HPLC测定人血浆中茴三硫代谢产物对羟基茴三硫及相对生物利用度

目的:建立了人血浆中茴三硫代谢产物对羟基茴三硫的HPLC测定法,研究2种茴三硫片在正常人中的相对生物利用度。方法:以吴茱萸次碱为内标,血样采用乙酸乙酯(5%异丙醇)1次提取,经Diamonsil C_(18)柱分离后在355nm波长处测定。20名健康志愿者采用自身对照随机交叉试验设计,分别单剂量口服茴三硫75mg后测定两者相对生物利用度。结果:对羟基茴三硫与内标分离度好,内源性杂质不干扰测定,对羟基茴三硫的线性范围为15.6～2000ng·mL^(-1),最低检测限为10ng·mL^(-1),提取回收率在80%以上;日内、日间精密度的相对标准偏差均小于10%。单次服用75mg茴三硫片试验制剂或参比制剂后的药代动力学参数AUC(0→12)分别为(971.8±368.0)ng·h·mL^(-1)和(1004.6±391.7)ng·h·mL^(-1),C_(max)分别为(323.3±209.4)ng·mL^(-1)和(279.5±107.0)ng·mL^(-1),T_(max)分别为(1.5±0.3)h和(1.6±0.4)h。相对生物利用度为97.3±6.8%。结论:该方法快速,简便,灵敏,重复性好,可用于对羟基茴三硫在人体内过程研究。方差分析结果表明2种制剂的主要药代动力学参数之间无明显差异,双单侧t检验结果表明两种制剂为生物等效制剂。

HPLC-MS/MS检测人血浆中的茴三硫代谢物对羟基茴三硫及生物等效性

用HPLC-MS/MS内标法定量测定人血浆中茴三硫代谢物对羟基茴三硫的浓度。采用InertsilODS-3色谱柱(150mm×2.1mm,3μm),流动相为甲醇;水=85:15(V/V),采用多反应监测(MRM)模式。对羟基茴三硫在0.452—603.2ng/mL浓度范围内具有良好的线性关系,日内、日间相对标准偏差(RSD)和准确度误差(RE)均小于12%。该方法灵敏、准确、快速,已用于茴三硫片体内药动学的研究。

人血浆中茴三硫代谢产物浓度的LC-MS/MS法测定

建立了LC-MS/MS法测定人血浆中茴三硫代谢产物对羟基茴三硫的浓度。采用Thermo Hypersil Gold色谱柱,流动相为乙腈-水(含0.5‰甲酸)(88∶12),氯雷他定为内标。采用ESI+电离源模式,选择正离子监测质荷比(m/z)为186.3→242.6(对羟基茴三硫)和337.3→383.4(氯雷他定)。样品用乙酸乙酯-异丙醇(95∶5)液液萃取,对羟基茴三硫在15.6～1000μg/L浓度范围内线性良好,批内和批间RSD小于7.10%,方法回收率为98.9%～110.1%。