检测 ,分为四组 :增生期、分泌期、分泌期服用米非司酮 ( Mifepristone)及增生期服用妇康片 (炔诺酮 ) ,每组 8例 ,每例均重复实验。应用免疫组化及 Westhern免疫印迹法 ,观察了Ley寡糖抗原的表达。结果 :( 1 )各组样品的 Ley寡糖抗原均分布于宫腔上皮细胞和腺腔上皮细胞表面 ;( 2 )每组样品中 Ley糖蛋白均有四种分子量 :68k D、60 k D、5 2 k D、2 7k D表达 ;( 3)两种分析方法结果均显示 :Ley糖蛋白在分泌期高表达 ,增生期低表达 ,两组间差异显著 ( P<0 .0 0 1 ) ;分泌期服用孕激素拮抗剂米非司酮则表达明显减少 ( P<0 .0 0 1 ) ;增生期服用妇康片 (主要含孕激素 )的表达较增生期明显增多 ( P<0 .0 0 1 ) ,其中以 68k D组分的变化最为显著。结论 :人子宫内膜 Ley寡糖抗原的表达受孕激素上调 ,其中以 68k

唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原检测在大肠癌原发灶及转移灶中的表达及其意义

目的 探讨唾液酸化的路易斯寡糖-X (sLex)抗原在大肠癌及大肠癌肝转移病人中表达的临床意义。方法 应用LSAB法检测原发性大肠癌及大肠癌肝转移灶中sLex抗原的表达。结果 在原发性大肠癌中，sLex抗原染色阳性率为100%，其中高分化腺癌sLex抗原表达呈弱阳性，低分化腺癌sLex抗原表达呈阳性或强阳性；在大肠癌肝转移灶中，sLex抗原染色阳性率为100%，肝转移灶中sLex抗原的表达强于原发灶中sLex抗原的表达。结论 sLex抗原的检测可作为大肠癌肝转移及预后指标，对判断大肠癌肝转移及估价预后有重要意义。

肝细胞癌唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原和E-上皮钙粘蛋白的表达及其意义

探讨唾液酸化的路易斯寡糖 X抗原 (sialylLewis X ,SLeX)和E 上皮钙粘蛋白 (E cadherin ,ED)表达与肝细胞癌(HCC)转移和预后的关系。应用免疫组织化学方法 ,检测分析 110例HCC组织中SLeX及ED蛋白表达 ,结合随访资料分析。结果显示 ,在HCC中 ,SLeX和ED阳性表达率分别为 39 1%和 4 4 5 %。SLeX阳性表达的HCC转移率高(P <0 0 5 )、分化程度和患者 >5年生存率低 (P <0 0 5 ) ;ED阳性表达的HCC转移率低 (P <0 0 5 )、分化程度和患者>5年生存率高 (P <0 0 5 )。SLeX表达与ED表达呈负相关 (r =- 0 5 3,P <0 0 0 1)。SLeX和ED表达与HCC转移和患者生存期密切相关 。

肝细胞癌中唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原和P16基因蛋白的表达及其意义

目的 :探讨唾液酸化的路易斯寡糖 X抗原 (sialylLewis X ,SLeX)和P16基因蛋白表达与肝细胞癌 (HCC)转移和预后的关系。方法 :应用免疫组织化学方法 ,检测分析 110例HCC组织中SLeX及P16蛋白表达 ,结合随访资料分析。结果 :在HCC中 ,SLeX和P16阳性表达率分别为 3 9.1%和 3 4.5 %。SLeX阳性表达的HCC转移率高 (P <0 .0 5 )、分化程度和患者 >5年生存率低 (P <0 .0 5 ) ;P16阳性表达的HCC转移率低 (P <0 .0 5 )、分化程度和患者 >5年生存率高 (P <0 .0 5 )。表达SLeX与P16表达呈负相关 (r =- 0 .5 6,P <0 .0 0 1)。结论 :SLeX和P16表达与HCC转移和患者生存期密切相关 。

