Burkholderia cepecia JS-02酶法制备对羟基-D-苯甘氨酸的研究

对BurkholderiacepeciaJS 02"一菌双酶法"制备对羟基 D 苯甘氨酸过程的调控进行了研究,探讨了反应液pH值对于酶反应各个进程的影响,实施了调节反应液pH恒定为7 2的调控策略,使得D 海因酶与D N 氨甲酰基氨基酸水解酶同时具有较高的活力,并且较未调控前更有利于L 对羟基苯海因的消旋及DL 对羟基苯海因的溶解,底物转化率与产品收率分别由未调控时的92%与85%提高至99 5%与94%,反应时间由40h缩短至30h,生产速率由0 462g/(L·h)提高至0 681g/(L·h)

HPLC法同时测定冠心安口服液中蒙花苷、延胡索乙素和2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的建立能同时测定冠心安口服液中蒙花苷、延胡索乙素和2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量的HPLC分析方法。方法Capcell Pak UG C_(18)色谱柱分离;蒙花苷、延胡索乙素和2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷检测波长分别设定为334、281、320 nm;柱温为室温;进样体积为10μL;以乙腈为流动相A,1 mL·L^(−1)磷酸溶液(三乙胺调节pH至6.0)为流动相B,梯度洗脱。结果蒙花苷、延胡索乙素和2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的质量浓度分别在0.0245~2.4500、0.0457~4.5700、0.0474~4.7400μg·mL^(−1)范围内线性良好;平均回收率分别为100.8%、99.9%、101.4%;精密度和重复性RSD值(n=6)均在5.0%以内;供试品溶液在24 h内稳定。结论此方法具有前处理简单、分析时间短和检测结果准确等优点,适用于冠心安口服液制剂的质量控制。

基于D-(-)-/L-(+)-对羟基苯甘氨酸的两对手性钴配合物的合成、晶体结构和电化学识别

采用常温溶液挥发法,以D-(-)-/L-(+)-对羟基苯甘氨酸(D-/L-Hhpg)为主配体,2种含氮吡啶配体4,4'-联吡啶(4,4'-bipy)和5,5'-二甲基-2,2'-联吡啶(5,5'-BM-2,2'-bipy)为辅助配体,与Co Cl_(2)·6H_(2)O反应合成了2对手性配合物{[Co(D-hpg)(4,4'-bipy)(H_(2)O)]Cl·H_(2)O}_(n )(1-D)、{[Co(L-hpg)(4,4'-bipy)(H_(2)O)]Cl·H_(2)O}_(n )(1-L)、[Co(D-hpg)_(2)(5,5'-BM-2,2'-bipy)]Cl·5.5H_(2)O (2-D)、[Co(L-hpg)_(2)(5,5'-BM-2,2'-bipy)]Cl·5.5H_(2)O (2-L)。通过单晶X射线衍射、元素分析、红外光谱、粉末X射线衍射等多种测试方法对其结构进行分析和表征。配合物的单晶X射线衍射数据表明,配合物1-D和1-L属于单斜晶系,P2_(1)手性空间群,分别呈现1D左手螺旋链和右手螺旋链,通过4,4'-bipy分子扩展为2D网状矩形格子结构。配合物2-D属于单斜晶系,P2_(1)手性空间群,为0D小分子,在氢键的作用下形成1D超分子双链,并以ABAB形式在a轴方向堆积排布。这些配合物的结构差异归因于辅助配体和Hhpg配位模式的影响。此外,还研究了配合物的电化学性质。配合物1-D表现出电化学可逆的氧化还原行为,并可作为电化学传感器用于有效地检测组氨酸对映体和定量测定组氨酸混合物中的对映体过量。

对羟基苯甘氨酸母液中一种杂质的分离与结构确证

经萃取、解离、析晶、过滤等操作,提取对羟基苯甘氨酸母液中的一种杂质双(4-羟基苯基)乙酸。考察了萃取剂及萃取条件、析晶时间等参数对杂质提取效果的影响。优化条件下,杂质纯度达99.1%(HPLC)。杂质结构经MS、^(1)HNMR、^(13)CNMR、2DNMR等表征确证。

基因工程酶法生产N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸反应条件的优化(英文)

为了实现利用生物酶转化法生产D 对羟基苯甘氨酸 ,以工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞作酶源 ,对底物对羟基苯海因到中间体N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶转化条件进行了优化 .酶转化的最适温度为 37℃ ,最适pH为 9 0 .在Tris HCl、磷酸盐、碳酸盐和硼酸盐 4种缓冲体系中 ,底物对羟基苯海因的转化率相近 .菌体细胞经适当冻融后 ,底物对羟基苯海因的转化率被提高 .水溶性有机溶剂DMSF、DMF和Tween 80使对羟基苯海因的转化率降低 .转化时底物和菌体的合适比例为 30g L对羟基苯海因和 10g L湿菌体 .经工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞催化 ,底物的转化率在 13h内可达到 96 % .所制备的产物熔点。

用基因工程菌酶法和化学法制备-D-对羟基苯甘氨酸(英文)

