基于条件优化探索对流免疫电泳技术的实验教学设计

为了提高对流免疫电泳实验的成功率和缩短电泳时间,本实验以BSA和自制备的兔抗BSA抗血清作为实验材料,通过优化和改变电泳介质、电泳缓冲液等条件,观察比较抗原-抗体沉淀线形成的位置、形状情况来探索符合实验教学要求的过程方案。结果表明,在100 V电压下,采用TAE作为缓冲液、1.0%~1.2%的琼脂凝胶作为电泳介质时,电泳15~20分钟内可形成白色、清晰可见的抗原-抗体沉淀线,实验效果最佳。

TAE缓冲液应用于对流免疫电泳的实验效果分析

为了研究可用于对流免疫电泳的新型缓冲液来替代传统巴比妥-巴比妥钠缓冲液,本实验分别以巴比妥-巴比妥钠缓冲液、TAE缓冲液为电泳介质,电泳后观察抗原抗体复合物白色沉淀线情况。比较这两种缓冲液的电泳结果基本相当,但TAE缓冲溶液电泳沉淀线更为明显,试剂的安全性较高,实验成本较低。因此开展对流免疫电泳实验,TAE缓冲液完全可以替代巴比妥-巴比妥钠缓冲液。

对流免疫电泳在水貂阿留申病诊断中的应用进展

水貂阿留申病(AD)是一种在世界范围内广泛流行的、严重危害水貂养殖业的病毒性传染病。对流免疫电泳(CIEP)是世界公认的诊断AD病的有效方法。本文综述了CIEP在AD诊断中的应用进展,介绍了该方法的优缺点和实用性,以期为疾病的有效防控提供参考。

水貂阿留申病碘凝集与对流免疫电泳检测方法比较

水貂阿留申病是危害水貂养殖业的三大疫病之一,目前没有疫苗可以使用,也没有特效的治疗药物,只能通过检测、淘汰来净化貂群。本研究随机采取河北某貂场准备配种后期的水貂血清样品168个,采用碘凝集和对流免疫电泳进行检测,结果表明:二者的符合率为81.55%。鉴于二者的符合率及检测成本,建议生产中首先用碘凝集对留种貂群进行初筛,再进一步用对流免疫电泳检测,采用二者相结合的方法对水貂种群进行净化。

对流免疫电泳检查不同材料中的法氏囊病毒抗原

采用琼脂扩散试验（ＡＧＤ）和对流免疫电泳（ＣＩＥ）两种方法对比检查了不同材料中的传染性法氏囊病毒抗原，对感染鸡的法氏囊组织，ＣＩＥ检查病毒抗原的敏感性较ＡＧＰ提高了４～８倍；对病毒含量少，ＡＧＰ不能检出的鸡胚材料，ＣＩＥ仍能从鸡胚胚体和绒毛尿囊膜中检出病毒抗原，其检出率为９．１％～２７．２％。

槽式对流免疫电泳法检测可提取性核抗原抗体的研究

用引进的槽式对流免疫电泳法（槽ＣＩＥ）和国内常规的免疫双扩散法（ＩＤ），同时对８９例病人血清可提取性核抗原（ＥＮＡ）的抗体进行了测定和比较。槽ＣＩＥ法图像清晰、沉淀线呈弧型，结果明显比ＩＤ法容易判断，ＥＮＡ抗体阳性病人血清的检出率非常显著地高于ＩＤ法（Ｐ＜０．００１），抗ＳＭ、ＲＮＰ、ＳＳＡ、ＳＳＢ等每种抗休的检出率也均高于ＩＤ法，其中前３种差异非常显著（分别Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。

应用对流免疫电泳检测细胞培养物中羊口疮病毒抗原

对羊口疮抗原的检测,国内曾报道应用对流免疫电泳的方法。而对细胞培养的羊口疮病毒的检测则多采用电镜观察。本试验采用对流免疫电泳的方法检测鸭胚成纤维细胞培养物中的羊口疮病毒抗原,并用电镜观察和免疫电泳作对照试验。现报告如下:

