颌下腺导管细胞体外分离纯化的实验研究

目的 :体外分离纯化颌下腺 (SMG)导管细胞。方法 :选用 8d龄SD大鼠 15只 ,无菌条件下取出颌下腺 ,胰蛋白酶消化 ,等密度梯度离心分离纯化导管细胞 ,免疫组织化学染色进行细胞鉴定 ,分光光度计检测所获得的各层细胞带上清液中淀粉酶的活性。结果 :所获得的上层区带细胞免疫组织化学染色Anti Pancytokeratin、Anti EMA呈阳性表达。同时淀粉酶活性检测上、下层区带分别为 6 %和 72 %。结论 :应用等密度梯度离心的方法可获得纯化程度较高的SMG导管细胞。

表皮生长因子对下颌下腺导管细胞内钙和环磷酸腺苷浓度的影响

目的:研究表皮生长因子(EGF)对体外培养的下颌下腺(SMG)导管细胞内钙(Ca2+)、环磷酸腺苷(cAMP)浓度的影响。方法:在SMG导管细胞培养液中加入EGF后,以Ca2+结合荧光染料(Fluo-3)及125I-cAMP放射免疫试剂盒,利用荧光显微镜及放射免疫方法检测EGF对细胞内Ca2+、cAMP浓度的动态变化。利用SPSS8.0软件,对所获得的数据进行统计学处理。结果:加入EGF后20s内,细胞内Ca2+浓度可迅速达到峰值,然后缓慢下降,维持在较高水平,作用时间持续5min,与静息状态下相比,仍有显著性差异(P<0.01);给药后3min时,可引起细胞内cAMP值快速降低;而作用90min后,cAMP浓度可恢复至基础水平。结论:EGF可能是通过调节细胞内Ca2+和cAMP的浓度发挥促增殖作用。

CXCR2在胰腺导管细胞癌中的表达及意义

目的:探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)在胰腺导管细胞癌中的表达以及与其发生、发展的关系。方法:采用RT-PCR法、Western blot免疫印迹法检测50例胰腺导管细胞癌组织及癌旁组织和30例正常胰腺组织中CXCR2的表达水平,分析其与胰腺导管细胞癌生物学特性的关系。结果:胰腺导管细胞癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织中CXCR2 mRNA和蛋白的表达分别为1.13±0.25、0.79±0.18、0.78±0.14和1.75±0.21、1.01±0.15、0.96±0.20,同癌旁组织和正常胰腺组织比较,胰腺导管细胞腺癌组织中CXCR2 mRNA和蛋白的表达明显升高(P<0.05)。同正常胰腺组织相比,癌旁组织中CXCR2mRNA和蛋白表达无明显升高(P>0.05)。CXCR2 mRNA和蛋白表达与肿瘤分化程度、淋巴转移和TMN分期密切相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CXCR2在胰腺导管细胞癌中高表达,与胰腺导管细胞癌发生、迁移、侵袭和转移等恶性生物学行为相关。

果树木质部导管细胞的扫描电镜研究

果树木质部导管细胞的扫描电镜研究杨煜升杨凤仙（山西农业大学电镜室，山西太谷０３０８０１）植物的茎由木质部和韧皮部组成，木质部主要由导管和管胞组成。按导管发育先后和次生壁不同的木化增厚方式，导管分为孔纹导管、网纹导管、环纹导管、螺纹导管、梯纹导管五个类...

杏、李、樱桃一年生枝导管细胞的解剖结构比较

以杏、李、樱桃的一年生枝条为材料,研究了其木质部导管细胞解剖结构,结果表明:杏、李主要为螺纹导管型,樱桃主要为梯纹导管型;三者的导管细胞均有多层的次生加厚。李导管细胞长度在302.0～340.2μm之间,直径在27.9～32.1μm之间;杏导管细胞平均长度为347.8μm,平均直径为28.3μm;樱桃导管平均长度为374.6μm,平均直径为34.6μm,杏、李、樱桃导管细胞表现了极显著差异,杏、李导管直径明显小于樱桃。揭示了杏、李树较樱桃树抗旱能力强的生理原因,为研究果树抗性生理和果树分类提供了细胞解剖学理论依据。

