胃癌相关寡糖蛋白纯化及对正常人NK和LAK细胞活性的影响

本文采用一种植物血凝素-PHA亲和层析法从胃癌组织中提取胃癌相关寡糖蛋白,SDS-PAGE示纯化后胃癌相关寡糖蛋白以分子量40-45KD的成份含量最高;ELISA结合抑制法检测59例胃癌患者及33例良性消化道疾病患者血清,发现胃癌患者血清中胃癌相关寡糖蛋白表达水平明显增高,阳性率达71.2％,探索其对细胞免疫功能影响时,显示胃癌相关寡糖蛋白对正常人NK细胞及LAK细胞活性呈现显著的抑制作用,在1.0μg/ml浓度下,抑制率分别为40.84±6.21％和35.47±4.21％,推测在胃癌患者血清中升高的胃癌相关寡糖蛋白可能是一种使机体细胞免疫功能受损的免疲抑制因子。

胃癌血清CK-M_2、寡糖蛋白测定的临床意义

本文采用琼脂糖电泳法测定血清磷酸肌酸激酶大分子同工酶－２（ＣｒｅａｔｉｎｅＫｉｎａｓｅｉｓｏｅｎｚｙｍｅ２，ＣＫ－Ｍ２）和酶免疫双抗体夹心法测定可溶性寡糖蛋白（ＯｌｉｇｏＭａｃｒｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅＰｒｏｔｅｉｎ，ＯＰ）含量。经５７例胃癌、５１例胃癌前期病变（慢性萎缩性胃炎１９例，慢性萎缩性胃炎伴肠化１７例，残胃炎１１例，不典型增生４例）和２８例正常献血员血清测定。结果表明正常人血清ＣＫ－Ｍ２均为阴性。胃癌检出阳性率为５６１％，在胃部疾患中特异性为９８６３％，ＯＰ在胃癌组明显高于其他两组（Ｐ＜００５）。但ＣＫ－Ｍ２、ＯＰ与胃癌细胞类型及分化程度无关。提示ＣＫ－Ｍ２可作为胃癌的辅助诊断指标，尤其在胃部疾患的鉴别诊断上具有一定的意义；ＯＰ可作为评估胃癌患者体内免疫活性的指标。

老年胃癌及胃良性疾病中胃癌相关寡糖蛋白血清检测的意义

采用ELISA结合抑制法观察了40例老年胃癌及231例胃良性疾病患者血清中胃癌相关寡糖蛋白(GAO)的表达情况,发现胃癌患者血清GAO阳性率高达77.5％,胃良性疾病的阳性率为11.26％,良性疾病阳性表达与病变的组织学类型密切相关,与CEA血清表达比较,胃癌阳性率明显升高(P<0.05),而假阳性率无明显差别,结合GAO基本特性提示其不失为临床有用的肿瘤标志物之一,老年胃病患者进行GAO监测可能有其特殊的临床意义。

6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对烟草病毒病的防治效果

[目的]明确6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对泸州烟区烟草病毒病的防治效果。[方法]在四川省泸州市叙永县麻城乡采用田间试验研究6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂1 000倍稀释液对烟草病毒病的防治效果。[结果]通过苗期喷施1次,大田期喷施2次6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂1 000倍稀释液,对烟草病毒病的防治效果达65.44%。[结论]6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂可用于防治泸州烟区烟草病毒病。

寡糖·链蛋白等5种药剂对辣椒病毒病的防治效果

济宁市农业科学研究院联合临沂、聊城、莱芜试验站进行了防治辣椒病毒病的药剂筛选试验。结果表明,6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂、1.5%植病灵水乳剂、20%丁香酚水乳剂、2%几丁聚糖水剂和20%病毒A可湿性粉剂5种药剂防治辣椒病毒病的效果分别为57.4%、49.6%、54.6%、53.8%和47.8%。在辣椒缓苗后,用6%寡糖·链蛋白或20%丁香酚或2%几丁聚糖连续喷药3次,对辣椒病毒病有明显的防治效果。

