牛血清白蛋白作为生物医用材料产品体液免疫评价阳性对照物的研究

目的本文旨在对生物医用材料免疫原性评价方法进行初步探索,寻找有效的生物医用材料产品体液免疫评价所需阳性对照物,并对其使用剂量,免疫方法和免疫效果进行探索,为生物医用材料产品免疫原性评价实现标准化积累数据。方法选取雌性8周Balb/c小鼠,随机分组,分别不同剂量免疫3次,每次间隔两周。分别摘眼球取血,分离血清,并进行血清抗体总Ig G浓度检测,实验结果利用统计学方法进行分析。结果牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)单独免疫小鼠均无显著的体液免疫刺激作用;BSA混合佐剂免疫小鼠中剂量组和高剂量组的淋巴细胞增值能力明显强于阴性对照组,高剂量组强于中剂量组;二次免疫后两周取材与3次免疫后两周取材BSA混合佐剂组细胞增殖能力均与阴性对照组有显著性差异,3次免疫后两周强于二次免疫后两周,佐剂对照组与阴性对照组淋巴细胞增值能力无显著性差异。结论实验证明,BSA可以作为生物医用材料产品体液免疫检测的阳性对照物,免疫刺激强度适中。

头孢唑肟钠混合降解杂质对照物的研究与应用

目的:研究制备头孢唑肟钠混合降解杂质对照物并应用于有关物质及含量测定系统适用性检查。方法:采用控速强制降解试验,获得目标混合降解杂质;选择适宜参数范围的色谱柱分析混合杂质对照物,选择保留时间合适且所有杂质都得到有效分离的色谱图作为标准谱图;采用柱切换LC-MS方法结合头孢唑肟钠降解规律鉴定各杂质结构。结果:混合降解杂质对照物中共检出7个杂质,各杂质可在6根色谱柱中有效分离。结论:头孢唑肟钠混合降解杂质对照物的研究与应用是评价色谱系统的分离能力的有效手段,便于快速分析杂质来源。

致畸试验中3种常用阳性对照物的效果比较

目的:比较致畸试验中3种常用阳性对照物的致畸效应,为食品、保健品、化妆品致畸试验中阳性对照物的选择提供参考。方法:将交配成功的SD大鼠按照妊娠时间随机分为4组,分别为阴性对照组,阿司匹林组(280 mg/kg),敌枯双组(1 mg/kg)和环磷酰胺组(12 mg/kg)。阿司匹林组和敌枯双组于受孕后第6~15天按10 m L/kg分别灌胃相应的溶液,环磷酰胺组于受孕后第12天腹腔一次注射给药。记录受孕后第0、6、9、12、15、20天孕鼠体质量。于受孕后第20天麻醉处死孕鼠,迅速取出子宫,称子宫连胎质量及子宫质量,记录黄体数、着床数及胚胎发育情况。对胎仔进行外观检查,逐一记录性别、体质量、体长。将每窝1/2活胎鼠染色做骨骼检查,另外1/2活胎鼠固定做内脏检查。结果:与阴性对照组比较,阿司匹林组孕鼠第15、20天体质量及体质量增量降低,子宫、子宫连胎质量降低,活胎率减少,活胎鼠体质量、体长、尾长均降低(P<0.05或P<0.01);敌枯双组活胎率降低,活胎鼠体质量、体长、尾长均降低(P<0.01);环磷酰胺组孕鼠体质量增量降低,子宫、子宫连胎质量降低,活胎率减少(P<0.05或P<0.01);3种阳性对照物处理组大鼠胎仔外观畸形率、骨骼畸形率及内脏畸形率明显升高(P<0.01),以敌枯双组和环磷酰胺组畸形率较高,畸胎类型多。结论:在本试验条件下,可见敌枯双(1 mg/kg)和环磷酰胺(12 mg/kg)处理组大鼠的畸形率高,畸胎类型多,是较为敏感的、致畸类型较全面的阳性对照物。

