封闭蛋白的结构、功能及其与人类疾病

紧密连接(tight junction,TJ)是脊椎动物细胞间连接的一种主要形式,对介导上皮细胞间的黏合、维持上皮细胞的功能具有重要作用。TJ是由一系列跨膜蛋白和外周蛋白相互作用而形成的一个复杂的蛋白质体系,封闭蛋白(occludin)是构成TJ的主要成分之一。目前,已发现封闭蛋白与许多人类疾病有关。本文仅就封闭蛋白的结构、功能及其与人类疾病的关系做一综述。

骨髓间充质干细胞复合纤维蛋白封闭剂体内构建可注射性组织工程软骨

目的探讨利用人骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)与可注射性纤维蛋白封闭剂(fibrinsealant,FS)复合,在裸鼠体内构建组织工程软骨的可行性。方法体外分离扩增健康人MSCs,以含有转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF-β1)、地塞米松、维生素C的培养基进行成软骨诱导,诱导第7、14天分别检测软骨细胞特异的生物学特性。将诱导7d的MSCs与FS复合,接种于裸鼠背部皮下作为实验组,同时设单纯只注射FS或MSCs的支架对照组和细胞对照组。分别于接种后6、12周取材进行大体观察,行HE、阿尔新蓝染色和型胶原免疫组织化学染色评价其成软骨能力。结果MSCs以特定的培养基诱导后由纺锤形变为多角形,并表达软骨细胞分泌的基质。复合物接种6和12周后,实验组均可形成软骨样组织块,6周时形成的组织块较小而质地柔韧,陷窝清楚,可检测到阳性阿尔新蓝及型胶原表达;12周形成的组织块较大,质地较硬,表面光滑,软骨细胞位于成熟的陷窝中,阿尔新蓝及型胶原免疫组化阳性染色较6周增强。两个对照组均无软骨样组织块形成。结论MSCs复合FS可以作为一种较优良的可注射性组织工程软骨的构建方法。

椎板回植及纤维蛋白封闭剂在椎管内肿瘤治疗中的应用

目的介绍在治疗原发椎管内肿瘤时联合应用椎板棘突回植及纤维蛋白封闭剂的手术方法,并评价其疗效。方法2003年6月-2005年12月,采用椎板棘突回植术及纤维蛋白封闭剂治疗椎管内肿瘤16例,男7例,女9例;年龄26～55岁。病程1个月～2年。肿瘤位于胸段8例,胸腰段3例,腰段5例。主要表现为腰背部疼痛及下肢不全瘫。所有患者均行MRI检查为椎管内髓外硬脊膜内占位性病变。其中单发神经鞘瘤9例,脊膜瘤5例,多发神经鞘瘤、胶质瘤各1例。结果手术过程顺利,无术中并发症。术后行X线及CT检查,复合体回植物位置良好,无螺钉突破椎板压迫硬脊膜。术后全部获12～42个月随访,疼痛及瘫痪程度明显改善,恢复了生活及工作能力。3例患者复查MRI示硬脊膜结构清晰,无明显粘连及压迫征象。14例患者复查CT未见骨不愈合及回植的复合体移入椎管,椎板内侧缘骨质未因过度增生而对硬脊膜产生新的压迫。结论在行椎管内肿瘤摘除术的同时联合应用纤维蛋白封闭剂及椎板棘突回植术可维持脊柱的稳定性,保持椎管的完整性,避免继发性椎管狭窄的发生,提高手术效果。

纤维蛋白封闭剂治疗妊娠中晚期胎膜早破的护理

目的探讨纤维蛋白封闭剂治疗妊娠中晚期胎膜早破的有效护理措施,提高治疗安胎成功率。方法对8例采用纤维蛋白封闭剂治疗妊娠中晚期胎膜早破孕妇采取针对性的术前准备,术后护理、预防感染、严密监护胎儿宫内安危,合理的出院指导等护理措施。结果8例患者经纤维蛋白封闭剂治疗后,均成功产下成活新生儿;5例术后痊愈出院,至足月后入院正常分娩,3例术后一直住院安胎,后行剖宫产。结论妊娠中晚期胎膜早破严重危害母婴安全,纤维蛋白封闭剂对妊娠中晚期胎膜早破有较好的治疗效果,应根据不同孕妇的具体情况采取有针对性的护理措施。

