温肾健脾法联合耳穴埋豆对腹泻型肠易激综合征的疗效观察

目的探讨温肾健脾法联合耳穴埋豆对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)患者的临床疗效。方法选择中国中医科学院望京医院于2020年6月—2022年6月收治的IBS-D患者104例为研究对象,依据随机数表法,分为对照组和观察组各52例。对照组接受温肾健脾法治疗,观察组在对照组的基础上接受耳穴埋豆。治疗4周后,比较两组临床疗效、症状评分、肠易激综合征生活质量评分(irritable bowel syndrome-quality of life,IBS-QOL)及胃肠激素[包括血清5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、P物质(substance P,SP)、生长抑素(somatostatin,SS)、胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)]水平。结果观察组总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组症状及IBS-QOL评分相比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组症状评分明显低于治疗前,IBS-QOL评分明显高于治疗前,且观察组症状评分明显低于对照组,IBS-QOL评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组5-HT、VIP、SP、SS、CCK水平相比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组5-HT、VIP、SP、CCK水平明显低于对照组,SS水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温肾健脾法联合耳穴埋豆应用于IBS-D患者可显著提升临床疗效,改善症状及生活质量评分,同时还能有效改善胃肠激素水平,值得推广应用。

四神丸对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠MCT、c-fos表达的影响

目的观察四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠结肠MCT、c-fos表达的影响。方法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、匹维溴铵组(15.23 mg/kg)和四神丸组(7.32 mg/kg),每组10只,采用番泻叶灌胃联合避水应激法造模,灌胃给药14 d后,观察一般状态,测定体质量、粪便含水量和AWR评分,ELISA法检测血清MCT、c-fos水平,免疫组织化学法、Western blot法分别检测结肠组织MCT、c-fos蛋白定位及表达,RT-qPCR法检测结肠组织MCT、c-fos mRNA表达。结果与模型组比较,四神丸组和匹维溴铵组大鼠一般状态明显好转,体质量升高(P<0.01),粪便含水量、AWR评分以及血清中MCT、c-fos水平均降低(P<0.05,P<0.01),结肠组织MCT、c-fos蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05,P<0.01);四神丸组结肠组织MCT蛋白表达及c-fos蛋白表达均低于匹维溴铵组(P<0.05)。结论四神丸对IBS-D大鼠内脏敏感的保护机制可能与调节结肠肥大细胞活化指标MCT、c-fos的表达有关。

仙鹤草-白术对腹泻型肠易激综合征脾虚湿阻证患者的疗效观察

目的探讨仙鹤草-白术治疗腹泻型肠易激综合征脾虚湿阻证的临床效果及机制。方法将120例患者随机分为治疗组和对照组,每组60例。治疗组予以仙鹤草-白术汤剂口服治疗,对照组予以培菲康联合蒙脱石散口服治疗,疗程1个月。观察治疗后2组主要症状改善情况、综合疗效以及治疗前后血清5-羟色胺(5-HT)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果治疗组腹胀或腹痛症状改善率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗后血清5-HT、IL-1β均下降,但治疗组较对照组下降更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组腹痛积分和腹泻积分下降,且治疗组较对照组下降更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗后汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分和肠易激综合征生活质量量表(IBS-QOL)评分均较治疗前下降,且治疗组HAMA评分和IBS-QOL评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论仙鹤草-白术可能通过降低5-HT、IL-1β的分泌水平,达到治疗腹泻型肠易激综合征脾虚湿阻证的作用。