加拿大的科迪勒拉山脉是元古宙地壳增生的现代对照物

发生在0.25Ga至今的加拿大科迪勒拉山脉的地壳增加过程和新增到大陆的实际体积,认为是元古宙2.5—0.5Ga期间主要地壳增长期的对照物。加拿大的科迪勒拉代表了相当于全球显生宙地壳增长比例的20％(最大25％)。这类似于元古宙的地壳形成,如格伦维尔带和阿拉伯—努比亚地盾事件,但所代表的地壳增长少于1.9—1.7Ga的北美—格陵兰—欧洲事件。然而,加拿大科迪勒拉作为元古宙事件的现代对照物的主要根据不是在地壳产生的数量上。主要根据是(1)地体使大陆逐渐增长,(2)以岛弧岩石占优势,(3)难以识别地体间的地缝合线,(4)~∑Na正值具有较高的丰富度,因而是原生的岩石,(5)可能存在横向移动,致使地体比先沿大陆边缘的一部分汇聚。加拿大科迪勒拉是元古宙造山带的性质上的同等物,其中之一是它的地层结构和主要构造关系是经常可以识别的,这是因为有古生物和古地磁限制、低变质、有限的熔融范围及花岗岩侵入体。因此,加拿大的科迪勒拉可以作为元古宙事件的自然实验室。但在元古宙里,古生物和古地磁控制条件是不可能的,变质程度高,仅能在有限范围内能辨别出地层,熔融和花岗侵入体分布广泛。在科迪勒拉,Na、Sr和Pb同位素资料较为精确的解释是可能的,因为其它控制条件都可以反馈给元古宙各个地点。

形式设计中的引用、改写与对照物——以“‘隻立千古’——《红楼梦》文化展”为例

展陈设计是展览视觉传播的重要组成部分,是连接文物与观者之间的信息纽带。新时代信息技术的革新与公众日益增长的精神文化需求对博物馆展览的展陈设计提出了更高的创新要求。本文即以“‘隻立千古’——《红楼梦》文化展”为例,从引用、改写与对照物三个不同的角度,分析形式设计中概念、元素、视觉的组织与应用,反思并探究展陈设计的内在启发性与潜在创新性。

对照提取物在人参配方颗粒质量分析中的应用

目的以人参水提对照提取物(GWERS)为参照,对11个不同厂家的19批人参配方颗粒进行质量分析。方法根据国家药品监督管理局颁布的人参配方颗粒标准(YBZ-PFKL-2021186)鉴别和特征图谱方法进行薄层色谱(TLC)鉴别,以及特征图检测。结果TLC分析结果表明,19批人参配方颗粒样品可以分成3类,第1类样品整体图谱与GWERS一致,相似度高;第2类样品检出西洋参特有成分伪人参皂苷F11;第3类样品图谱比GWERS多4个蓝色荧光斑点。HPLC分析结果表明,19批人参配方颗粒均呈现与GWERS色谱中保留时间相对应的8个特征峰。其中一厂家的3批样品图谱比其他样品图谱多出两个色谱峰,与GWERS图谱相似度低于0.65,其余16批样品图谱与GWERS图谱相似度高于0.94。结论目前市售的人参配方颗粒质量差异较大,疑存在混有西洋参投料的情况。应用GWERS分析人参配方颗粒的质量比对照药材具有更好的适用性。

对照提取物在浙贝母配方颗粒质量分析中的应用研究

目的 以浙贝母对照提取物(水提)和湖北贝母对照提物(水提)为参照,对12个不同厂家的22批浙贝母配方颗粒进行质量分析。方法 以乙酸乙酯-甲醇-三乙胺-水(17∶1∶1∶0.5)为展开剂进行高效薄层色谱(HPTLC)指纹图谱分析;采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.03%二乙胺溶液,梯度洗脱,柱温25℃,蒸发光检测器,进行高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析。根据浙贝母配方颗粒标准含量测定项下方法测定含量。结果 HPTLC和HPLC分析结果表明,22批标识为浙贝母配方颗粒的样品存在明显差异,其中有3家生产企业的4批浙贝母配方颗粒检出湖北贝母指纹图谱特征,其余18批浙贝母配方颗粒样品贝母素甲和贝母素乙的总量为0.291~3.179 mg·g^(-1),差异较大。结论 目前市售的浙贝母配方颗粒样品质量差异较大,经标准化制备的对照提取物(水提)对分析浙贝母配方颗粒的质量比对照药材具有更好的适用性。