应用对流免疫电泳诊断狐和貉细小病毒性肠炎的研究

建立的诊断狐和貉细小病毒性肠炎的对流免疫电泳（ Ｃ Ｉ Ｅ Ｐ） ，抗原最佳稀释度为１∶１６ ，血清最佳稀释度为１∶８ ，最佳电泳时间为６０ ｍｉｎ 。用该方法检测发病早期的病料，阳性检出率达９８ ％ ，对发病１０ ｄ 以上的病料阳性检出率为３０ ％ 。

猪细小病毒的研究 Ⅲ.对流免疫电泳检测PPV抗原和抗体

利用对流免疫电泳技术检测猪细小病毒(PPV)抗原和抗体的结果初步表明,该法具有较强的特异性和可重复性,在pH8.6、离子浓度0.1mol、电流强度4mA的条件下,于琼脂凝胶中1～1.5小时、于琼脂糖凝胶中1.5～2小时,抗原和抗体孔间可出现了3条清晰沉淀线。中间一条沉淀线粗而致密。琼脂凝胶优于琼脂糖凝胶检测效果。与现有方法相比,对流免疫电泳的突出特点是简便、快速、稳定、省力,抗原和血清不需作任何处理,因此可望代替现有的常规检测方法即血凝(HA)和血凝抑制(HI)法而应用于生产实际。对一些有关问题进行了讨论。

对流免疫电泳检测鸡传染性支气管炎病毒抗原和抗体的研究

鸡传染性支气管炎(IB)是鸡的一种急性、病毒性、高度接触性呼吸道传染病,可引起雏鸡大批发病死亡、产蛋鸡产蛋量急骤下降,是危害最大的鸡病之一。目前检测IB病毒(IBV),无论是强毒株还是疫苗毒株,主要依靠接种鸡、器官组织或细胞,并观察相应病毒引起的不同病变,再以中和试验(NT)、

对流免疫电泳试验诊断兔瘟病

人工感染兔瘟病料经反复冻融，氟碳乳化和盐洗处理后，提纯病毒作为抗原，与兔血清在巴比妥缓冲液中泳动0.5～1h，8份高免兔阳性血清均形成一条清晰灰白色沉淀线，阴性血清无沉淀线形成，证明该方法具有较高的特异性。追踪检测用兔瘟灭活苗免疫3个月的家兔体内抗体，结果检出率达到87.5％。从而初步建立了用于兔瘟检测的对流免疫电泳诊断方法。

应用对流免疫电泳技术鉴定肠病原大肠杆菌菌毛抗原

应用对流免疫电泳技术对肠病原大肠杆菌菌毛抗原成分鉴定结果,K_(88)、F_(41)菌毛抗原均出现2条沉淀线,K_(99)和987P 出现1条沉淀线。通过应用 K_(88)、K_(99)、987P、F_(41)因子血清分别对相应产菌毛抗原标准株的交叉试验及对不产菌毛抗原菌株的对照试验表明,本方法具有特异、敏感、快速等特点,可以在实际工作中用于菌毛抗原成分的鉴定。电泳时采用0.06M 巴比妥缇冲液(pH8.6),孔径及孔间距均为4.0mm.端电压6V/cm,一般电泳3小时即可得到终结果。

免疫印迹法和对流免疫电泳法检测ENA抗体的评价和意义

目的 : 评价两种检测可提取性核抗原 (ENA)多肽抗体方法在临床诊断中的价值。方法 : 同时应用免疫印迹法 (IBT)和对流免疫电泳法 (CIE)检测 2 18例结缔组织病 (CTD)患者和 15 0例非结缔组织病对照血清ENA多肽抗体 ,比较两者的检测结果。结果 : CTD中用IBT法测得抗ENA抗体阳性 14 8例占 6 7.9% ,用CIE法阳性 133例占 6 1.0 % ,两者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。IBT阳性而CIE阴性为 18例 ,IBT阴性而CIE阳性者 4例。IBT可以同时检测 7种ENA抗体 ,而CIE只能检测 4种ENA抗体 ,但由于两种方法抗原制作过程中某些技术性因素会出现假阴性和假阳性。结论 : IBT是一种敏感性和特异性高而广谱的ENA血清学诊断方法 ,但同时应用CIE法可以相互补充和验证 ,从而提高抗ENA抗体检测的阳性率。

