运用化学计量学法高通量筛选人参抗老年痴呆的氨基酸成分

应用Ellman改良法和MTT法对人参水提物超滤分级后的<1 kD,1~3 kD,3~10 kD,>10 kD及总提物共5个组分进行体外乙酰胆碱脂酶(AChE)抑制活性和神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)保护活性筛选,对吉林省内12个样地的人参水提物<1 kD活性组分进行氨基酸检测,获得各样品的氨基酸共有峰图谱数据,并测定各样品的AChE抑制率和SH-SY5Y细胞存活率,采用主成分分析(PCA)、偏最小二乘法(PLS)和灰色关联度分析(GRA)对所获得的氨基酸共有峰数据进行处理后,可有效区分人参的不同产地,并筛选出其中潜在抗AChE活性和SH-SY5Y细胞保护活性的氨基酸成分。试验结果显示,苏氨酸(Thr)和亮氨酸(Leu)在氨基酸共有峰中对AChE的抑制活性最佳,苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)及亮氨酸(Leu)对SH-SY5Y损伤细胞具有较好的保护作用。揭示了人参水提物<1 kD组分具有良好的AChE体外抑制活性和SH-SY5Y细胞损伤保护作用。因此,苏氨酸(Thr)和亮氨酸(Leu)可能具有潜在的抗阿尔茨海默病(AD)活性,该成分为寻找抗AD寡肽类药物提供物质基础。此研究方法为简单、高通量的从中药中筛选抗AD的活性物质提供借鉴。