寻常型天疱疮抗原EC1-2表位的致病性

目的通过寻常型天疱疮新生鼠模型的建立研究寻常型天疱疮抗原(PVA)致病性表位及其相应抗体的致病作用。方法构建重组PVA细胞外区(EC)1-2片段分子。经亲和层析纯化后,免疫家兔,得到兔抗PVAEC1-2融合蛋白的抗血清。将提纯IgG抗体成分,被动转移到BALB/c新生鼠,15～18h后对新生鼠皮肤、血清进行组织病理、电镜和免疫荧光检查。结果在对实验组新生鼠的评价中,其组织病理示表皮内水疱形成,棘细胞间棘突消失,棘层松解;电镜示棘细胞间距离增宽,桥粒分离、溶解、消失;DIF和IIF均示棘细胞间免疫荧光沉积。而对照组小鼠除了IIF示棘细胞间微弱的荧光沉积外,其余检查均正常。结论通过寻常型天疱疮新生鼠模型的建立,证明PVA分子中EC1-2表位为致病性表位,其相应的抗体为致病性抗体。另外,PVA重组分子的构建,新生鼠模型的建立为天疱疮以及其它自身免疫性疾病的诊断和治疗提供了一个模型。

重组寻常型天疱疮抗原抗血清的制备与纯化

寻常型天疱疮抗原 (pemphigusvulgarisantigen ,PVA )是桥粒中相对分子质量为 130 0 0 0的糖蛋白 ,其分子由细胞外区(extracellulardomain ,EC )、跨膜区和细胞内区三部分组成 ,主要发挥作用的区域在细胞外区。为了了解PVA细胞外区的致病性位点及其相应抗体的致病作用 ,制备抗血清是必需环节。本文在已重组表达的PVAEC1 2融合蛋白的基础上进行蛋白纯化 ,并免疫家兔 ,使之产生针对融合蛋白的特异性抗血清 ,经双向免疫扩散实验 ,其效价为 1:16～ 1:32。采用辛酸沉淀法和DEAE 5 2 纤维素阴离子交换层析进行抗血清IgG抗体成分的提纯 ,总量为 12 5～ 2 2 0mg ,经间接免疫荧光检测 ,其滴度为 1:40。从而获得高滴度、高特异性的兔抗PVAEC1 2融合蛋白抗血清IgG抗体成分。

大疱及疱疹性皮肤病

不同免疫佐剂对寻常型天疱疮抗原ECl-2表位抗体亚型的影响;来氟米特治疗皮质激素减量困难的寻常型天疱疮临床研究;糖尿病并发寻常型天疱疮1例;副肿瘤性天疱疮（综述）;大疱性类天疱疮并获得性血友病A患者血浆IgG亚型及FⅧ结合表位鉴定;大疱性类天疱疮合并神经系统疾病22例临床分析……