表皮生长因子与纤维蛋白封闭剂复合物对碱烧伤后眼表修复的实验研究

目的:观察表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)与纤维蛋白封闭剂复合物对碱烧伤后眼表结构修复影响。方法:应用5mm直径滤片吸附1mol/LNaOH,烧伤大鼠角膜1min所造的鼠角膜碱烧伤模型,并在烧伤后采用EGF与纤维蛋白封闭剂复合物平铺在受伤的角膜表面,并在烧伤后1,2,4wk处死各组动物,通过HE染色和免疫组化染色在光学显微镜下观察各组角膜新生血管形成情况,以及TNF-α,IL-6,IL-8表达情况,并行对照分析。结果:烧伤后使用EGF与纤维蛋白封闭剂复合物平铺在受伤的角膜表面组角膜新生血管和多种细胞炎症介质在烧伤后1,2,4wk均明显少于烧伤组。结论:EGF与纤维蛋白封闭剂复合物显著促进角膜烧伤后角膜上皮的形成。

封闭蛋白与炎症性肠病相关性研究进展

肠黏膜上皮细胞与细胞间的紧密连接(tight junction, TJ)是构成肠黏膜机械屏障的结构基础,封闭蛋白(occludin)是TJ相关蛋白,对TJ有重要的调节作用,但具体机制尚不清楚。有研究表明,封闭蛋白可以通过调节TJ改变肠黏膜屏障功能,而肠黏膜屏障功能的改变参与了炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)的发生、发展。文章就封闭蛋白与IBD的相关性作一综述,以期为IBD的治疗提供新思路。

纤维蛋白封闭剂治疗多破口复杂假性动脉瘤一例并文献复习

报道1例多破口复杂假性动脉瘤,经三维DSA明确诊断,在DSA引导下行假性动脉瘤瘤腔内凝血酶注入治疗,效果不佳,后改为DSA引导下纤维蛋白封闭剂注入,取得良好的治疗效果。假性动脉瘤在介入治疗中的发病率不断上升,病变程度日益复杂,本文结合病例讨论复杂假性动脉瘤的诊断和治疗方法,为临床假性动脉瘤的诊疗提供帮助。

腹腔镜结合纤维蛋白封闭剂用于外伤性脾破裂保脾治疗的研究

目的探讨腹腔镜微创腹腔探查下应用纤维蛋白封闭剂保脾技术的可行性。方法随机将128例脾破裂患者分为非手术组(Ⅰ组)和腹腔镜组(Ⅱ组),对比2组保脾成功率、并发症发生率、平均开始下床活动时间、平均开始排气排便时间、平均开始流质饮食时间、平均应用镇痛剂剂量指标。结果腹腔镜组开始下床活动时间、恢复排气排便时间、恢复流质饮食时间明显早于非手术组,应用镇痛剂剂量明显少于非手术组;腹腔镜组保脾成功率明显高于非手术组,并发症发生率明显低于非手术组。结论严格掌握适应证,对外伤性脾破裂患者行腹腔镜探查腹腔并应用纤维蛋白封闭剂行脾创面止血治疗,保脾成功率高,术后并发症少,且安全,值得推广应用。

纤维蛋白封闭剂复合人胚关节软骨细胞体内构建可注射性软骨

目的：研究以纤维蛋白封闭剂（FS）为载体，复合人胚关节软骨细胞，体内构建可注射性组织工程软骨的可行性。方法：常规分离消化，体外单层培养胎儿关节软骨细胞，观察软骨细胞的生物学特性。分别将1×10^7、2×10^7、3×10^7第4代软骨细胞与FS混合接种于裸鼠皮下，并于第10周取材判断体内形成软骨的能力。结果：3～4代软骨细胞保持了很高的增殖和分泌基质的能力。软骨细胞与FS的复合物体内接种后各组均可形成软骨样组织块，其湿重、GAG含量随着接种细胞数量的增多而增高，各组之间差异具有显著性（P〈0．05）。3×10^7细胞组GAG含量与正常人胚关节软骨没有差异（P〉0．05）。组织切片显示软骨细胞位于类似正常软骨组织的陷窝中，阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原表达阳性，细胞内富含高尔基体、粗面内质网及大量分泌泡。结论：FS和人胚关节软骨细胞可以作为理想的支架材料和种子细胞应用于可注射软骨组织的构建。