6%寡糖·链蛋白WP浸种处理对早稻恶苗病的预防效果及应用技术

田间试验结果表明,6%寡糖·链蛋白WP与45%咪鲜胺EC混配浸种处理对早稻恶苗病有较好预防效果,其中6%寡糖·链蛋白WP 1000倍+45%咪鲜胺EC 2000倍对早稻恶苗病预防效果达94.82%,与当地常用药剂(25%氰戊菌酯SC 3000倍+45%咪鲜胺EC 2000倍)相当,而单用6%寡糖·链蛋白WP 500倍也有一定预防效果(防效为74.49%),安全性好,因此可与咪鲜胺、氰戊菌酯交替使用,以延缓药剂抗性产生。

寡糖·链蛋白对小麦抗黄花叶病毒的免疫诱抗作用

【目的】激发子可以诱导寄主植物的系统获得抗病性,具有有效性、持久性和广谱性的特点。研究旨在明确新型激发子寡糖·链蛋白(oligosaccharins·plant activator protein)对小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)的免疫诱抗作用,为该激发子的研究和大面积推广应用提供技术支撑。【方法】选用小麦黄花叶病感病品种‘矮抗58’,在室内将消毒的小麦种子播种于自感病田带回的病土中,在(27±2)℃下培养。5叶期叶面喷施稀释1 000倍的6%寡糖·链蛋白。喷施7 d后,将麦苗置于(12±1)℃培养箱中接种培养。30 d后取出麦苗,分别测量小麦株高和叶片的叶绿素含量,计算病情指数和防治效果。在田间,同品种小麦种植于小麦黄花叶病常发地块,小麦返青后每周喷施1次6%寡糖·链蛋白,连续喷施3次。每周测量小麦株高和叶绿素含量,计算病情指数和防治效果。并于调查期间,每小区取20片植株最上部第一片完全展开的叶片,通过q PCR检测小麦植株内WYMV-CP基因拷贝数。在小麦收获时测定千粒重和穗粒数,测算产量。【结果】低温培养30 d后,经寡糖·链蛋白喷施处理的小麦较对照组的株高没有显著差异,但叶绿素含量则明显高于对照组(P<0.05);同时处理组的病情指数较对照组明显降低,防治效果达到63.32%。田间经寡糖·链蛋白处理后,小麦株高和叶绿素含量较对照没有显著差异。小麦返青期,喷施1周后病情指数与对照没有显著变化;而2周后病情指数显著降低,防治效果可达46.67%。小麦收获时调查发现,经寡糖·链蛋白处理后小麦穗粒数显著高于对照组(P<0.05),小麦产量明显升高(P<0.05)。病株内WYMY-CP基因拷贝数在喷施1周后抑制率达到69.30%,2周后达到85.50%,3周后最高达到99.20%。【结论】寡糖·链蛋白可诱导小麦植株对小麦黄花叶病毒的抗性,显著降低小麦植株内WYMV-CP基因拷贝数;在田间可以减轻小麦黄花叶病的危害,减少产量损失。

寡糖·链蛋白对马铃薯叶片抗氧化酶的影响

通过对3个不同抗病品种马铃薯植株上喷施6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性变化,明确6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂诱导植物抗病机制,筛选出最优药剂稀释倍数,为马铃薯抗病提供理论依据。结果表明:在一定时间内,马铃薯植株叶片SOD、POD和CAT酶活性均呈现上升趋势。可见,6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂可以提高马铃薯体内抗氧化酶活性,从而增强其抗病性。