基于NGF/PI3K/TRPV1信号通路探究参苓白术散对腹泻型肠易激综合征小鼠的干预机制

目的研究基于神经生长因子/磷脂酰肌醇3-激酶/瞬时受体电位香草酸受体1(NGF/PI3K/TRPV1)信号通路探究参苓白术散对腹泻型肠易激综合征小鼠的干预机制。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,其中空白组10只,模型组13只、研究1组7只、研究2组9只。对照组、模型组只进行生理盐水灌胃,不做其他任何处理。研究1组给予匹维溴铵片20mg/kg水溶液进行灌胃,研究2组给予参苓白术散4g/kg进行灌胃。评估Bristol评分情况;分析脾脏系数、胸腺系数情况;检测IgA、IgG、IgM、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平及NGF/PI3K/TRPV1蛋白表达情况。结果相比于空白组,模型组、研究1组、研究2组Bristol评分、脾脏系数、胸腺系数、IgA、IgG、IgM、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及NGF、PI3K、TRPV1蛋白表达均上升(P<0.05);相比于模型组、研究1组,研究2组Bristol评分、脾脏系数、胸腺系数、IgA、IgG、IgM、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及NGF、PI3K、TRPV1蛋白表达均下降(P<0.05)。结论参苓白术散抑制NGF/PI3K/TRPV1通路,改善大鼠胃肠功能及大便状态,减轻炎症反应,提高免疫功能稳态情况,干预效果显著。

四神丸对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT信号通路表达的影响

目的通过研究四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠5-羟色胺(5-HT)信号通路表达的影响,进一步揭示其治疗IBS-D的内脏敏感机制。方法SD大鼠32只,随机分为正常组、模型组、四神丸组和得舒特组,采用番泻叶灌胃联合避水应激法制备IBS-D大鼠模型,给药14d后进行Bristol粪便性状量表评分,依据腹壁撤退反射评定内脏疼痛阈值,ELISA法检测血清5-HT、SERT含量,免疫组化法检测结肠组织5-HT的阳性表达,Westernblotting法检测结肠组织5-HT4R的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠Bristol粪便性状量表评分升高,内脏疼痛阈值降低,血清中5-HT含量增加、SERT含量减少,结肠组织中5-HT的阳性表达升高、5-HT4R的蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,四神丸组大鼠Bristol粪便性状量表评分降低、内脏疼痛阈值升高,血清5-HT含量减少,SERT含量增加,结肠组织5-HT的阳性表达降低、5-HT4R的蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),且对5-HT、5-HT4R表达的影响四神丸组优于得舒特组(P<0.05)。结论四神丸治疗IBS-D的内脏敏感机制可能与调节5-HT信号通路的表达有关。

参苓白术散加减对腹泻型肠易激综合征脾虚湿盛证患者血清胃肠激素水平的影响

目的探讨腹泻型肠易激综合征(IBS-D)脾虚湿盛证患者应用参苓白术散加减治疗的效果。方法选取2020年10月至2022年10月该院收治的78例IBS-D脾虚湿盛证患者为研究对象,按照随机数字表法分为观察组与对照组,各39例。对照组采用匹维溴铵治疗,观察组联合参苓白术散加减治疗,均连续治疗4周。比较两组总有效率、降钙素基因相关肽(CGRP)、血管活性肠肽(VIP)、5-羟色胺(5-HT)、胆囊收缩素(CCK)水平,以及中医证候总积分、生活质量、不良反应。结果治疗前,观察组与对照组CGRP、VIP、5-HT、CCK水平,中医证候总积分,IBS生活质量量表(IBS-QOL)评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组总有效率(94.87%)高于对照组(79.92%),CGRP、VIP、5-HT、CCK水平及中医证候总积分均低于对照组,IBS-QOL评分高于观察组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组均未见明显不良反应。结论匹维溴铵治疗基础上联合参苓白术散加减治疗IBS-D脾虚湿盛证患者效果确切,且具有良好的安全性,值得临床推广应用。

外台六物黄芩汤对腹泻型肠易激综合征寒热错杂证患者生活质量及肠道菌群的影响

[目的]探讨外台六物黄芩汤对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)寒热错杂证患者的生活质量及肠道菌群多样性和菌群结构的影响。[方法]选取IBS-D寒热错杂证患者30例,予外台六物黄芩汤治疗3周,分别于治疗前、治疗后、疗程结束后4周使用SF-36量表、IBS病情严重程度量表(IBS-SSS)、汉密顿焦虑量表(HAMA)、汉密顿抑郁量表(HAMD)和中医证候评定量表进行评分。同时分别收集患者治疗开始当天、治疗结束当天的粪便标本,并随机抽取10例粪便样本进行肠道菌群分析。[结果]治疗后及疗程结束后4周IBS-D患者的SF-36量表评分升高,IBS-SSS评分、HAMA评分、HAMD评分降低。30例患者中显效8例,有效19例,无效3例,证候疗效总有效率为90.00%。患者肠杆菌科的丰度较治疗前降低(P<0.05)。10例粪便样本中,共有7例治疗后出现双歧杆菌与肠杆菌科的比值(B/E值)升高。[结论]外台六物黄芩汤可有效改善IBS-D寒热错杂证患者的临床症状,并对患者的精神心理情况有一定的调节作用,有利于提高患者的生活质量,其作用机制可能与调节肠道菌群的结构及丰度有关。