α-胞衬蛋白siRNA对人涎腺导管细胞的影响

目的观察α-胞衬(α-Fodrin)蛋白小干扰RNA(siRNA)对人涎腺导管(HSG)细胞的影响,探讨α-Fodrin siRNA治疗干燥综合征(SS)的作用。方法实验分对照组、空载体组、α-Fodrin siRNA1组及α-Fodrin siRNA2组,将成功构建的10μgα-Fodrin siRNA1和α-Fodrin siRNA2表达载体分别采用脂质体法转染HSG细胞,空载体组HSG细胞转染等剂量的pGFP-V-RS空载体。转染后24、48、72和96h观察细胞转染效率,实时荧光定量(RT)-PCR法检测4组HSG细胞中α-Fodrin mRNA的表达水平;细胞荧光免疫法检测4组细胞中α-Fodrin蛋白的表达水平;ELISA法检测4组细胞上清液中IFN-γ、IL-10的表达水平。结果转染后48hHSG细胞转染效率最高;转染后48hα-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组HSG细胞中α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组(P<0.05),且α-Fodrin siRNA2组中α-Fodrin mRNA的表达水平低于α-Fodrin siRNA1组的表达水平(P<0.05);α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清液中IL-10的水平明显升高,较对照组和空载体组差异有统计学意义(P<0.05),α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组比较差异无统计学意义(P>0.05);α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清中IFN-γ的水平低于对照组和空载体组,但4组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSG细胞转染α-Fodrin siRNA载体后,α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平下降,同时细胞上清中IL-10的水平升高、IFN-γ水平下降,提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎性反应,为SS的治疗提供实验依据。

实验性大鼠腮腺导管细胞缺血再灌注TGF-β_1的表达

目的 探讨TGF - β1(Transforminggrowthfactor - β1转化生长因子 - β1)在实验性大鼠腮腺导管细胞的表达变化与形态学改变的关系。方法 采用颈总动脉结扎法建立腮腺缺血再灌注模型 ,用光镜、免疫组化的方法 ,观察腮腺导管细胞形态学及TGF - β1的表达变化。结果 实验组在缺血再灌注早期 ,开始出现形态学改变 ,中期明显 ,后期渐修复。缺血时间相同时 ,随再灌注时间的延长 ,TGF - β1的表达先升高后降低。再灌注时间相同时 ,随缺血时间的延长 ,细胞TGF - β1的表达有明显增高趋势。结论 实验性缺血再灌注大鼠腮腺导管细胞有形态学改变 ,TGF - β1的表达在腮腺缺血再灌注损伤早期增加 ,可能起到抑制细胞增殖的作用 ,以后逐渐减弱 ,不是影响细胞结构变化的主要因素 ;缺血时间越长 ,TGF - β1的表达增加 ,提示细胞增殖抑制作用渐明显。

过氧化氢诱导人唾液腺导管细胞凋亡的体外研究

目的探讨氧化剂对SV-40转染的人类唾液腺导管细胞（NS-SV-DC）的诱导凋亡作用及其可能机制。方法应用流式细胞仪检测磷脂酰丝氨酸的外露，蛋白印迹检测半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶（PARP）的表达及细胞色素C从线粒体内的释放。结果NS-SV-DC经0．4mmol／L过氧化氢（H2O2）孵育后，磷脂酰丝氨酸由细胞膜内释放到膜外，细胞色素C在细胞浆中显著增加；caspase-3和PARP被剪切。结论H2O2可在0．2～0．8mmol／L浓度范围内诱导唾液腺导管细胞的凋亡，其凋亡的发生机制与线粒体介导的信号转导路径相关。

颌下腺导管细胞与胶原海绵细胞相容性的实验研究

为探讨胶原海绵对颌下腺 (submandibulargland ,SMG)导管细胞的细胞相容性 ,采用HE染色光镜观察及免疫组化观察SMG导管细胞接种于胶原海绵后 ,细胞的生长情况。光镜下可见接种后第 1d细胞数量较少 ,分散于胶原海绵支架中间 ,第 7d细胞数量明显增加 ,免疫组织化学染色抗IV型胶原抗体染色呈阳性 ,说明细胞与支架材料之间已经有细胞外基质产生。胶原海绵具有良好的细胞相容性 ,是一种理想的支架材料。与胶原海绵复合培养 ,颌下腺导管细胞仍可保持良好的增殖能力。

两个番石榴品种导管细胞形态观察

利用常规木材制片法,结合细胞图象分析系统及显微照相,对番石榴2个品种(土种、珍珠)茎次生木质部导管细胞结构进行了观察.结果表明:1、导管细胞均为具单穿孔板的孔纹导管;2、总体上可分为两端具尾、一端具尾和无尾3种类型的导管;3、土种、珍珠2个品种番石榴导管细胞平均长度分别为959.67±203.01μm、861.95±167.49μm,平均直径分别为210.54±64.72μm、192.59±57.97μm.番石榴不同品种导管细胞形态差异与其生长的差异具有一定的相关性.