纤维蛋白封闭剂预防硬膜外粘连的实验研究

目的 探讨纤维蛋白封闭剂预防术后硬膜外粘连的中长期效果。方法 成年健康犬10只。均行L2及L5全椎板切除术 ,制作椎板缺损模型。随机取 5只犬 ,于L2缺损区喷涂纤维蛋白封闭剂 ,L5作为空白对照 ;于另 5只犬的L5缺损区喷涂纤维蛋白封闭剂 ,L2作为空白对照。均在术后 6个月处死 ,取出腰椎进行大体观察、组织学及MRI研究。结果 对照组可见大量瘢痕组织增生 ,硬膜与后方瘢痕组织粘连紧密。纤维蛋白封闭剂组硬膜与瘢痕之间有间隙 ,无明显粘连。

纤维蛋白封闭剂在晚期血吸虫病门静脉高压症手术治疗中的应用价值

目的探讨纤维蛋白封闭剂(FS)在晚期血吸虫病性门静脉高压症手术治疗中的应用价值。方法将2年内收治的9 2例血吸虫病性门静脉高压症患者接受相同手术方式后分成2组:断流术加纤维蛋白封闭剂组(FS组,6 4例);单纯性断流术未用FS组(NSF组,2 8例)。比较两组手术后4周内发热、脾窝渗液和手术4周后上消化道再出血、胃黏膜损伤及肝性脑病等并发症的发生情况。结果FS组手术近期脾窝渗液和发热率明显低于NFS组(P<0.0 5);FS组和NFS组随访期间上消化道再出血率分别为1.6%和1 4.3%(P<0.0 5),门静脉高压性胃黏膜损伤发生率分别为2 9 7%和6 4.3%(P<0.0 1);但不增加肝性脑病发生率(P≥0.0 5)。结论FS可有效地降低手术后近期和远期并发症的发生,提高晚期血吸虫病性门静脉高压症患者的手术疗效。

纤维蛋白封闭剂用于食管癌手术的临床分析

目的:探讨纤维蛋白封闭剂在食管癌根治术中的应用价值。方法:将食管癌患者62例,分为用胶组(27例)和未用胶组(35例),用胶组行常规食管癌根治术同时在手术创面应用纤维蛋白封闭剂,通过观察术后第12、24及48小时的胸腔闭式引流量及术后总引流量来确定纤维蛋白封闭剂在食管癌根治术中的有效性。结果:用胶组术后第12、24及48小时的胸腔闭式流量及术后总引流量均少于未用胶组,差异具有非常显著性(P<0.01)。结论:食管癌根治术中应用纤维蛋白封闭剂可以有效减少术后引流量,提早拔除胸腔闭式引流管,有利于患者的术后恢复。

纤维蛋白封闭剂预防血管外科手术并发腹股沟淋巴瘘的回顾性分析

目的 :观察纤维蛋白封闭剂对预防血管手术后并发腹股沟部淋巴瘘的作用。方法 :对 1 0 0例腹股沟部切口的动静脉手术病人 (其中 5 0例应用纤维蛋白封闭剂 )的临床处理情况 ,进行回顾性分析。结果 :应用纤维蛋白封闭剂的患者术后淋巴瘘发生率为 2 % ,而不应用的对照组则高达 1 0 % (P <0 .0 1 )。结论 :通过术中减少不必要的解剖 ,尽量结扎可视的淋巴管 ,加之配合使用纤维蛋白封闭剂 。

纤维蛋白封闭剂在鼻内镜手术中的应用

目的探讨纤维蛋白封闭剂(fibrin sealing,FS)在功能性鼻内镜鼻窦手术中的临床应用价值。方法随机将163例行鼻内镜鼻窦手术患者分成FS组、Merocel高膨胀材料组和凡士林油纱条组,比较不同填塞材料的术后临床表现及远期影响。结果FS组在鼻内镜鼻窦手术中止血效果差于高膨胀材料及凡士林油纱条组,但术后头痛及鼻腔疼痛较轻,鼻黏膜反应轻,创口愈合快,鼻黏膜上皮化快,鼻腔粘连少。结论鼻内镜鼻窦手术中应用FS术后头痛及鼻黏膜反应轻,值得临床进一步实践、应用。