柔肝止泻方对腹泻型肠易激综合征肝气乘脾证大鼠模型的干预效应及机制研究

目的:从肠黏膜通透性及肠道炎症角度探讨柔肝止泻方对肝气乘脾型腹泻型肠易激综合征的干预效应及机制。方法:50只SPF级Wistar雌性大鼠中随机选取8只作为空白组,其余制备肝气乘脾型腹泻型肠易激综合征(IBS-D)病证结合大鼠模型。造模后将40只成模大鼠随机分为模型组、匹维溴铵组及柔肝止泻方低、中、高剂量组,每组8只,分别给予生理盐水、匹维溴铵及不同剂量的柔肝止泻方(0.86、1.72、3.44 g·kg-1),灌胃14 d后取材。记录体质量、粪便含水量,并行相关行为学实验;光镜下观察HE染色后结肠组织形态,并于透射电镜下观察肠黏膜超微结构变化;采用ELISA法检测大鼠血浆中D-乳酸和血清中TNF-α、IL-6、IFN-γ的含量;采用Western blot法及RT-qPCR法检测大鼠结肠组织中MMP9、p38MAPK、MLCK、occludin蛋白以及mRNA的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量下降、粪便含水量增加及新奇抑制摄食潜伏期延长(P<0.01);与模型组比较,柔肝止泻方各剂量组大鼠体质量增加、粪便含水量减少及新奇抑制摄食潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01)。HE染色显示,各组大鼠结肠组织结构完整,未见明显的病理性改变。透射电镜可见,模型组肠上皮细胞间隙显著增宽,紧密连接及缝隙连接结构模糊,桥粒显著减少,绒毛稀疏、不齐,柔肝止泻方各剂量组肠上皮细胞间隙明显缩小,顶端连接复合体结构清晰,绒毛整密。与空白组比较,模型组大鼠D-乳酸及炎症因子含量增加(P<0.05,P<0.01),结肠组织中MMP9、p38MAPK、MLCK的蛋白及mRNA表达水平均升高(P<0.05,P<0.01),occludin的表达水平下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,柔肝止泻方各剂量组D-乳酸及炎症因子含量降低(P<0.05,P<0.01),结肠组织中MMP9、p38MAPK、MLCK的蛋白及mRNA表达水平均下调(P<0.05,P<0.01),occludin水平上调(P<0.01)。结论:柔肝止泻方可改善肝气乘脾型IBS-D大鼠模型肠黏膜通透性及肠道炎症,可能是通过减少炎症因子,抑制MMP9激活p38MAPK/MLCK信号通路发挥干预效应。

黄芪建中汤联合艾灸对腹泻型肠易激综合征患者临床症状、炎症反应以及胃肠激素的影响

目的探究黄芪建中汤联合艾灸对腹泻型肠易激综合征(diarrheal irritable bowel syndrome,IBS-D)患者的临床症状、炎症反应以及胃肠激素的影响。方法选取2020年1月—2022年10月期间该院接收的IBS-D患者80例,采用随机数表法分为观察组(40例)和对照组(40例)。所有患者均行常规西药治疗,对照组给予艾灸,观察组在其基础上联合黄芪建中汤治疗。对比两组患者的治疗疗效,治疗前后炎症指标[可溶性白细胞介素2受体(soluble interleukin-2 receptor,SIL-2R)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)]以及胃肠激素指标[胃泌素(gastrin,GAS)、胃动素(motilin,MTL)、生长抑素(somatostatin,SS)]血清浓度变化。同时采用IBS生活质量问卷(IBS quality of life questionnaire,IBS-QOL)、汉密顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)评估所有患者心理状态以及生活质量变化。结果观察组患者的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组血清SIL-2R、L-1β、TNF-α以及SS均低于对照组(P<0.05),MTL、GAS浓度高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组HAMD评分低于对照组(P<0.05),IBS-QPL评分高于对照组(P<0.05)。结论黄芪建中汤联合艾灸对可以有效改善IBS-D患者的临床症状,改善其炎症水平以及胃肠功能,缓解其不良情绪、改善患者的生活质量。

