不同临床病理特征卵巢浆液性肿瘤患者E-cadherin、BRCA1及P53的表达变化研究

目的:探究不同卵巢浆液性肿瘤中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)、P53的表达变化情况。方法:选取2017年12月—2022年2月赣州市妇幼保健院的50例卵巢浆液性癌患者为A组,同时期的40例卵巢交界性浆液性肿瘤患者为B组,30例卵巢良性浆液性囊腺瘤患者为C组。检测及比较三组的组织E-cadherin、BRCA1、P53表达情况,并比较A组中不同年龄、淋巴结转移情况、FIGO分期及不同病理分级者的检测结果。结果:A组的E-cadherin及BRCA1阳性率显著均低于B组及C组,B组则显著均低于C组(P<0.05);A组P53阳性率显著高于B组及C组,B组则显著高于C组(P<0.05)。A组中低级别浆液性癌者E-cadherin和BRCA1阳性率均高于高级别浆液性癌者,低级别浆液性癌者P53阳性率显著低于高级别浆液性癌者,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组中不同年龄及FIGO分期者的组织E-cadherin、BRCA1及P53阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。A组有淋巴结转移者E-cadherin和BRCA1阳性率均低于无淋巴结转移者,有淋巴结转移者P53阳性率高于无淋巴结转移者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢浆液性癌患者中E-cadherin及BRCA1呈低表达,而P53呈高表达,且不同临床病理情况者存在差异,因此在卵巢浆液性癌的早期筛查检测中有一定的参考价值。

外源性P_(53)基因转染的人肝癌细胞化疗药物敏感性的研究

目的 探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG 2化疗敏感性的影响。方法 将人野生型P53基因表达载体导入HepG 2细胞中,经筛选和鉴定后,采用MTT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16 )作用后的HepG 2细胞生长抑制及凋亡的影响。结果 外源性P53基因在转染细胞中有效表达。增强了MTX和VP16对HepG 2细胞生长抑制并促进了药物诱导的细胞凋亡。结论 外源性P53基因能增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性。

外源性p53基因增加卵巢癌细胞对顺铂的敏感性

目的 探讨外源性ｐ５３基因转染对人卵巢癌细胞株的化疗敏感性的影响。方法用脂质体介导的转染技术，将人野生型ｐ５３基因的真核表达载体导入不表达ｐ５３的卵巢癌ＳＫＯＶ－３细胞中，经Ｇ４１８筛选，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定后，观察其对顺铂作用后的 ＳＫＯＶ－３细胞的集落形成及凋亡的影响。结果 外源性Ｐ５３基因在转染细胞中有效表达，并增强了顺铂对ＳＫＯＶ－３细胞集落形成的抑制作用及促进了顺铂诱导的细胞凋亡。结论 外源性ｐ５３基因能增加卵巢癌细胞对顺铂的敏感性，两者联合作用能更大程度地杀灭肿瘤细胞。

外源性p53基因增强卵巢癌细胞对化疗和放疗的敏感性

目的 探讨外源性p53基因转染对人卵巢癌细胞系的化疗、放疗敏感性的影响。方法 用分子克隆技术构建人野生型 p53基因与真核细胞表达载体 pcDNA3的重组体（pcDNA-p53）,并用脂质体介导的转染技术,将其导入不表达p53的卵巢癌SKOV-3细胞中,经 G418筛选,Northern blot及Western blot鉴定后,观察p53基因转染对顺铂或X线放射作用的SKOV-3细胞的集落形成的影响。结果 成功地构建了人野生型p53基因与真核细胞表达载体的重组体。外源性 p53基因在转染细胞中有效表达,增强了顺铂或X线放射对 SKOV-3细胞集落形成的抑制作用。结论 外源性p53基因能增强卵巢癌细胞对顺铂或放射的敏感性,p53基因治疗与化疗或放疗联合作用能更大程度地杀灭肿瘤细胞。

外源性p53基因抑制卵巢癌细胞的增殖并增加其对放疗的敏感性

目的 探讨外源性p5 3基因转染对人卵巢癌细胞系SKOV - 3的生物学行为及放疗敏感性的影响。方法 用脂质体介导的方法 ,将p5 3基因的真核细胞表达载体 (PcDNA -p5 3)导入不表达p5 3的人卵巢癌SKOV - 3细胞中 ,经G4 1 8筛选 ,Northernblot及Westernblot鉴定后 ,观察细胞生长速度、集落形成能力和增殖周期的变化 ;观察p5 3基因转染与放疗联合作用对细胞集落形成的影响。结果 外源性p5 3基因的表达明显抑制了卵巢癌细胞的生长及集落形成能力 ,使细胞阻滞于G1 期。p5 3基因与放疗联合作用明显抑制了卵巢癌细胞的集落形成。结论 外源性p5 3基因能抑制卵巢癌细胞的生长 。