寡糖·链蛋白对马铃薯试管苗生长的影响

[目的]研究6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对马铃薯试管苗生长的影响,确定该药剂对马铃薯试管苗促生的最适稀释倍数,以期为马铃薯试管苗的高效生产移栽和马铃薯生产的减肥减药提供理论依据。[方法]以马铃薯陇薯9号试管苗为试材,采用6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂进行不同稀释倍数的蘸根处理,研究该药剂对试管苗生长相关指标、结薯重及对温室移栽的影响。[结果]6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对马铃薯陇薯9号的株高、根长、根数、叶片数和鲜重均有一定程度的促进作用,增强壮苗能力,也能增加试管苗移栽成活率和结薯重,该药剂150~300倍液对陇薯9号试管苗蘸根15~30 min,试管苗的各项生长指标、成活率和结薯重最高,植株生长健壮,生长状况最佳。[结论]6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂使用效果理想,减少了用药次数,可在马铃薯生产过程中推广应用。

寡糖·链蛋白浸种对菜豆根腐病的防控效果

本研究分别以不同稀释倍数的6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂浸泡菜豆种子,并对菜豆根腐病防控效果及抗性相关酶活力的影响进行了系统比较。结果表明,6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂浸泡菜豆种子,能够激发菜豆幼苗的抗病性。其中稀释20倍对菜豆根腐病的防控效果最佳,其次为稀释80倍和稀释500倍,但高浓度的6%寡糖·链蛋白对种子发芽及出苗率有一定抑制作用,因此,推荐使用500倍稀释液。同时,6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂可显著提高菜豆具有广谱抗病性的PPO和POD等抗性相关酶活性,能够激发菜豆广谱抗病性。

益生菌ABC转运体寡糖结合蛋白的结构学研究进展

益生菌有助于改善宿主的微生态平衡。益生菌摄入寡糖有益于其增殖和代谢,该摄入过程主要是通过ABC转运体完成。ABC转运体的底物结合蛋白能够在胞外区域结合寡糖,并通过跨膜区进一步将其传递。本论文对近年来在益生菌中解析的寡糖结合蛋白进行综述,着重介绍其结构特性,并对其寡糖底物的功能机制进行探讨。

6%寡糖·链蛋白在水稻上应用效果初探

通过开展在水稻上使用6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂试验,验证其对水稻病害的防治效果以及促进水稻生长、增强抗高温干旱能力和增产潜力。试验结果表明:6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对水稻纹枯病、稻曲病具有良好的防效,能提高水稻抗高温能力和分蘖率,增加有效穗,提高结实率和产量,增产13%左右。

寡糖·链蛋白和噻虫嗪组合对番茄黄化曲叶病毒病的防效试验

为探究寡糖·链蛋白和噻虫嗪组合对番茄黄化曲叶病毒病的防控效果,选用6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂、25%噻虫嗪水分散粒剂及6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂+25%噻虫嗪分散粒剂对番茄黄化曲叶病毒病进行田间防治试验。结果表明:25%噻虫嗪水分散粒剂灌根显著降低了烟粉虱虫口数;6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂喷施+25%噻虫嗪水分散粒剂灌根处理效果最好,番茄黄化曲叶病毒发病率和病情指数显著低于空白对照,防控效果为74.25%,番茄株高、叶长、叶宽、SPAD值、氮含量、叶片净光合速率(Pn)及产量均显著高于对照,比对照增产52.82%。综上所述,6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂和25%噻虫嗪水分散粒剂组合使用可有效防控番茄黄化曲叶病毒病和烟粉虱的发生,达到增产增效的目的。

褐藻双寡糖·蛋白可溶性粉剂对小麦产量及白粉病发生的影响

为探究褐藻双寡糖·蛋白可溶性粉剂对小麦产量以及小麦白粉病发生的影响,本文设置了田间试验(舞钢市、获嘉县和新乡市)和盆栽试验,调查小麦产量和小麦白粉病病情等指标。结果表明:喷施褐藻双寡糖·蛋白可溶性粉剂的小麦产量较清水对照和空白对照显著提高了6.90%~9.90%,千粒重较清水对照和空白对照显著提高了4.42%~4.96%;病情指数较空白对照显著下降34.4%~59.3%,对小麦白粉病的防治效果为34.36%~59.30%,以褐藻双寡糖·蛋白可溶性粉剂500倍液处理效果最好。说明喷施褐藻双寡糖·蛋白可溶性粉剂可显著提高小麦产量,显著降低小麦白粉病病情指数,对小麦白粉病防控具有促进作用。