玄参对照提取物的PULCON法定值研究和其在中药复方增液汤中的应用

目的采用氢核磁脉冲宽度定量法(Pulse length based concentration determination,PULCON)对玄参对照提取物中的哈巴苷、安格洛苷C和哈巴俄苷进行定性及定值研究,探讨玄参对照提取物代替相应对照品在提升玄参复方制剂质量控制水平的可行性。方法采用Bruker Avance III HD 700超导核磁共振波谱仪,以DMSO-d6为溶剂,苯甲酸为外标物,利用PULCON法比较苯甲酸定量峰(δ_(H)7.94)的峰面积和不同批次玄参对照提取物中3种化学成分的不同定量峰(哈巴苷δ_(H)6.24、安格洛苷Cδ_(H)7.08和哈巴俄苷δ_(H)5.97)的峰面积,测定不同批次中3种成分的含量,并采用配对t检验将测定结果与高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)的定值结果进行比对。分别以已知含量的玄参对照提取物和3个相应对照品为对照,建立增液汤的HPLC含量测定方法,采用配对t检验对2种方法所得结果进行比较。结果采用PULCON法测得3种成分的含量与HPLC法的定值结果基本一致,以玄参对照提取物为对照,3种成分的线性关系相关系数均大于0.9997,平均回收率为99.36%~102.31%。t检验结果显示,2种方法测定的哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷含量P值分别为0.279、0.105、0.623,均大于0.05,表明2种含量测定方法差异无统计学意义。结论PULCON法可在无对照品且无需分离的条件下,直接、快速、准确地分析玄参对照提取物成分的物质组成和含量,并将已标定准确含量的玄参对照提取物用于玄参复方制剂的质量控制,为中药对照提取物在中药质量研究中的应用提供了科学依据。

对照提取物在中药质量控制中的研究现状及展望

应用对照提取物进行中药质量控制具有专属性强、成本低,对照提取物易于获取、稳定性佳等优势。目前,对照提取物作为一种标准参照物已被广泛应用于中药质量控制领域。对中药对照提取物的概况、发展及近年来国内外有关其在中药质量控制中的研究现状进行综述。同时,在当前中医药发展的新形势下,针对中药质量控制指标与中药有效性关联不强等系列问题,对中药对照提取物的发展进行展望,强化中药对照提取物与其功效的关联性,初步提出“有效对照提取物”这一可应用于中药质量控制、药品开发等方面的提升概念,以期为中药全面药效物质基础及中药质量控制研究提供参考。

白头翁对照提取物的制备及其在药材质量控制中的应用

为制备并标定白头翁对照提取物,探讨白头翁对照提取物代替单体对照品在中药质量控制中应用的科学性和可行性,本试验采用大孔吸附树脂法结合高速逆流色谱法制备白头翁对照提取物;采用高效液相色谱法,以白头翁皂苷H、白头翁皂苷B4和常春藤皂苷C为指标对其进行含量标定;分别以已知含量的对照提取物和3个单体对照品为对照,通过高效液相色谱法测定32批白头翁药材中3个化学成分的含量,对照提取物法和对照品法测得的结果采用t检验法进行比较。结果显示,2种方法测定白头翁药材中白头翁皂苷H、白头翁皂苷B4和常春藤皂苷C的含量,无显著性差异(P>0.05)。结果表明,白头翁对照提取物替代单体对照品用于白头翁药材质量控制的方法科学可行,为白头翁药材的质量评价提供了新的思路和方法。

基于质量标志物⁃有效对照提取物模式的黑骨藤质量评价

目的明确黑骨藤抗类风湿性关节炎药效物质基础、质量标志物,建立该药材质量评价体系。方法采用CIA模型药理学实验验证黑骨藤对照提取物的抗类风湿关节炎作用,UPLC法测定黑骨藤有效对照提取物含量,构建其抗类风湿性关节炎功效的质量评价体系,并应用于药材质量控制。结果黑骨藤对照提取物、对照品可有效缓解足趾肿胀,减小关节炎评分、CIA大鼠血清促炎细胞因子水平,改善组织病理学变化。对照提取物法、单体对照品法含量测定结果基本一致。新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、绿原酸甲酯、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C为质量标志物。结论该方法具有检测指标多、效率高、成本低等优点,可为构建黑骨藤及其他中药质量评价新模式提供借鉴。