D 对羟基苯甘氨酸 (D p HPG)是制备羟氨苄青霉素、羟氨苄头孢菌素和羟氨唑头孢菌素等β 内酰胺类抗生素的重要中间体 ,同时它也用于多种多肽类激素及农药的合成 .在D 对羟基苯甘氨酸的多种制备方法中 ,生物酶转化法具有原料易得、工艺简单、耗能少、产率高、成本低、光学纯度好、三废污染少等优势 .为利用生物酶转化法制备D 对羟基苯甘氨酸 ,首先用尿素、乙醛酸和苯酚合成底物D ,L 对羟基苯海因 ,然后利用D 海因酶基因工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht细胞作酶源 ,进行底物D ,L 对羟基苯海因到中间体N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸的酶法转化 ,最后用化学法将N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸进一步转化为D 对羟基苯甘氨酸 .结果表明 ,底物D ,L 对羟基苯海因的收率为 60 % .8L体积的发酵小试实验表明 ,发酵 12h ,工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht的海因酶活力为 30 0 0U L ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳薄层扫描结果显示海因酶表达量约占菌体总可溶性蛋白质的 60 % ,菌体收率为 6% .8L体积的海因酶转化实验表明 ,在 4 %底物D ,L 对羟基苯海因和 1%菌体 (湿重 )pH 9 0情况下 ,反应 5h ,D ,L 对羟基苯海因的转化率可达 96% .在酸性条件下 ,用NaNO2 将N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸转化为D 对羟基苯甘氨酸 ,反应 2h ,转?

活性天然产物19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷快速富集

19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷是一种重要的天然来源的三萜类成分,具有良好的抗神经炎症、抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,是一种潜在的抗阿尔茨海默病(AD)的先导药物,具有深入研究价值。介绍了一种在金樱子果实中快速富集19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的新方法,并研究其与潜在抗AD活性靶点的分子对接。以94 g金樱子果实粉末中提取该化合物为例,通过自制减压真空色谱装置,利用少量流动相,快速便捷地得到19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷0.172 5 g。此外,该化合物与靶蛋白结合能为-24.7 kJ·mol^(-1)。结果表明:19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷具有潜在的抗AD活性,提取的方法具有样品耗损低、操作方便、快速稳定、得率高等优点,在一定程度上为环境保护做出了贡献。

结晶母液回收D-对羟基苯甘氨酸的工艺优化研究

D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)是合成甜味剂、药物的重要中间体,为降低工艺成本,提高产品质量,提出了一种结晶母液回收D-HPG的连续色谱新工艺。优选纳滤膜进行前处理,增浓结晶母液,筛选Applexion NF200纳滤膜增浓D-HPG效果较好。通过单柱实验筛选连续色谱系统填料树脂,其中Applexion XA945树脂对D-HPG和硫酸铵分离度可达16。进一步对色谱系统的分离效果进行研究,结果表明,经连续色谱分离后,进料液中D-HPG平均纯度由42.2%提高至96.3%,平均收率达91%。利用连续色谱系统从结晶母液中回收D-HPG,是较有前途的工艺。与传统工艺相比,新工艺既保证了D-HPG总收率,又降低其工艺成本,提高了产品质量。

脂肪酶催化外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯水解制备对映体纯D-对羟基苯甘氨酸的新方法

基于在反应体系中添加碳酸氢铵可有效地促进酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解这一有趣现象的发现 ,探讨了利用有机介质中酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解制备对映体纯 D 对羟基苯甘氨酸及其衍生物的可能性 ,研究了不同来源的酶、摇床转速、水含量、对羟基苯甘氨酸甲酯浓度、反应介质及温度等因素对该反应的影响 .结果表明 ,在所研究的 11种酶中脂肪酶Novozym 4 35对该反应的催化活性和对映体选择性较高 ,叔丁醇为最合适的反应介质 ,最适水含量为0 4 % (V/V) ,对羟基苯甘氨酸甲酯的适宜浓度为 2 0mmol/L ,最适摇床转速和反应温度分别为 130r/min和 30℃ .在此优化条件下反应 2 6h后 ,底物转化率和产物ee分别为 39 8%和 95 2 % .

双酶法合成D-(-)-对羟基苯甘氨酸

目的 研究用土壤杆菌CPU12 95完整细胞双酶转化法生产D ( ) 对羟基苯甘氨酸。方法 通过测定D 海因酶及D 氨甲酰酶的比活力来选择发酵和转化反应条件。结果 经优化 ,两酶化活力分别达到 1.3u/ml发酵液和 0 .46u/ml发酵液 ,终产物经鉴定为D ( ) 对羟基苯甘氨酸。结论 本法是一种有发展前途的生产工艺。

化学酶法合成D-对羟基苯甘氨酸

采用乙二醛、苯酚和尿素为原料化学合成底物ＤＬ－对羟基苯乙内酰脲。以沟槽假单孢菌ＣＰＵ１６２８或放线形土壤杆菌ＣＰＵ１２１１为酶源，将ＤＬ－对羟基苯乙内酰脲生物转化为Ｄ－对羟基苯甘氨酸，产率分别为８６％和８０％。