乳清蛋白-多糖的制备及功能特性的研究

通过美拉德反应将壳寡糖引入乳清蛋白,形成乳清蛋白-壳寡糖共价复合物,对其溶解性、乳化性、乳化稳定性及热稳定性进行研究。结果表明,乳清蛋白-壳寡糖共价复合物可以较好的改善乳清蛋白的热稳定性,对乳清蛋白在等电点附近的溶解性,乳化性,乳化稳定性有一定的调节作用。采用三因素二次通用旋转组合设计对乳清蛋白-壳寡糖的制备条件(糖比例,温度,时间)进行优化,建立了以乳化性及乳化稳定性为响应值的回归方程。以乳化性为响应值,优化结果为:糖比例28%,温度45℃,时间17 h,此时乳清蛋白-壳寡糖乳化性为0.55,以乳化稳定性为响应值,优化结果为:糖比例34%,温度45℃,时间17 h,此时乳化稳定性为1.25 min。

海滨木槿种子无菌萌发及壮苗的培养基筛选

海滨木槿是东南沿海地区防风护堤林的首选树种,也是瘠薄山地水保林的良好树种。无菌壮苗的获取是建立高效再生体系的前提,可为植物资源保护和新品种选育提供基础。该研究以MS为基本培养基,比较柠檬酸、活性炭、三碘苯甲酸(TIBA)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、水解酪蛋白、维生素H、叶酸、噻苯隆(TDZ)和寡糖·链蛋白等添加物对海滨木槿种子萌发以及壮苗培养的影响。结果显示,种子萌发最佳配方为MS+6-BA 0.5 mg·L^(-1)+NAA 0.1 mg·L^(-1)+水解酪蛋白0.1 g·L^(-1),萌发率从21.4%±7.8%提高到85.3%±9.1%;维生素、叶酸、柠檬酸的添加均未能促进种子的萌发。培养基MS+6-BA 0.1 mg·L^(-1)+寡糖·链蛋白0.1 g·L^(-1)+活性炭0.1%中的幼苗增殖系数最高,达7.0±2.6,且直立生长,茎枝较粗,叶片肥厚。值得注意的是,TDZ和NAA组合诱导出来的材料分化能力较强,可为后期海滨木槿诱导体胚成苗技术研究提供一定的参考。

3种新型生物产品及复配杀菌剂防治小麦赤霉病的研究

为筛选防治小麦赤霉病的新型生物产品及其减药增效配方,于2016年分别在湖北襄阳和荆州开展田间试验。评价了植物免疫蛋白质生物农药6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂、诱抗剂0.5%大黄素甲醚水剂和生物刺激素爱诺森可溶液剂对赤霉病的防治效果,筛选了上述3种生物产品与常规化学农药430 g/L戊唑醇悬浮剂、25%咪鲜胺乳油和50%多菌灵可湿性粉剂减药增效组合配方。结果表明:6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂和0.5%大黄素甲醚水剂处理的防效分别在20.18%~24.37%和18.32%~22.98%之间,爱诺森处理对小麦赤霉病无防治效果。430 g/L戊唑醇悬浮剂、25%咪鲜胺乳油和50%多菌灵可湿性粉剂等3种杀菌剂减量20%分别与寡糖·链蛋白、大黄素甲醚和爱诺森复配田间防效表明,50%多菌灵可湿性粉剂减量20%与寡糖·链蛋白、大黄素甲醚和爱诺森3种生物产品复配处理的病情指数在3.34~7.81,防治效果在63.99%~77.56%,其增效范围在3.22%~47.59%,与430 g/L戊唑醇悬浮剂未减药用量的防效相当(P>0.05)。50%多菌灵可湿性粉剂减量20%与寡糖·链蛋白、大黄素甲醚和爱诺森3种生物产品复配处理的产量显著高于未减药的多菌灵处理产量(P<0.05),增产幅度在3.74%~9.28%之间。430 g/L戊唑醇悬浮剂和25%咪鲜胺乳油减量20%与寡糖·链蛋白、大黄素甲醚和爱诺森3种生物产品复配处理的防效和增产效果趋势不显著。