基于SCF/C-kit通路探讨三焦针法对腹泻型肠易激综合征大鼠的影响

目的 观察三焦针法对腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome with diarrhea, IBS-D)大鼠胃肠动力异常及结肠组织干细胞因子(stem cell factor, SCF)、酪氨酸激酶受体(tyrosine kinase receptor, C-kit) mRNA和蛋白表达的影响,探讨三焦针法治疗IBS-D的作用机制。方法 wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和三焦组,每组6只。除空白组外,其余各组采用“冰醋酸灌肠+束缚应激”建立IBS-D大鼠模型。西药组予匹维溴胺灌胃(15 mg/kg),三焦组针刺膻中、中脘、气海、血海(双侧)及足三里(双侧),诸穴行捻转补法30秒,1次/d,均治疗14天。观察大鼠一般状态;测定体质量、旷场实验(大鼠横向运动和纵向运动)、稀便率、腹壁撤退反射(abdominal retraction reflex, AWR)3分阈值时注水量;RT-PCR法、Western blot法检测结肠组织SCF、C-kit mRNA及蛋白表达。结果 与空白组相比,IBS-D模型大鼠一般状态较差,体质量显著降低(P<0.01),旷场实验检测横向运动距离与纵向运动次数显著降低(P<0.01),稀便率显著增高(P<0.01),AWR3分时注水量显著降低(P<0.01),结肠组织中SCF、C-kit mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,西药组、三焦组大鼠体质量显著升高(P<0.01,P<0.05),横向运动距离与纵向运动次数均显著升高(P<0.05,P<0.01),稀便率显著下调(P<0.01),AWR3分时注水量显著提升(P<0.01),三焦组大鼠结肠组织中SCF、C-kit mRNA及蛋白水平表达均显著降低(P<0.01),而西药组SCF、C-kit mRNA及蛋白表达无统计学意义(P>0.05)。结论 三焦针法可改善IBS-D大鼠症状,可能是与调节结肠组织中SCF、C-kit mRNA及蛋白表达水平有关。

电针足三里对腹泻型肠易激综合征模型大鼠EC细胞及内脏敏感性的影响

目的:探究电针刺激大鼠足三里穴对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠EC细胞、5-HT、TPH1的影响,分析其作用机制。方法:18只成年雄性大鼠,随机分为空白组6只和造模组12只,造模组采用慢性束缚应激联合番泻叶灌胃法建立IBS-D模型;造模成功后,12只大鼠随机分为模型组和电针组各6只,空白组和模型组不予电针干预,电针组进行足三里穴的电针刺激,每日1次,留针20 min,持续进行7 d。观察大鼠体质量增长值、结直肠扩张(CRD)和腹壁撤退反射(AWR)评分、腹泻指数,并运用免疫组化检测EC细胞数量的变化,ELISA检测5-HT表达水平,PCR检测TPH1 mRNA表达情况,Western blot检测大鼠TPH1蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量增长值明显降低,腹泻指数显著升高,CRD容量阈值降低,AWR评分升高,EC细胞数量、5-HT浓度、TPH1 mRNA增高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠腹泻指数降低,CRD容量阈值升高,AWR评分降低,EC细胞数量、5-HT浓度、TPH1 mRNA降低(P<0.01,P<0.05)。结论:电针足三里穴能降低IBS-D大鼠内脏敏感性,有效减轻腹泻症状,其作用机制可能是影响EC细胞、TPH1的表达,促使5-HT表达水平下降,从而调控IBS-D大鼠内脏敏感性。