纤维蛋白封闭剂对SD大鼠连续腹腔注射给药14天的毒性研究

目的：评价SD大鼠连续腹腔注射纤维蛋白封闭剂的安全性。方法 SD大鼠雌雄分别按体质量随机分4组，即空白对照组、纤维蛋白封闭剂低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组20只，雌雄各半。3个给药组的给药剂量分别为85.5、171．0和342．0 mg／kg ，每天腹腔注射给药，连续14 d ，恢复期28 d ，进行一般症状、血液学、血液生化和病理组织学等指标检测。结果与空白对照组相比，纤维蛋白封闭剂中、高剂量组大鼠第14天的白细胞计数显著升高，纤维蛋白原显著降低，中、高剂量组大鼠脾脏的脏器重量有增加趋势。组织病理学检查发现部分高剂量动物腹腔出现残留药物引起的纤维肉芽组织包裹。上述变化指标在恢复期结束时基本可恢复。结论大鼠腹腔注射纤维蛋白封闭剂85.5∽342．0 mg／kg ，安全剂量为85.5 mg／kg ，毒性剂量为171．0 mg／kg。毒性靶系统或靶部位为血液系统、免疫系统和给药局部，毒性作用可逆。

超高频电波刀联合纤维蛋白封闭剂治疗宫颈糜烂临床观察

目的:探讨超高频电波射频术(LEEP刀)联合纤维蛋白封闭剂治疗宫颈糜烂的临床疗效。方法:选择160例宫颈糜烂患者,随机分为对照组与观察组两组。对照组:单纯LEEP刀治疗;观察组:LEEP刀联合纤维蛋白封闭剂治疗,观察出血时间及术后修复情况。结果:与对照组比较,观察组疗组总有效率达98.6%,对照组总有效率达84.8%。阴道流血时间缩短、出血量减少、创面修复快、治愈率高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:LEEP刀联合纤维蛋白封闭剂治疗宫颈糜烂疗效肯定,较单纯LEEP刀治疗治愈率高,阴道流血时间缩短,出血量减少、创面修复快。

纤维蛋白封闭剂对人牙髓细胞生长的影响

目的:观察fibrin sealant（FS）对人牙髓细胞贴壁率、生长曲线、增殖以及碱性磷酸酶活性的影响。方法:体外培养人牙髓细胞并鉴定,采用细胞记数法计算细胞贴壁率,绘制细胞生长曲线;采用MTT法测定细胞增殖;采用碱性磷酸酶试剂盒测定碱性磷酸酶活性。结果:FS组细胞的早期贴壁率明显高于对照组。FS组的细胞贴壁率在2h时是对照组的4.6倍,8h时FS组细胞的贴壁率超过100％（102.6％）,而对照组在24h超过100％（103％）。进入对数生长期后,FS组和对照组两条曲线曲度大致相似,实验组与对照组的MTT和ALP的A值无显著差异。结论:FS具有良好的生物相容性,有利于体外培养的牙髓细胞的早期贴壁和存活,但对细胞增殖速度及细胞分化无显著影响。

纤维蛋白封闭剂在颅脑手术中应用的实验研究

目的 观察纤维蛋白封闭剂的止血效果和对脑组织的影响。方法 随机将实验对象分为实验组和对照组 ,观察使用纤维蛋白封闭剂后 ,所用止血时间的变化以及止血效果 ;并在不同时间点取材行HE染色 ,观察其对周围脑组织的影响。结果 实验组使用纤维蛋白封闭剂后 ,止血时间明显缩短 ,差别有显著性 ;术后通过CT检查 ,证明其止血效果可靠 ;通过组织形态学观察 ,发现纤维蛋白封闭剂对周围脑组织影响较小 ,并可在短期内降解吸收。结论 纤维蛋白封闭剂在颅脑手术中应用 。