外源性P16基因导入对人膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 :将外源性P16基因导入该基因纯合性缺失的人膀胱癌细胞系 ,观察对肿瘤细胞增殖活性及凋亡的影响。方法 :构建P16逆转录病毒表达载体 ,转染膀胱癌细胞系 ;应用Northern杂交及免疫细胞化学检测外源性P16基因的表达 ;流式细胞仪检测细胞周期 ;原位细胞凋亡检测及透射电镜观察细胞凋亡。结果 :转染外源P16基因的肿瘤细胞生长速率明显降低 ,Ki6 7标记指数下降 ,大多数细胞被抑制在G0 和G1期 ,同时发现凋亡细胞的存在。结论 :外源性P16基因导入不仅抑制膀胱癌细胞的增殖 ,且可诱导其凋亡。

外源野生型p53基因表达对人肺癌细胞药物敏感性影响及其机制研究

目的 了解外源野生型ｐ５３（ｗｔｐ５３）基因表达对人大细胞肺癌８０１－Ｄ细胞对化疗药物敏感性的影响。方法 脂质体地构建的含ｗｔｐ５３基因载体转染８０１－Ｄ细胞，经ＰＣＲ检测外源ｗｔｐ５３在宿主细胞存在情况，流式细胞术（ＦＡＣＳ）确认其功能活性。＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定８０１－Ｄ细胞转染ｗｔｐ５３后药物敏感性变化；ＤＮＡ断裂和形态学方法分析药物作用后细胞死亡方式。结果

人原发性肝癌P53基因缺失和突变

在多种人体肿瘤组织中P53基因有缺失,P53基因作为一个抗癌基因,能在体外抑制肿瘤细胞的生长。肿瘤组织中P53基因缺失或发生突变,丧失了抗癌基因的活性,某些突变体还具有协同转化活性。本文分析了12例肝癌及其相应癌旁正常组织P53基因的存在状态,发现3例(25％)P53基因有缺失,3例P53基因有突变。这一结果提示P53基因为人肝癌抗癌基因,它的缺失或突变与肝癌的发生或演进有关。

原发性肝癌p53基因高频缺失的双色荧光原位杂交证据

目的 :探讨原发性肝癌 (HCC)中p5 3基因的缺失频率、方式、特点及其临床意义。方法 :以p5 3基因及 17号染色体着丝粒DNA为探针 ,应用间期双色荧光原位杂交 (interphasedual,FISH)技术。结果 :肝癌中p5 3基因的缺失频率为 68 0 % (68/ 10 0 ) ,而配对正常肝组织中则未见有p5 3缺失 ;p5 3缺失方式多样且往往伴随 17号染色体多倍体 (r=0 5 94,P <0 0 1) ;p5 3缺失与肝癌病人的性别、年龄、HBV感染及临床分期无显著相关 (P >0 0 5 ) ,但与血清甲胎蛋白 (AFP)水平、肿瘤大小则显著相关 (P <0 0 5 ) ;有无p5 3缺失病人之间 2年存活率差异非常显著 (χ2 =11 463 ,P <0 0 1)。结论 :p5 3基因在原发性肝癌中存在高频缺失并往往伴随 17号染色体的多倍体 ;双色FISH技术为评估基因的缺失提供了特异、敏感、直观的分子细胞遗传学证据。

p53基因联合栓塞化疗治疗原发性肝癌22例

目的探讨经肝动脉灌注p53基因联合栓塞化疗术在治疗原发性肝癌中的应用价值。方法将78例原发性肝癌患者分成实验组及对照组,分别进行肝动脉灌注重组人p53腺病毒注射液联合栓塞化疗术及常规TACE治疗,对术后反应及疗效进行对比分析。结果术后实验组在治疗效果及肝功能都优于对照组,不良反应两组大致相同。结论p53基因联合栓塞化疗术治疗中晚期肝癌是一种安全可行的治疗方法。

大鼠慢性压迫性脊髓损伤后凋亡调控相关基因p53的表达变化及意义

目的:探讨慢性压迫性脊髓损伤(chroniccompressivespinalcordinjury,CCSCI)后脊髓组织中凋亡相关基因p53的表达变化规律及意义。方法:通过制作Wistar大鼠慢性压迫脊髓损伤模型,应用免疫组织化学方法和原位杂交方法,研究压迫组、假手术对照组脊髓组织中p53mR-NA和p53蛋白表达的灰度值差异。结果:p53mRNA在脊髓受压后4h脊髓组织即有表达,1d后增高,7d后仍有表达,14d后无表达,而p53蛋白受压1d后呈弱阳性,之后无明显表达。结论:p53的表达规律提示它参与了CCSCI内源性机制的调控过程。