胰腺导管细胞癌组织CSF3R基因表达对患者预后的影响及其机制

目的探讨粒细胞集落刺激因子3受体(CSF3R)基因表达对胰腺导管细胞癌患者预后的影响及其机制。方法从GEO数据库中下载包含CSF3R表达数据的人类胰腺导管细胞癌表达谱,包括132例份胰腺导管细胞癌样本。通过R2分析平台,以Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析CSF3R表达与患者预后的关系,筛选出与CSF3R表达显著相关的基因并进行KEGG通路分析与GO分析。结果 CSF3R表达与患者总体生存率呈负相关(P<0.05),CSF3R高表达患者的总体生存率低于低表达患者(P<0.05)。检测出与CSF3R表达呈显著相关的基因共6 521个,其中正相关基因3 040个、负相关基因3 481个。KEGG分析发现,有27个高表达基因(C1QA、C1QB、C1QC、C2、C3AR1、C5、C5AR1、FCAR、FCGR2A、FCGR2B、FCGR3A、FCGR3B、FGG、FPR1、FPR2、FPR3、HLA-DMB、HLA-DQA1、HLA-DQB1、ICAM1、ITGAM、ITGB2、MASP1、MASP2、MBL2、PLG、SELPLG)仅涉及1个信号通路,即金黄色葡萄球菌感染。GO分析发现,CSF3R及其相关基因主要与细胞对刺激的反应、免疫反应、RAS调控、胰腺发育等相关。结论 CSF3R表达与胰腺导管细胞癌患者总体生存率相关,其可能是预测患者预后的潜在分子标记物。

重编程胰腺导管细胞可成功治疗糖尿病小鼠

在糖尿病的发生发展中,胰岛β细胞功能的进行性丧失最终会导致高血糖的恶化和各种并发症的发生。近期,科学家们找到一种治疗1型糖尿病的策略——通过重编程小鼠体内的胰腺导管细胞,成功治疗遗传和化学诱发的糖尿病。相关研究于2018年5月2日发表在《Molecular Therapy》杂志上。

胰腺导管细胞的增殖能力、特性、化生、分离和培养

尽管胰腺导管上皮仅占胰腺的一小部份,但它在胰液/电质和粘蛋白分泌方面发挥重要作用,并与胰腺癌、酒精性胰腺炎和囊性纤维变性的发病有关。胰和细胞增殖[~3H]Tdr核标记指数证实成年大鼠、仓鼠和豚鼠的胰管细胞与腺泡和胰岛细胞有相同的增殖率。对大鼠出生后2～33天期间腺泡、叶内和叶间胰管细胞定量测定表明:与胰管细胞相比,腺泡细胞以稍快的指数增长率增殖,这与放射自显影结果一致。

线粒体钙单向转运体相关钙超载调控钙调蛋白对雨蛙肽诱导胰腺导管上皮细胞微丝骨架的影响

目的 通过体外细胞研究探讨线粒体钙单向转运体(MCU)相关钙超载通过调控钙调蛋白(CaM)对雨蛙肽诱导的胰腺导管上皮细胞微丝骨架的影响。方法 使用10^(-7)mol/L雨蛙肽及10^(-5)mol/L MCU抑制剂钌红(RR)干预人胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)24 h,将细胞分为:Control组、雨蛙肽组、RR组、雨蛙肽+RR组。Western blot法检测细胞内MCU及CaM蛋白表达,荧光探针法检测细胞内游离Ca^(2+),免疫荧光双标法检测细胞内线粒体Ca^(2+),微丝染色法观察细胞微丝骨架结构。结果 雨蛙肽组与Control组比较,MCU及CaM蛋白表达、细胞质及线粒体内Ca^(2+)含量升高(P<0.05),细胞微丝骨架破坏;雨蛙肽+RR组与雨蛙肽组比较,MCU及CaM蛋白表达、胞质Ca^(2+)及线粒体内Ca^(2+)含量降低(P<0.05),细胞微丝骨架破坏减轻。结论 MCU相关钙超载可能通过激活CaM促进雨蛙肽诱导的胰腺导管上皮细胞微丝骨架的破坏。

胰腺腺泡细胞癌伴脾脏侵犯肿瘤破裂出血1例

胰腺腺泡细胞癌(PACC)是一种临床上罕见的胰腺恶性肿瘤,缺乏特异性临床表现及肿瘤标志物,检查发现胰腺占位应考虑到PACC的可能性,临床确诊需术后活组织病理学检查明确,早期积极手术并辅以术后综合性治疗可明显改善患者预后。现报道怒江州人民医院收治的1例术后病理学检查明确PACC伴脾脏侵犯肿瘤破裂出血行开放胰腺体尾部切除+全脾脏切除+淋巴结清扫术的患者临床病例资料并结合相关文献对本病的发病机制、临床表现、诊断、治疗、预后等进行讨论分析,以提高对该疾病的认识。

胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定

目的建立胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法。方法采用胰酶和胶原酶Ⅳ、P消化法分离获得细胞,在含10%胎牛血清的M199培养基中行导管上皮细胞原代培养,而后将血清浓度提高到20%以上继续培养,3～4天后至每个小圆细胞形成一个集落;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)的方法对获得的细胞检测CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2等基因的表达。结果成功分离获得胎猪胰腺导管细胞,并证实该细胞为胎猪导管源胰腺干细胞。经检测,细胞表达CK19,Pdx-1,Glut-2,NeuroD/Beta2等胰腺干细胞的标志,而insulin、Neurogenin3阴性表达。结论该方法可较好地分离纯化出胎猪胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性。

颌下腺导管细胞体外培养的实验研究

目的探讨颌下腺(SMG)导管细胞的体外培养方法。方法将SMG导管细胞进行原代和传代培养,观察培养细胞的形态结构,了解细胞的生长特性。同时经噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力。结果导管细胞生长期间单层生长,呈多角形上皮细胞,可传代生长3～4代,存活3～4周。其中培养72h后,原代、第2代细胞活性与第4代相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外培养的原代及第2代细胞具有较高的增殖能力,可用于进一步研究。

EGF对颌下腺导管细胞增殖作用的影响

目的 :探讨表皮生长因子 (EGF)对颌下腺导管细胞增殖作用的影响。方法 :向培养液中加入EGF进行颌下腺导管细胞培养 ,以MTT法测定细胞的增殖能力 ,研究不同浓度下生长因子对大鼠颌下腺导管细胞增殖的剂量 -效应关系及时间—效应关系。结果 :EGF在 0 .5～ 10ng/ml浓度范围内呈剂量 -效应关系 (P <0 .0 1) ,当浓度持续增大时 ,培养细胞的增殖能力则有所降低 (P >0 .0 5 ) ;与对照组比较 ,加入EGF作用第 2天开始出现促增殖效应 ,第 3天开始EGF显示出明显的促增殖效应 (P <0 .0 1) ,第 5天时培养细胞的增殖能力开始降低。结论

大鼠胰腺次全切除后导管细胞同源盒基因-1表达规律研究

目的 研究大鼠胰腺大部分切除术后,残余胰腺导管上皮细胞转录因子胰-十二指肠同源盒基因(PDX)-1表达规律,探讨PDX-1表达的意义。方法手术切除大鼠胰腺约90％组织,不同时间点处死动物后取材,解剖显微镜下游离胰腺导管,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与Western blot检测导管上皮中PDX-1 mRNA和蛋白表达。结果实验组手术后第2天与第3天导管上皮细胞PDX-1蛋白表达显著升高,高于对照组两倍以上,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),第5天到第7天逐渐恢复到对照组水平;实验组在各时间点PDX-1 mRNA表达水平与对照组无明显差异(P>0.05)。结论残余胰腺再生过程中导管上皮细胞中出现PDX-1高表达,表明胰腺干细胞参与残余胰腺再生,且PDX-1表达受转录后调控。

人成纤维细胞生长因子1-Ⅲb受体亚型在胰腺导管细胞增殖中的作用及对蛋白激酶的调节

目的探讨人类成纤维细胞生长因子受体1的Ⅲb亚型（FGFR1-Ⅲb）在TAKA-1胰腺导管细胞增殖中的作用及对有丝分裂激活的蛋白激酶（MAPK）的调节。方法以脂质体法将人类全长FGFR1-Ⅲb表达质粒pSVK4／FGFR1-Ⅲb稳定转染入TAKA-1胰腺导管细胞，采用Western印迹、Northern印迹、免疫荧光和糖基化分析等方法鉴定FGFR1-Ⅲb在TAKA-1细胞中的表达、分布和结构特征，并以生长因子刺激转染细胞，通过MTY法及MAPK分析，观察FGFR1-HIb受体在胰腺导管细胞中的功能及作用机理。结果FGFR1-Ⅲb受体是位于120000和130～150000之间的糖基化受体，在细胞膜表面和胞浆中为中等强度表达，在胞浆的核周围区为高表达，细胞核内不表达。FGF-1、-2和-4能够明显促进转染FGFR1-Ⅲb基因的TAKA-1细胞的生长，同时能够明显增强p44／p42MAPK的磷酸化。结论人类FGFR1-Ⅲb受体在胰腺导管细胞中为功能性受体，FGF-1、-2和4能够促进转染FGFR1-Ⅲb基因的TAKA-1细胞的增殖，其机制为促进p44／p42MAPK的磷酸化。