BSA作为动物源性医疗器械细胞免疫检测阳性对照物的研究

目的：目前国内外尚无针对动物源性医疗器械的免疫原性评价的统一标准。本研究参照ISO10993—20《医疗器械免疫毒性实验原则和方法》以及ASTM相关标准,如ASTMF1905-98《材料致免疫毒性测试方法选择标准规范》等,通过淋巴细胞增殖试验对BSA作为细胞免疫检测阳性物的相关技术问题进行了初步的研究,包括免疫剂量、免疫方式、取材时间等。为动物源性医疗器械的免疫原性评价实现标准化积累数据。方法：①实验动物：雌性BALB/c小鼠,8周。②免疫方式及免疫剂量：皮下注射高、中、低3个剂量的BSA（1000,500,100μg·mL^-1）或BSA与佐剂等量混合物,免疫2-3次,每次间隔2周。③淋巴细胞增殖试验：于不同时间点无菌取脾,分离脾细胞,进行淋巴细胞增殖实验。结果：①以BSA单独免疫小鼠,各剂量组OD值与阴性对照组比较差异均无统计学意义。②以BSA混合佐剂免疫小鼠,中、高剂量组OD值明显高于阴性对照组（p〈0.05）,且呈一定的剂量相关。③2次免疫后2周、3次免疫后2周BSA混合佐剂组OD值均明显高于阴性对照组（p〈0.05）。结论：将BSA与弗氏佐剂等量混合,以剂量为50-100μg·只^-1的BSA注射至小鼠皮下,每次间隔2周,2次或3次免疫后2周取材行淋巴细胞增殖试验可获得明显的阳性结果。

槐花对照提取物的制备及槐花中4个黄酮类成分的含量测定

目的:制备槐花对照提取物,并以其为对照测定槐花中4个黄酮类成分含量。方法:用水提法制备槐花对照提取物;采用高效液相色谱法测定其中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的含量;色谱柱为Diamonsil C18(2),流动相为甲醇-1%冰乙酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为360 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以槐花对照提取物为对照测定槐花中4个成分的含量,并与以化学对照品为对照的测定结果进行比较。结果:在所制槐花对照提取物中,4个成分的含量占86.85%;芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的检测进样量线性范围分别为0.076 8~3.07、0.002 24~0.089 6、0.001 59~0.063 7、0.003 40~0.136μg(r均≥0.999 5);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.30%(n=6),加样回收率分别为100.4%、96.99%、102.3%、100.9%(RSD分别为2.51%、1.58%、2.97%、3.20%,n=6)。两种方法中4个成分的含量测定结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:以制备的槐花对照提取物为对照建立的测定方法操作简便、重现性好,并能同时测定槐花中4个成分的含量,可用于槐花饮片的质量控制。

苦杏仁对照提取物替代苦杏仁对照药材的可行性研究

目的：以对照药材技术要求为基础,以等量同质为原则,利用现代的提取制备技术,制备成质量稳定、均匀性好的苦杏仁对照提取物。通过考察不同的薄层系统,建立薄层鉴别用对照提取物的质量标准,供中药标准中薄层鉴别使用。并对其主要药效成分进行方法学考察,确保今后制备的对照提取物的一致性。方法：采用不同薄层色谱系统对苦杏仁对照提取物可替代对照药材进行定性研究;并用高效液相色谱法测定苦杏仁对照提取物中苦杏仁苷的含量。结果：在苦杏仁对照提取物薄层色谱中,展开剂：为甲苯-甲酸乙酯-甲醇-甲酸-水（6∶2∶0.4∶0.1∶0.1）,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的斑点。HPLC测定苦杏仁对照提取物中苦杏仁苷含量,苦杏仁苷线性范围461.7~15.39 mg/L（r=0.9995）,平均回收率为101.1%（RSD=2.15%）,该方法准确、可靠、专属性强,重复性好。结论：苦杏仁对照提取可替代对照药材进行定性鉴别。