放射对流免疫电泳自显影诊断血吸虫病的研究

用放射对流电泳自显影法（以下简称本法）检查血吸虫抗体以诊断血吸虫病,具有敏感、特异的特点,可以用作早期诊断,且观察结果明确,记录可保存,抗原用量少。 一、基本原理 在免疫电泳基础上,用放射性同位素125碘或131碘标记抗原,结合自显影技术,建立放射对流免疫电泳自显影方法。放射标记抗原和相应的抗体在适合的比例下相遇时,呈现沉淀线。但在抗原—抗体复合物水平很低的样品中,肉眼不能看到的沉淀线。

对流免疫电泳法鉴定蚊胃血血源的研究

用对流免疫电泳技术(电泳法),以全血清为抗原,制备3种已知抗体血清检测未知抗原鉴定蚊虫胃血。并用环状沉淀试验法(沉淀法)比较观察不同抗血清及抗原浓度、反应时间与温度的实验。结果证明沉淀法的敏感性比电泳法高约2～3倍。两法同时检测中华按蚊及菲律宾按蚊胃血标本,结果两法牛血阳性率均为100％,但沉淀法尚出现30.43％及17.24％牛、猪血阳性反应,而电泳法则无;当沉淀法抗血清稀释为1:32时,两法反应结果一致。电泳法操作简便,可用于蚊胃血标本的鉴定。

对流免疫电泳快速检测仔猪轮状病毒

轮状病毒(RV)是仔猪腹泻的重要病源.用于 RV 的检测方法主要有电镜法、核酸电泳法、免疫荧光法、补体结合试验、ELISA 法、对流免疫电泳(CIEP)法及琼脂扩散法。作者用CIEP 检测了65份猪腹泻粪便样品。

对流免疫电泳鉴定猪源多杀性巴氏杆菌血清型

通过特异性试验、敏感性试验、阻断试验等建立鉴定猪源多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida血清型的对流免疫电泳(CIE)技术。结果表明,抗原、抗体之间具有较好的特异性,而且有着很好的重复性;敏感性较琼脂扩散试验至少提高4倍;对本实验室分离的13株Pm进行荚膜血清型分型鉴定显示,A型(8/13,61.54%)、D型(5/13,38.46%),符合PCR鉴定结果。本方法具有快速、特异等特点,且不需要特殊设备,操作简便。

蛇伤的蛇种早期快速诊断——Ⅱ、蛇伤病人的蛇种快速诊断——对流免疫电泳法

本文报道早期快速诊断蛇伤的蛇种的方法。采用对流免疫电泳方法成功地应用于30例不同蛇咬伤的临床病人。在咬伤1~2天内测定,其阳性率是93.33%。此法使用的仪器比较简单,操作容易,在20~30分钟内可以获得结果。特异性和敏感性相当高,其检验越早阳性率就越高。

对流免疫电泳试验在斯氏肺吸虫病诊断中的应用

以对流免疫电泳试验检测斯氏肺吸虫病人和病鼠血清中的抗体 ,阳性率分别为 91 7%和 94 4 %。同时检测正常大鼠 ,旋毛虫病大鼠、血吸虫病兔和蛔虫感染者血清 ,均为阴性反应。表明该方法用于斯氏肺吸虫病临床诊断具有较好的特异性。

用对流免疫电泳(CIEP)法诊断水貂阿留申病的报告

水貂阿留申病是目前世界公认的、对水貂危害最大的三大传染病之一.此病广泛流行于世界养貂国家,我国养貂场、户中也有不同程度的发生.由于该病流行面广,发病率高,使繁殖率下降,给水貂饲养业造成了较大的经济损失.黄骅县饲养水貂有20余年的历史,饲养量居全国各县前列.近几年来,水貂阿留申病时有发生,特别是一些大型貂场发病比较严重,有的场因此造成的经济损失达数十万元.