胚泡表面Le^Y寡糖对小鼠胚泡纤维粘连蛋白、层粘连蛋白表达及分泌的影响

目的 体外观察 L e Y 寡糖对着床前小鼠胚泡细胞外基质 ( ECM)主要成分纤维粘连蛋白 ( FN)、层粘连蛋白 ( LN)的表达和分泌的影响。 方法 采用特异性单克隆抗体 AH6阻断胚泡表面 L e Y寡糖 ,运用半定量逆转录 -聚合酶链反应 ( RT-PCR)及免疫印迹法检测 L e Y寡糖对着床前小鼠胚泡 FN及 LN的表达和分泌的影响。 结果 在体外培养中 ,经 AH6封闭胚泡表面 L e Y 寡糖抗原后仅 1 .5h,胚泡 FN及 L N的分泌有明显升高 ( P<0 .0 1 ) ,并且持续 6 h以上 ,而胚泡 FN及 L N的基因转录表达变化不明显 ( P>0 .0 5)。 结论 胚泡表面的 L e Y寡糖抗原对着床前胚泡的 FN及 L

SLeX抗原和CD44v6基因与结直肠癌的关系研究

目的探讨唾液酸化的路易斯寡糖-X(SLeX)抗原和CD44v6基因表达与结直肠癌生物行为间的关系。方法采用高敏催化信号放大免疫组化技术,检测120例结直肠癌组织、30例正常大肠粘膜组织中SLeX抗原与CD44v6基因表达水平,并分析它们与结直肠癌生物行为和临床因素的相关性。结果 120例结直肠癌中SLeX抗原和CD44v6基因阳性表达率为89.2%和85.8%,30例正常组织中均为阴性,两组差异具有统计学意义(P<0.01);SLeX抗原和CD44v6基因表达呈显著正相关,结直肠癌患者的临床分期越晚、分化程度越低、有淋巴结及远处器官转移、患者的生存期越短的癌组织中SLeX抗原和CD44v6基因表达水平越高(P<0.05)。结论 SLeX抗原和CD44v6基因表达参与结直肠癌的侵袭与转移,是判定结直肠癌患者预后的重要生物学指标。

Sialyl Lewis-X抗原在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨大肠癌组织中唾液酸化的路易斯寡糖-X(Sialyl Lewis-X,SLeX)抗原表达及其临床意义。方法采用高敏感性的催化信号放大免疫组化技术,检测SLeX抗原在78例大肠癌、20例癌旁组织和20例正常大肠黏膜组织中的表达,分析其与大肠癌临床病理因素的关系。结果大肠癌中SLeX抗原阳性表达率为82.1%,癌旁组织中为35%,正常组织中为阴性,三者之间差异具有显著性(P<0.01);SLeX抗原表达与大肠癌的临床分期、分化程度、淋巴结及远处转移和预后有关(P<0.05)。结论SLeX抗原表达与大肠癌的侵袭、转移有关,并在大肠癌发生、发展中发挥重要作用,检测大肠癌中SLeX抗原表达可作为判定其预后的生物学指标。

在共培养体系中单克隆抗体AH_6对小鼠胚泡着床的影响

以单克隆抗体ＡＨ６［特异结合ＬｅＹ寡糖，Ｆｕｃα１２Ｇａｌβ１４（Ｆｕｃα１３）ＧｌｃＮＡｃ］以及其它３种与ＬｅＹ寡糖结构近似的寡糖特异结合的单克隆抗体αＬｅａ、αＬｅｂ和ＦＥＡ５为工具，采用小鼠体外着床模型，研究细胞表面ＬｅＹ寡糖抗原与着床的关系及其在着床过程中的具体作用环节。结果显示：不论子宫上皮细胞表面还是胚胎滋养层细胞表面的ＬｅＹ寡糖抗原被封闭后，都能导致胚胎在单层子宫上皮细胞表面粘附和扩展生长的延迟，但对胚胎最终的扩展程度并无影响，而其它３种单克隆抗体对胚胎的粘附则均无影响。说明这种作用具有明确的寡糖结构特异性。另外，运用免疫荧光方法观察到，胚胎在单层子宫上皮细胞表面的粘附与ＬｅＹ寡糖在细胞表面的消长密切相关。因而认为ＬｅＹ寡糖抗原在胚胎着床中可能是作为一种中介分子参与着床始发阶段的胚胎与母体间的识别和粘着。实验中经单克隆抗体处理后胚胎和单层子宫上皮细胞与对照组比较，其形态与发育未见不同。

