PSMA单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡制备和体外寻靶能力实验研究

目的探究前列腺特异性膜抗原(PSMA)单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡的制备方法,对其体外寻靶能力予以观察。方法采用静电吸附法对PSMA单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡进行制备,观察其特性,对抗体与纳米级微泡结合情况予以免疫荧光法检测,采用细胞免疫荧光法对PSMA表达以及在细胞膜上的定位予以鉴定,观察靶向微泡对前列腺癌细胞的寻靶能力,并将胃癌细胞作为对照。结果 PSMA单抗靶向纳米级微泡呈现出均匀分布状态,平均粒径为(626.25±66.02)nm;经过免疫荧光法试验,显示微泡表面存在绿色荧光;对前列腺癌细胞膜给予细胞免疫荧光检测其PSMA呈现出高表达;体外寻靶实验显示靶向微泡能够实现与人前列腺癌LNCAP、C4-2细胞的结合,但其与胃癌MKN45细胞无法结合。结论 PSMA单抗靶向人前列腺癌纳米级脂质微泡体外寻靶能力强,能够实现与前列腺癌细胞的有机结合。

靶向CD147纳米微泡的制备及超声成像能力检测

目的制备靶向CD147纳米微泡造影剂,并评价其理化性质、对肝细胞肝癌(肝癌)细胞的靶向能力及超声成像能力。方法将PLGA-PEG、DSPE-PEG2000-COOH、全氟丙烷饱和水溶液混合,通过偶联反应与CD147抗体结合,制备靶向CD147纳米微泡。将靶向CD147及非靶向纳米微泡分别与MHCC-97H(肝癌细胞)共孵育,检测纳米微泡的寻靶能力。靶向CD147微泡制备后1 d及3 d检测粒径大小,并进行体外及裸鼠体内超声显像。结果制备后1 d靶向微泡粒径(188.1±4.8)nm、3 d为(193.1±11.3)nm。免疫荧光检测显示靶向CD147纳米微泡较非靶向纳米微泡可更多与MHCC-97H细胞结合(P<0.01)。制备后1 d及3 d,靶向CD147纳米微泡可均匀分布于PBS中,在裸鼠体内有较好的超声成像能力。结论制备的靶向CD147纳米微泡理化性质稳定,可与肝癌细胞特异性结合,在体外及体内均具有较好的超声成像能力,可作为一种特异结合肝癌细胞的超声分子显像及肝癌治疗的分子探针。

新型携PSMA抗体纳泡用于前列腺癌的靶向分子超声成像

目的构建携前列腺特异性膜抗原(PSMA)抗体靶向纳米气泡(纳泡),初步验证其体外寻靶能力以及超声造影显像的效果。方法采用薄膜水化法直接制备出纳米级微泡,并应用生物素-亲和素桥联法获得PSMA抗体靶向的纳泡;粒径检测仪/纳米颗粒跟踪分析仪检测所构建靶向纳泡的平均粒径、电位和浓度;采用细胞免疫荧光法对人前列腺癌LNcap和PC3细胞的PSMA表达以及在细胞膜上的定位进行鉴定;观察靶向纳泡的体外寻靶能力并检测其在体外和在裸鼠前列腺癌移植瘤中的超声造影显像。结果制备完成的携PSMA抗体纳泡的平均粒径为(4937±194)nm,显著高于空白纳泡的(3980±86)nm(P<0.05),分布均匀,两种纳泡体外超声造影显像良好。细胞免疫荧光检测示,LNcap细胞高表达PSMA,PC3细胞低表达PSMA。流式细胞术观察体外寻靶实验示,917%的LNcap细胞观察到与靶向纳泡上PSMA抗体结合的荧光,PC3细胞中并未观测到荧光。在体超声成像示,在LNcap移植瘤中靶向纳泡的达峰强度明显高于空白纳泡,增强显影效果更好。结论携PSMA抗体纳泡体外寻靶能力强,在PSMA阳性前列腺癌移植瘤中的超声造影显像效果优异。