基于网络药理学和分子对接技术揭示石榴皮对腹泻型肠易激综合征的潜在机制研究

目的探究石榴皮对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的潜在防治机制,为临床用药及新药研制提供理论依据。方法通过TCMSP数据库,设置筛选条件,找到石榴皮的活性成分及相关靶点,并从DrugBank、GeneCards、OMIM、PharmGkb以及TTD公共数据库中整理出的疾病靶点基因,取出交集靶点。首先,通过R软件对交集靶点进行基因本体论富集分析(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,明确石榴皮对IBS-D潜在的通路信息和分子机制。其次,在STRING数据库中对交集靶点进行PPI网络构建,找到核心靶点。最后,将核心靶点与对应的化合物进行分子对接验证,观察两者是否能够较好结合。结果石榴皮的活性化合物槲皮素、木犀草素、山奈酚、β-谷甾醇等能够有效作用于核心靶点肿瘤蛋白P53(TP53)、蛋白激酶B(AKT1)、胱天蛋白酶3(CASP3)、B-细胞淋巴瘤因子2(BCL2)、肿瘤坏死因子(TNF)等,其KEGG富集于脂质与动脉粥样硬化、PI3K-Akt、化学致癌作用等信号通路,并通过分子对接提示核心靶点和活性化合物能够高效结合。结论石榴皮通过多靶点、多通路发挥出降低肠道炎症和抗氧化的作用,对IBS-D有着良好的防治效果。

盐酸洛哌丁胺联合痛泻宁颗粒对腹泻型肠易激综合征的临床疗效

目的观察盐酸洛哌丁胺联合痛泻宁颗粒对腹泻型肠易激综合征(IBS)的临床疗效。方法收集60例腹泻型IBS患者的临床资料,按照治疗方案的不同将患者分为观察组(盐酸洛哌丁胺与痛泻宁颗粒联用)和对照组(盐酸洛哌丁胺单用),每组30例。治疗4周后,评估并比较2组患者治疗前后腹痛评分、腹泻评分、症状总评分。结果治疗前,2组患者腹痛评分、腹泻评分、症状总评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);对照组治疗后的腹痛评分、腹泻评分、症状总评分与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组腹痛评分、腹泻评分、症状总评分均低于治疗前,且均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。用药期间,2组患者均未观察到明显不良反应。结论盐酸洛哌丁胺与痛泻宁颗粒联用对腹泻型IBS患者疗效显著,且用药安全性良好。

基于尺肤理论的针药联合模式对腹泻型肠易激综合征患者内脏敏感度改善效果及病情严重程度与肿瘤坏死因子α、神经肽Y、血管紧张素Ⅱ的相关性研究

目的观察基于尺肤理论的针药联合治疗对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者内脏敏感度改善效果及病情严重程度与肿瘤坏死因子α(TNF-α)、神经肽Y(NPY)、血管紧张素Ⅱ(AT-Ⅱ)的相关性。方法将127例IBS-D患者按照随机数字表法分为西药组(n=39)、中药组(n=43)及针药联合组(n=45),西药组采用匹维溴铵片口服治疗,中药组采用痛泄逍遥方治疗,针药联合组在中药组治疗基础上联合尺肤针刺疗法,3组均治疗4周。比较3组治疗前后IBS病情严重程度量表(IBS-SSS)评分、内脏敏感指数(VSI)评分;观察3组治疗前后直肠容量刺激感觉指标(排便阈值、疼痛阈值、感觉阈值及最大耐受阈值)水平;对比3组治疗前后血清TNF-α、NPY、AT-Ⅱ水平;Pearman相关系数分析IBS-SSS与血清TNF-α、NPY、AT-Ⅱ水平相关性。结果3组治疗后IBS-SSS、VSI评分均较本组治疗前降低(P<0.05),且针药联合组治疗后均低于西药组、中药组(P<0.05),中药组治疗后均低于西药组(P<0.05)。3组治疗后排便、疼痛、感觉、最大耐受阈值均较本组治疗前升高(P<0.05),且针药联合组治疗后均高于西药组、中药组(P<0.05),中药组治疗后均高于西药组(P<0.05)。3组治疗后TNF-α、AT-Ⅱ水平均较本组治疗前降低(P<0.05),NPY水平均升高(P<0.05),且治疗后针药联合组各项改善均优于西药组、中药组(P<0.05),中药组治疗后各项改善均优于西药组(P<0.05)。Pearson相关系数分析显示IBS-SSS评分与TNF-α、AT-Ⅱ呈正相关(P<0.05),与NPY呈负相关(P<0.05)。结论基于尺肤理论的针药联合治疗对提高IBS-D患者临床疗效、降低内脏敏感度等具有积极影响,亦可改善患者机体血清TNF-α、NPY、AT-Ⅱ水平,且本研究进一步证实IBS-D患者病情严重程度与血清TNF-α、NPY、AT-Ⅱ水平密切相关,为后续临床监测患者病情发展情况、制定针对性地有效诊疗方案提供参考。

