塞来昔布关键中间体HPLC含量测定方法的建立

为建立合成塞来昔布关键中间体对肼基苯磺酰胺盐酸盐的质量标准,测定对肼基苯磺酰胺盐酸盐的含量。采用高效液相色谱法,色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6×250mm,5μm);流动相:缓冲液(1.65 g庚烷磺酸钠置于1 000 m L容量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,用三氟乙酸调pH值至2.5)∶乙腈=88∶12;流速为1.0 m L/min;进样量为20μL;检测波长为233 nm;柱温为25℃。结果显示:该中间体的峰面积与浓度呈良好的线性关系,加样平均回收率为99.77%,相对标准偏差RSD为0.40%。结果表明,该方法方便、准确、可靠,可用于测定对肼基苯磺酰胺盐酸盐的含量。

LC-MS法测定塞来昔布中2个苯肼类基因毒性杂质

目的:建立液相色谱-质谱(LC-MS)法测定塞来昔布中对肼基苯磺酰胺(SHH)和对甲苯腙基苯磺酰胺(MAP) 2个苯肼类基因毒性杂质。方法:采用Thermo BDS Hypersil C18(100 mm×4.6 mm,2.4μm)色谱柱,以0.1%甲酸铵-0.1%甲酸水溶液∶甲醇(90∶10)溶液为流动相A,以甲醇为流动相B进行线性梯度洗脱。样品中加入5%二巯基苏糖醇的醋酸铵缓冲液作为稳定剂,在质谱电喷雾正离子化多反应监测模式下,以内标法进行定量测定。结果:SHH和MAP在20~200 ng·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好;平均回收率分别为99.7%(RSD=6.0%,n=9)和97.6%(RSD=5.1%,n=9)。检测限为10 ng·mL^(-1),定量限为20 ng·mL^(-1),对照溶液和供试品溶液于4℃进样盘放置4 h内稳定。结论:本实验建立的LC-MS测定法适用于塞来昔布中SHH和MAP 2个苯肼类基因毒性杂质的检测。