卵巢恶性上皮性肿瘤p53、c-erbB-2癌基因表达及其临床病理学意义

目的探讨卵巢恶性上皮性肿瘤中ｐ５３和ｃ┐ｅｒｂＢ┐２基因表达与肿瘤恶性程度和预后的关系。方法１０８例卵巢癌应用Ｓ┐Ｐ免疫组化法检测其ｐ５３和ｃ┐ｅｒｂＢ┐２基因产物，另有１０例卵巢良性上皮性肿瘤作为对照。结果在１０例卵巢良性上皮性肿瘤中，ｐ５３和ｃ┐ｅｒｂＢ┐２产物均为阴性，在３７例交界性肿瘤中，其阳性率分别为２９．７％和２４．３％，７１例卵巢癌则高达５０．７％和５３．５％。在卵巢癌的不同组织学类型中，粘液性癌ｐ５３产物的阳性率高于浆液性和内膜样癌。在肿瘤分化方面，低分化癌的阳性率明显高于高分化癌组。在随访３～１４年的５６例中，ｐ５３和ｃ┐ｅｒｂＢ┐２基因的表达分别为２６．１％和２８．６％，明显低于死亡组（６６．７％和７７．８％），其差别是很明显的。结论上述结果表明，ｐ５３和ｃ┐ｅｒｂＢ┐２基因在卵巢恶性上皮性肿瘤中高表达，则其生物学行为和预后均较差。

DNA polβ启动子和CMV启动子调控的p53基因在涎腺腺样囊性癌细胞中表达的比较

目的检测DNA polβ启动子在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性,探讨DNA polβ启动子对外源性野生型p53基因表达的影响。方法荧光素酶法测定DNA polβ启动子在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性。构建携带人野生型p53基因的真核表达载体,以脂质体法转染涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测p53基因mRNA的表达。博莱霉素、H2O2及紫外线刺激转染细胞,采用RT-PCR及Western blot法比较DNA损伤下DNA polβ启动子和CMV启动子调控的p53基因及P53蛋白的表达。结果荧光素酶活性分析显示,涎腺腺样囊性癌细胞中DNApolβ启动子活性增高。p53基因的导入使其在涎腺腺样囊性癌细胞中表达增强,DNA polβ启动子组较CMV启动子组更为明显。DNA损伤后,DNA polβ启动子组的p53基因和P53蛋白的表达较CMV启动子组增强(P<0.05)。结论在涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞中,DNA polβ启动子的活性增高,DNA polβ启动子能够增强外源性野生型p53基因在涎腺腺样囊性癌细胞中的表达。

慢性粒细胞白血病p53基因功能检测

目的：通过以ｐ２１ 作为标志物的功能检测方法了解慢性粒细胞白血病中ｐ５３ 基因功能状况。方法：采用ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法检测未经阿霉素诱导及阿霉素诱导后慢粒患者白血病细胞中ｐ５３ 及ｐ２１ 蛋白表达。结果：对２５例慢粒患者白血病细胞进行了检测，显示５ 例ｐ５３ 基因功能异常，其中１ 例为慢性期，显示ｐ５３ 基因为野生型，但无功能；１ 例为加速期；３ 例急变期，分别为急粒变、急单变和多克隆急变，在急淋变中未见。ｐ５３ 基因功能异常者预后差。结论：ｐ５３ 基因功能异常多出现于慢粒急性髓细胞变，与患者预后相关。除因基因本身改变而致ｐ５３ 功能丧失外，慢粒中可能存在ｐ５３ 抑制因子或结合蛋白，致使ｐ５３ 功能丧失。