痛泻要方拆方对腹泻型肠易激综合征大鼠脑肠肽的影响研究

背景肠易激综合征(IBS)是临床常见的肠道疾病,使用痛泻要方治疗确有疗效,但分析方剂中主要显效药物的相关研究较少。目的观察痛泻要方拆方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠结肠、海马体组织脑源性神经营养因子(BDNF)、P物质(SP)表达的影响。方法于2020年7月选取6周龄SPF级雄性Wistar大鼠共32只,采用抽签法随机分为空白组、模型组、白芍防风组(B-F组)和陈皮白术组(C-B组),每组8只。除空白组外,其余各组均使用结直肠扩张+慢性束缚应激法建立内脏敏感型IBS-D大鼠模型。造模后B-F组采用白芍防风中药浸膏(4 ml/kg)灌胃治疗,C-B组采用陈皮白术中药浸膏(4 ml/kg)灌胃治疗,空白组和模型组采用蒸馏水灌胃,治疗周期为14 d。比较造模后、治疗后四组大鼠体质量及增长情况、布里斯托大便分类法评分、不同压力梯度下腹部撤退反射(AWR)、结肠及海马体组织中BDNF和SP表达水平的差异。结果建立IBS-D模型大鼠成功,所有大鼠存活。B-F组、C-B组大鼠造模后体质量增长量小于空白组,治疗后体质量增长量大于模型组(P<0.05)。模型组大鼠治疗后布里斯托大便分类法评分高于空白组(P<0.05);B-F组和C-B组大鼠治疗后布里斯托大便分类法评分低于模型组(P<0.05)。治疗后在气囊压力为60 mm Hg时:模型组大鼠AWR评分均高于空白组(P<0.05)。治疗后在气囊压力为60、80 mm Hg时:B-F组大鼠AWR评分低于模型组、C-B组(P<0.05)。模型组、C-B组大鼠治疗后结肠组织BDNF、SP表达水平高于空白组(P<0.05);B-F组大鼠治疗后结肠组织BDNF、SP表达水平低于模型组和C-B组(P<0.05)。模型组大鼠治疗后海马组织BDNF表达水平低于空白组(P<0.05);模型组、C-B组大鼠治疗后海马组织SP表达水平高于空白组(P<0.05);B-F组大鼠治疗后海马组织BDNF表达水平高于模型组,SP表达水平低于模型组(P<0.05)。结论痛泻要方中白芍防风药对、陈皮白术药对均能明显增加IBS-D大鼠体质量、改善腹泻情况。相较于陈皮白术药对,白芍防风药对可明显缓解IBS-D大鼠肠道高敏感,更好地下调海马组织SP和结肠组织BDNF、SP的表达,上调海马组织BDNF的表达,调节相关脑肠肽的平衡。