RNA干扰敲减FucT Ⅶ表达抑制人结肠癌细胞HT-29和HUVECs的粘附能力

探讨利用RNA干扰(RNAi)技术抑制岩藻糖基转移酶Ⅶ(FucT Ⅶ)表达对人结肠癌细胞HT-29与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附能力的影响及其机制.本课题构建3对针对FucT Ⅶ基因的RNAi表达载体,并将其转染入人结肠癌细胞HT-29,Western印迹检测FucT Ⅶ及其下游产物sLeX蛋白的变化;实时PCR检测FucT Ⅶ mRNA表达的变化;玫瑰红染色法检测RNAi对HT-29与HUVECs细胞粘附能力的影响.结果显示,3对FucT Ⅶ siRNA表达载体均可有效抑制HT-29细胞FucT Ⅶ mRNA和蛋白表达,以pSilencer 2.0-FucT Ⅶ 2最为有效;与空白细胞组比较,转染pSilencer 2.0-FucT Ⅶ的HT-29细胞表面sLeX表达水平明显下降,以pSilencer2.0-FucT Ⅶ 2最为显著;RNA干扰FucT Ⅶ表达后HT-29细胞和HUVEC之间的粘附能力明显受到抑制.研究表明,RNAi靶向沉默HT-29细胞中FucT Ⅶ基因表达可显著降低其下游产物sLeX的合成,进而抑制HT-29细胞与HUVECs的粘附能力.

米非司酮紧急避孕机制的研究

目的:探讨米非司酮(Mifepristone,孕激素受体拮抗剂)对月经不同功能时期中Ley寡糖蛋白表达的影响。方法:取34例患子宫肌瘤志愿者手术后的内膜,经病理检测,分为4组:增生期(8例)、分泌期(8例)、分泌期服用米非司酮(8例)及增生期服用米非司酮(10例),每例均重复实验。应用Western免疫印迹法,观察Ley寡糖抗原的表达。结果:①每组样品中Ley寡糖蛋白均有4种分子量68kD、60kD、52kD、27kD表达;②分析结果显示:Ley寡糖在分泌期高表达,增生期表达低,两组间差异有显著性(P<0.001);③分泌期服用米非司酮的表达较分泌期明显减少(P<0.001),较增生期无明显变化(P>0.05);④增生期服用米非司酮的表达较增生期有所增多(P<0.001),仍较分泌期明显减少(P<0.001)。结论:在分泌期Ley寡糖蛋白的含量呈高表达,在月经不同功能时期服用米非司酮后,Ley寡糖蛋白表达均较分泌期明显减少。提示人子宫内膜Ley寡糖蛋白的表达可能与胚泡着床密切相关,并且米非司酮可能是通过减少Ley寡糖蛋白的表达而达到紧急避孕的目的。

革兰氏阴性细菌O抗原寡糖的研究

寡糖、多糖和糖缀合物的生物活性，结构特征以及人工合成已成为近年来的研究热点之一。对革兰氏阴性细菌Ｏ－多糖（抗原决定簇ＡｎｔｉｇｅｎｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ）和Ｏ－寡糖的研究在诊断学及预防学上都有重要意义，近年来的结构测定和合成研究有了很大发展。本文主要介绍沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌和沙雷氏菌Ｏ－抗原寡糖的研究状况。

胃癌中CD_(15)s抗原和CD44v6基因蛋白的表达及其意义

[目的 ]探讨唾液酸化的路易斯寡糖 X(CD15s)抗原和CD4 4v6基因蛋白表达与胃癌临床病理指标和患者预后的关系。 [方法 ]应用高敏感性的催化信号放大免疫组化技术 ,对早期胃癌 17例、中期胃癌 2 1例和晚期胃癌5 7例组织进行CD15s抗原和CD4 4v6蛋白检测 ,并结合肿瘤的病理学指标和临床随访资料进行分析。 [结果 ]在胃癌中 ,CD15s和CD4 4v6的表达阳性率分别为 86 .3%和 82 .1%。且晚期胃癌明显高于早、中期胃癌 (P <0 .0 5 )。CD15s和CD4 4v6表达水平具有一致性 ,均与胃癌浆膜浸润、淋巴结转移和患者预后呈正相关 (P <0 .0 5 )。 [结论 ]CD15s和CD4 4v6表达与胃癌转移和患者生存期密切相关 ,检测CD15s和CD4 4v6的表达可作为判断胃癌预后的参考指标。