燕窝及其制品的气相色谱鉴别和定量检测

确定燕窝唾液糖蛋白寡糖链由５种糖组分构成，它们具有特定的量比关系。据此建立的燕窝及其制品的气相色谱检测方法可同时完成定性鉴别和定量分析，具有特征性强，干扰少，简便可靠的特点。

嗜碱芽孢杆菌N16-5木寡糖结合蛋白XynE的功能表征

嗜碱芽孢杆菌(Bacillus sp.)N16-5是本实验室从内蒙古乌都淖湖沉积物中分离的嗜碱菌,含有丰富的多糖水解酶,能够利用广泛的单糖和多糖。实验室前期转录组研究发现其基因组上存在一个21 kb大小的木聚糖利用相关基因簇,其中包括xyn EFG基因簇编码的ABC转运蛋白。【目的】生物信息学分析预测xyn E编码转运蛋白的底物结合蛋白,通过敲除xyn E基因研究它对菌株N16-5利用木聚糖的影响。【方法】利用温敏型载体p NNB194介导的同源交换重组的方法构建了xyn E基因敲除菌株N16-5(Δxyn E),并通过基因回补对敲除菌株表型进行验证。通过检测菌株在木聚糖培养基中的生长情况及培养基中还原糖含量的变化来分析xyn E基因对菌株利用木聚糖的影响;通过HPLC检测分析不同培养时间点木聚糖培养基的组分,结合缺失菌株和野生型菌株在以木糖为唯一碳源的培养基中的生长情况来分析Xyn E所属ABC转运蛋白的底物特异性。【结果】相比野生型菌株,缺失型菌株N16-5(Δxyn E)在木聚糖培养基的生长曲线对数期明显延迟,最大生物量略低,且培养过程中出现了明显的还原糖的累积与消耗过程;回补菌株恢复了野生型表型,且最大生物量比野生型略高。HPLC检测分析显示,相比野生型菌株,缺失菌株培养过程底物消耗速度较慢,且16 h后出现明显的木四糖、木三糖和木二糖的累积,直至60 h后仍有较大量木二糖的存在;在木糖培养基中培养时,缺失型菌株和野生型菌株的生长趋势较一致。【结论】Xyn E蛋白特异性结合木寡糖,其所属ABC转运蛋白在嗜碱芽孢杆菌N16-5降解利用木聚糖过程中发挥着重要作用。

6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂与植物生长调节剂组合应用对大豆菌核病抗病性、农艺性状及产量品质的影响

[目的]试验6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂与植物生长调节剂组合应用对大豆的抗病增产提质效果。[方法]以“辽黑豆5号”为大豆供试品种,在辽宁省阜新市彰武县,开展了6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂结合24-表芸苔素内酯和复硝酚钠等植物生长调节剂对大豆菌核病、农艺性状以及产量品质影响的田间试验。[结果]在大豆整个生育期喷施2次6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂(300 g/hm^(2))与植物生长调节剂组合对菌核病的防控效果可以达到65%以上,可显著提升大豆植株的株高、有效分枝数和单株有效荚数,大豆平均增产幅度达到7.35%,并且大豆的蛋白质、脂肪和总碳水化合物含量分别提高2.79%、6.64%和3.18%。[结论]6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂与植物生长调节剂组合施用于大豆具有抗病、增产和提质的作用。