痛泻要方对腹泻型肠易激综合征大鼠粪便代谢组学的影响

目的探索痛泻要方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)肝郁脾虚证大鼠粪便中内源性代谢产物的影响,以寻找潜在的生物标志物及相关代谢通路。方法将40只大鼠随机分为4组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠采用慢性束缚应激加番泻叶灌服法建立IBS-D肝郁脾虚证模型。造模成功后,空白组及模型组大鼠给予1 mL/100 g蒸馏水灌胃,痛泻要方组及匹维溴铵组给予1 mL/100 g相应混悬液(0.675 g/mL、1.35 mg/mL)灌胃,均每日1次,连续灌胃14 d。运用LC-MS/MS技术检测各组大鼠粪便中内源性代谢产物,对差异代谢物进行KEGG通路富集分析及MetPA分析。结果模型组与空白组中差异代谢物共47种,痛泻要方组与模型组中差异代谢物共31种,匹维溴铵组与模型组差异代谢物共25种。其中Deoxycholic acid(脱氧胆酸)、Gamma-Tocotrienol(γ-生育三烯醇)、Carboxyifosfamide(羧异环磷酰胺)、25-Acetylvulgaroside(25-乙酰基葡萄糖苷)、N’-Formylkynurenine(N’-甲酰犬尿氨酸)和Hypoxanthine(次黄嘌呤)等代谢物经痛泻要方干预后明显改善。差异代谢物KEGG通路富集分析结果显示痛泻要方富集的通路有13条,Purine metabolism(嘌呤代谢)、Cholesterol metabolism(胆固醇代谢)、Caffeine metabolism(咖啡因代谢)、Arginine biosynthesis(精氨酸生物合成)和Vitamin B_(6) metabolism(维生素B_(6)代谢)富集率差异均有统计学意义(P均<0.05)。MetPA分析显示这些差异代谢物与精氨酸生物合成、色氨酸代谢、次级胆汁酸生物合成、泛醌和其他萜类醌生物合成、胆汁分泌、嘌呤代谢等多种代谢途径相关。结论痛泻要方对IBS-D肝郁脾虚型大鼠的作用可能是通过调节脱氧胆酸、γ-生育三烯醇、羧异环磷酰胺、25-乙酰基葡萄糖苷、次黄嘌呤、黄嘌呤等代谢物质水平,影响精氨酸生物合成、色氨酸代谢、次级胆汁酸生物合成、泛醌和其他萜类醌生物合成、胆汁分泌、嘌呤代谢等相关代谢途径实现的。

基于16S rRNA基因测序探讨加味交泰丸对腹泻型肠易激综合征患者肠道菌群的影响

目的 探究加味交泰丸对腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome, IBS-D)患者肠道菌群的影响。方法 将60例IBS-D患者随机分为中药组和西药组,每组30例。另选健康者10例作为健康对照组。中药组采用加味交泰丸治疗,西药组采用地衣芽孢杆菌治疗。采用IBS严重程度评分系统(irritable bowel syndrome-severity scoring system, IBS-SSS)评估两组患者临床疗效,采用16S rRNA基因测序法检测肠道菌群。结果 两组患者治疗前IBS-SSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,两组患者的IBS-SSS评分均较治疗前显著下降(P<0.05),且中药组评分降低程度更显著(P<0.05)。与健康对照组比较,IBS-D患者的肠道菌群α多样性显著降低(P<0.05),β多样性也有显著差异(P<0.05),但中药及西药治疗对肠道菌群的多样性无显著影响;在属水平上,加味交泰丸治疗显著增加了优势菌Eubacterium_eligens_group、Flavonifractor及Lachnospira,降低了优势菌Eysipelotrichaceae_UCG-007、Scardovia及Senegalimassilia的相对丰度;地衣芽孢杆菌治疗显著增加了优势菌Peptoclostridium,降低了优势菌Collinsella、Lactococcus及Streptococcus的相对丰度。LDA Effect Size分析显示:加味交泰丸及地衣芽孢杆菌治疗都显著改变了肠道菌群的结构,但两者改变的菌群不同,且治疗后的菌群也与健康对照组有所差异。结论 加味交泰丸可改善IBS-D患者临床症状,其对IBS-D患者肠道菌群多样性无显著影响,但可以改变肠道菌群的结构和组成,并且与地衣芽孢杆菌有所差异;加味交泰丸治疗无法逆转IBS-D引起的肠道菌群的失调。