树脂吸附法处理D-对羟基苯甘氨酸生产中含酚废水的研究

用XH - 30 3大孔吸附树脂处理D 对羟基苯甘氨酸生产中产生的含酚废水 ,除酚率99 9% ,最大单程处理量为树脂体积的 2 5倍 ,脱附液经酸化处理后可直接用于DL 对羟基苯甘氨酸的合成 ,不产生二次污染 ,并可使合成收率提高 5 %～ 10 %。

D-对羟基苯甘氨酸的酶法生产工艺研究

利用自行从土壤中分离的假单胞菌 sp.2 2 6 2产生的酶 ,在诱导剂的作用下 ,建立了以 DL-对羟基苯海因为底物制备 D-对羟基苯甘氨酸的方法 ,确定了发酵及酶转化的最佳工艺条件。

高效液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸

建立了反应体系中 D-对羟基苯甘氨酸、N-氨甲酰 - D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因 3者含量的测定方法。采用高效液相色谱法测定 ,以 Kromasil- C18为固定相 ,φ(乙腈 )∶ φ(水 )∶ φ(磷酸 (85 % ) ) =10∶ 90∶0 .0 1为流动相 ,紫外检测波长为 2 10 nm。3者回收率分别为 99.5 % ,98.6 %及 99.6 % ,RSD为 0 .11% ,0 .13%和0 .2 1%。实验结果表明该法简便、快速。

用sp.2262菌制备D-对羟基苯甘氨酸反应动力学

研究了以DL -对羟基苯海因为原料 ,用sp 2 2 62恶臭假单胞菌 (Pseudomonasputida)直接酶催化生产D -对羟基苯甘氨酸的反应动力学 .考察了DL -对羟基苯海因溶解过程和海因酶、氨甲酰水解酶酶解反应的动力学特性 .建立了全过程的动力学模型并进行了计算 ,求解了过程的参数值 ,讨论了 pH值对各参数的影响 ,确定了反应的优化操作条件 .

对羟基苯甘氨酸的合成

对羟基苯甘氨酸（１）是广谱抗生素阿莫西林［１］、头孢哌酮（ｃｅｆｏｐｅｒａｚｏｎｅ）、头孢罗奇（ｃｅｆｏｐｒｏｚｉｌ）等的中间体［２］。国内原合成路线是以茴香醛为原料，经环合、碱水解和脱甲基而得（图１）。该反应中使用剧毒的ＮａＣＮ，且茴香醛价格昂贵，...

对羟基苯甘氨酸的合成及拆分技术进展

综述了近年来对羟基苯甘氨酸的合成及拆分技术进展 ,其中包括 5种合成方法 。

对羟基苯甘氨酸在水-丙酮-硫酸混合溶剂中的溶解度及介稳区

分别采用恒温溶解法和变温溶解法测定了对羟基苯甘氨酸在水-丙酮-硫酸混合溶剂中的溶解度曲线和超溶解度曲线,利用激光监视装置检测测定系统中晶体的消失和产生,实验温度范围约为303～323K.随着混合溶剂中水的增加,溶解度略有增加;酸度增加,溶解度有较大幅度的增加.用经验方程二次多项式关联溶解度与温度的关系,计算的溶解度和实验值符合良好.测得的超溶解度曲线与溶懈度曲线基本平行,介稳区宽度以最大过冷度表示约为1.5～2.4K,温度升高时介稳区宽度略有减少.溶剂中水含量或硫酸含量增加将使介稳区宽度变小;降低搅拌速度使介稳区明显变宽.实验结果可应用于优先结晶法拆分对羟基苯甘氨酸.

D-对羟基苯甘氨酸的合成

以水为溶剂 ,取代芳磺酸为拆分剂 ,用诱导结晶法 ,经成盐、拆分、水解过程 ,将DL-对羟基苯甘氨酸拆分成 D-对羟基苯甘氨酸。考察了 DL-对羟基苯甘氨酸与取代芳磺酸的质量比对成盐反应的影响、取代芳磺酸的质量分数对诱导结晶温度的影响及养晶时间对拆分收率和纯度的影响 ,优化了其工艺条件。结果表明 :DL-对羟基苯甘氨酸与取代芳磺酸的质量比为 2 5 ,取代芳磺酸的质量分数为 2 7.5 % ,养晶时间控制在 8～ 1 0 min,产品收率最高 ,为 93%。同时 ,采用 IR、13C- NMR及 1H-

DL-对羟基苯甘氨酸的合成

ＤＬ－对羟基苯甘氨酸的合成靳通收，韩文炎，张能芳，李记太，李慧章（河北大学化学系，保定０７１００２）ＤＬ－对羟基苯甘氨酸是合成广谱抗生素羟氨节青霉素和羟氨苄头孢菌紊的重要原料。目前此类药物在我国尚处于研究阶段，因而研究对羟基苯甘氨酸的合成方法，以便此...