p53基因BstUⅠ位点多态性与非小细胞肺癌易感性及放射敏感性的相关性研究

背景与目的肺癌是世界上发病率和死亡率增长较快的恶性肿瘤。近几年来随着分子生物学的蓬勃发展,人们对疾病的认识达到了基因水平。通过分子生物学方法发现某一基因与肺癌之间的关联性并加以利用,为早期诊断及治疗肺癌提供了一个新的思路。本研究拟探讨p53肿瘤抑制基因BstUⅠ位点多态性与非小细胞肺癌(NSCLC)易感性及放射敏感性的相关性。方法采用PCRRFLP方法检测50例NSCLC患者及50例健康对照p53基因序列中的BstUⅠ位点单核苷酸多态性(SNP)。并采用病例对照方法分析p53基因BstUⅠ位点的多态性与肺癌的易感性,以及NSCLC患者p53基因BstUⅠ位点的多态性与放疗疗效的相关性。结果不同p53基因BstUⅠ基因型的NSCLC患者对放疗的有效率不尽相同。杂合子(A1/A2)基因型的患者对放疗的有效率低,仅为25.0%,而纯合子(A1/A1,A2/A2)基因型的患者对放疗的有效率较高,分别为71.4%和70.0%,三者之间的差异有显著性(χ2=9.2,P<0.05)。肺癌组的A1/A1、A1/A2及A2/A2基因型频率分别为28.0%、32.0%及40.0%,对照组为32.0%、42.0%及26.0%,但两组间纯合子的频率差异并无统计学意义(P均>0.05),并且未观察到p53基因BstUⅠ的多态性与NSCLC易感性有密切的相关关系。结论p53基因BstUⅠ位点多态性可能与NSCLC发生无关,但NSCLC患者的p53基因BstUⅠSNP可能与放射敏感性有关。

恶性肿瘤p53基因异常、nm23表达与化疗敏感性关系

目的探讨恶性肿瘤ｐ５３基因异常、ｎｍ２３表达与抗癌药耐药性关系。方法用ＭＴＴ法测定１７种常用抗癌药对７４例恶性肿瘤的体外敏感性，并用聚合酶反应———单链构象多态分析技术和免疫组织化学染色法检测其ｐ５３基因异常、ｎｍ２３表达情况。结果与ｐ５３基因正常、ｎｍ２３（＋）组比较，其余三组抗癌药抑制率较小，其中ｐ５３基因正常、ｎｍ２３（－）组抗癌药抑制率不存在显著差异；ｐ５３基因异常、ｎｍ２３（＋）组对两种抗癌药抑制率存在显著差异；ｐ５３基因异常、ｎｍ２３（－）组对７种抗癌药抑制率存在显著差异。结论当恶性肿瘤中存在ｐ５３基因异常或ｎｍ２３表达（－）时，抗癌药耐药性增加。

C-erbB_2、p53基因及PCNA在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中C-erbB_2、p53及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及与病理类型、组织学分级及临床分期的关系。方法:应用免疫组织化学S-P方法检测65例上皮性卵巢癌组织中C-erbB_2蛋白、p53蛋白及PCNA蛋白的表达。结果:卵巢癌组织中存在C-erbB_2、p53的异常丧达,表达的差异性与病理类型无关(P>0.05),与组织学分级及临床分期有关(P<0.05);在中、低分化的卵巢癌中其增殖细胞核抗原(PCNA)的表达较高分化者明显(P<0.05)。结论:C-erbB_2、p53的过度表达与卵巢癌的发生、发展及分化等过程密切相关,C-erbB_2、p53和PCNA的过度表达可作为判断卵巢癌预后不良的指标。

CD44基因拼接体、p53基因突变和染色体倍性与大肠癌转移之间关系的机理研究

目的:探讨大肠癌ＣＤ４４ｖ６表达、ｐ(53)基因突变和染色体倍性与大肠癌转移之间的关系和作用机理。方法：流式细胞仪测定大肠癌细胞倍性及其在细胞周期各相中的分布；ＲＴ－ＰＣＲ方法及特异探针Ｄ３对大肠癌细胞进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ，并对杂交条带进行辉度扫描；银染ＰＣＲ单链构象多态性（ＳＳＣＰ）技术检测大肠癌细胞ｐ(53)基因突变。结果：正常对照、良性腺瘤、肿瘤未转移和肿瘤转移组其ＣＤ４４ｖ６阳性率和ｐ(53)基因突变率呈逐渐上升趋势，ＣＤ４４ｖ６辉度扫描表明肿瘤未转移组（２３１７．２６±１９８．７３）和转移组（１００２４．１６±８５５．４０）相比较，表达量有显著差异（Ｐ＜０．０２）；ＣＤ４４ｖ６阳性和阴性两组中Ｇ２Ｍ期细胞均值分别占６．２４％和５．４８％（Ｐ＞０．０５），异倍体细胞分别为６２．１６％和６０．００％（Ｐ＞０．５）；而ｐ(53)基因突变和未突变两组中Ｇ２Ｍ细胞占１０．３３％和４．０１％（Ｐ＜０．０５），异倍体细胞分别为８５．２０％和３０，００％（Ｐ＜０．００５）；肿瘤异倍体细胞转移率显著高于二倍体细胞。结论：ＣＤ４４ｖ６的表达与转移高度相关，ＣＤ４４ｖ６和ｐ(53)基因突变与肿瘤转移关系可能涉及不同的作用机理。Ｃ?