基于生物钟调控探讨肠安菌泰对腹泻型肠易激综合征的作用机制研究

目的基于生物钟调控探讨肠安菌泰对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的疗效及其作用机制。方法通过采用母婴分离、乙酸灌肠联合饥饱失常的方法构建IBS-D小鼠疾病模型。模型评价后,IBS-D小鼠称质量,按照随机数字将IBS-D小鼠分成模型组、肠安菌泰组和匹维溴铵组。给药两周后,评价各组小鼠的IBS-D发病情况,包括糖水偏嗜实验(SPT)、大便含水率测定(FMC)、排便频率(FF)和避水应激实验(WAS)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、E-cadherin,生物钟基因CRY1,炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6),褪黑素合成酶Aanat、Asmt,褪黑素受体MT1、MT2的mRNA表达情况;免疫组化法检测Aanat、褪黑素Melatonin、肥大细胞类胰蛋白酶Tryptase的蛋白表达情况;免疫荧光法检测CRY1、p-IκBα、p65、p-p65的蛋白表达情况;蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)法检测IκBα、p-IκBα、p65、p-p65的蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠糖水偏嗜率SP降低(P<0.01),FMC、FF和WAS均明显升高(P<0.01);而肠安菌泰可不同程度改善上述发病情况(P<0.05,P<0.01)。RT-qPCR结果显示,与正常组比较,模型组小鼠ZO-1、Occludin、E-cadherin、CRY1、Aanat、Asmt、MT1和MT2的mRNA表达水平降低(P<0.01),TNF-α和IL-6的mRNA表达水平升高(P<0.01);而肠安菌泰可不同程度升高ZO-1、Occludin、E-cadherin、CRY1、Aanat、Asmt、MT1和MT2的mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),降低TNF-α和IL-6的mRNA表达水平(P<0.01)。免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组小鼠Aanat和Melatonin的蛋白表达平均光密度值降低(P<0.01),Tryptase蛋白表达平均光密度值升高(P<0.01);而肠安菌泰可上调Aanat和Melatonin的蛋白表达(P<0.01),降低Tryptase蛋白表达(P<0.01)。免疫荧光和WB结果显示,与正常组比较,模型组小鼠CRY1蛋白的相对荧光强度降低(P<0.01),p-IκBα和p-p65的蛋白表达水平升高(P<0.01);而肠安菌泰可提高CRY1蛋白的相对荧光强度(P<0.01),抑制p-IκBα和p-p65蛋白的磷酸化表达(P<0.05,P<0.01)。结论肠安菌泰可调控生物钟,并通过抑制NF-κB信号通路保护IBS-D小鼠肠黏膜屏障。

白芍总苷对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT信号通路的影响

目的:探讨白芍总苷对腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable-bowel syndrome,IBS-D)大鼠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号通路的影响。方法:选无特定病原体健康成年Wistar大鼠68只,雌雄各半,随机分为正常组13只和造模组55只。造模采用束缚联合慢性不可预见性刺激建立IBS-D大鼠模型,正常组大鼠正常饲养。将造模成功的52只大鼠随机分为模型组、匹维溴铵组及白芍总苷低、高剂量组,每组13只。模型组、正常组分别给予蒸馏水灌胃;匹维溴铵组给予匹维溴铵混悬液灌胃;白芍总苷低、高剂量组分别给予对应剂量白芍总苷溶液灌胃。各组大鼠均给药14天。检测比较各组大鼠粪便含水量,不同压力下腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分,结肠组织5-HT阳性细胞数及色氨酸羟化酶1(Tryptophan hydroxylase1,TPH-1)、5-羟色胺受体3(5-HT3 receptors,5-HT3R)、5-羟色胺转运蛋白(serotonin transporter,SERT)表达水平。结果:与模型组比较,各组大鼠粪便含水量较低,40 mm Hg(1 mm Hg≈0.133 kpa)、60 mm Hg压力下AWR评分较低,结肠组织5-HT阳性细胞数及TPH-1、5-HT3R表达水平较低,且白芍总苷低剂量组>白芍总苷高剂量组和匹维溴铵组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,各组大鼠结肠组织SERT表达水平较高,且白芍总苷低剂量组<白芍总苷高剂量组和匹维溴铵组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:白芍总苷能剂量依赖性地改善IBS-D大鼠腹泻症状,降低肠道敏感性,抑制结肠组织5-HT表达,其作用可能与调节5-HT信号通路中的TPH-1、5-HT3R、SERT表达有关。

从“肝脾论治脑肠互动异常”探讨内脏高敏感对腹泻型肠易激综合征的影响及机制

西医学认为内脏高敏感是腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的核心病机,而从“肝脾论治”的角度治疗IBS-D是中医整体观的特点之一。中医学认为IBS-D的主要病机为肝郁脾虚,大多医家从“肝脾”论治IBS-D取得了显著效果。中枢敏化与中医“脑”功能相对应,中医“脑”又与“肝”密不可分;外周敏化对应中医病位在“肠”,其本在“脾”,由此提出,在治疗IBS-D中,中医从“肝脾论治改善脑肠互动”,与西医“降低中枢与外周敏化来改善内脏高敏感”,两种方法内涵相关、功能统一。