定量用三七总皂苷对照提取物的协作定值

目的:建立定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质。方法:照《中国药典》2010年版一部三七总皂苷项下方法,以三七皂苷Rd、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd为指标,评价提取物备选原料的均匀性;5个实验室进行协作标定。结果:备选原料均匀性良好;对协作标定的测定结果进行统计分析确定了5种成分的标示值。结论:通过协作标定赋值,建立了首批定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质。

对照提取物的国内外发展研究概况

目的:对对照提取物的国内外发展研究进行综述。方法:就对照提取物在国内外的发展概况及应用现状进行了综述,结合对照提取物在《中国药典》(2010年版)、欧洲药典(7.0)、美国药典(36)的应用现状,就对照提取物展开讨论并展望。结果:阐明了进一步推动对照提取物的发展对中药国际化进程的积极影响。结论:中药标准物质中的对照提取物在中药质量控制中意义重大,成为中药国际化的重要亮点。

火麻仁薄层色谱鉴别用对照提取物的研制与应用

研制被薄层色谱鉴别用火麻仁对照提取物,以替代对照药材用于火麻仁的薄层鉴别。从制备工艺考察、提取物稳定性影响因素考察以及提取物性状等方面制订薄层色谱鉴别用火麻仁对照提取物的制备和保存方法,并比较对照药材与对照提取物在薄层鉴别中的应用结果。结果表明：制备方法为：火麻仁药材粉末（过二号筛）加25倍乙醚脱脂后,药渣加10倍甲醇加热回流提取1 h,滤过,减压蒸去甲醇,所得浸膏用10倍甲醇复溶,加入与浸膏等重量的柱层析硅胶（200~300目）,混匀,减压蒸干甲醇,过九号筛即得。该对照提取物与火麻仁药材的薄层鉴别效果一致。本研究制备的火麻仁薄层鉴别用对照提取物稳定可靠,可以替代火麻仁对照药材用于火麻仁及其成方制剂的质量控制分析。

枳实黄酮对照提取物研究及其在枳实药材质量控制中的应用

目的建立枳实黄酮对照提取物制备方法及定量方法,并探索其在枳实药材质量控制中应用的可行性。方法采用溶剂提取法、色谱分离方法制备枳实黄酮对照提取物,以芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷对照品为对照,对枳实黄酮对照提取物含量进行标定。分别以已知含量的枳实黄酮对照提取物和单体成分对照品(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷)为对照,建立枳实药材HPLC含量测定方法,并测定枳实药材中4种成分的含量,采用t检验和相关性分析对含量测定结果进行统计分析。结果以枳实黄酮对照提取物为对照,芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷进样量在各自范围内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999 6),平均回收率为100.45%~101.27%。t检验结果显示,2种方法测定的芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷含量P值分别为0.97、0.38、0.69、0.84;相关性分析显示,2种方法测定结果的相关系数均在0.95以上,表明2种方法无明显差异。结论枳实黄酮对照提取物可用于枳实药材的质量控制,本研究为枳实药材的质量控制与评价提供了新方法。

龙胆和坚龙胆对照提取物的制备

目的研究龙胆与坚龙胆对照提取物的制备工艺及质量控制方法。方法以龙胆提取物HPLC指纹图谱中龙胆苦苷和另外4个特征峰峰面积为评价指标,采用L9(34)正交试验优化其制备工艺,并建立龙胆和坚龙胆对照提取物指纹图谱。结果最佳制备工艺为药材最粗粉加10倍量水,回流提取3次,每次1 h,获得粗提物;粗提物浓缩至含原药材6.60 g/100 m L,加3倍量乙酸乙酯,萃取2次,萃取液蒸干,真空干燥。龙胆、坚龙胆对照提取物中龙胆苦苷平均质量分数分别为31.37%、25.20%。龙胆对照提取物指纹图谱标定龙胆苦苷和另外4个特征峰,整体相似度大于0.99;坚龙胆对照提取物指纹图谱标定龙胆苦苷和另外4个特征峰,整体相似度大于0.98。结论对照提取物制备工艺稳定,重复性好,可用于龙胆药材、饮片的质量控制。