慢性心力衰竭合并肺部感染外周血miR-21、Tim-3、MMP-9、TLR4/NF-κB表达

目的探究慢性心力衰竭合并肺部感染外周血微小核糖核酸(miR)-21、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)mRNA、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Toll-样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)通路表达意义。方法选取滨州医学院附属医院2021年7月一2023年7月收治的慢性心力衰竭患者121例为研究对象,将发生肺部感染和未发生肺部感染的患者分别纳人感染组35例和非感染组86例。统计感染组病原菌分布,比较两组血清miR-21、Tim-3、MMP-9、TLR4、NF-κB水平,miR-21、Tim-3、MMP-9、TLR4、NF-κB水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析其对慢性心力衰竭合并肺部感染的预测价值。结果感染组分离出48株病原菌,革兰阴性菌占比最高,以大肠埃希菌为主。感染组血清miR-21、Tim-3、MMP-9、TLR4、NF-κB水平高于非感染组(P<0.05)。miR-21、Tim-3、MMP-9、TLR4、NF-κB联合检测诊断慢性心力衰竭患者合并肺部感染的曲线下面积(AUC)比各指标单一检测高(P<0.05),且联合检测敏感度、特异度为94.29%、83.72%。结论革兰阴性菌为慢性心力衰竭合并肺部感染的主要病原菌,慢性心力衰竭合并肺部感染患者血清miR-21、Tim-3及MMP-9水平呈高表达,TLR4/NF-κB信号通路被激活;miR-21、Tim-3、MMP-9、TLR4、NF-κB五指标联合检测可提高慢性心力衰竭患者合并肺部感染预测价值。

健脾消癌方干预结肠癌细胞HCT116来源外泌体中miR-21调控CAFs的活化与糖酵解的研究

目的:研究健脾消癌方干预结肠癌细胞HCT116来源外泌体中小分子含氧核糖核酸-21(miR-21)调控肿瘤相关成纤维细胞(Cancer associated fibroblasts,CAFs)的活化与糖酵解的作用机制。方法:采用超高速离心法收集分泌HCT116细胞来源外泌体(Exosomes,EXO);透射电镜鉴定HCT116细胞来源的外泌体形态;纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体的粒径分布范围;Western blot检测外泌体标志性蛋白TSG101、Alix、Calnexin的表达。制备健脾消癌方无外泌体含药鼠血清,采用含药血清干预HCT116细胞,RT-PCR检测miR-21的表达;收集无外泌体胎牛血清、无外泌体鼠血清、健脾消癌方无外泌体含药鼠血清干预后及miR-21 inhibitor转染后HCT116细胞来源的外泌体(HCT116外泌体1μg/mL组、空白鼠血清处理HCT116外泌体1μg/mL组、含药鼠血清处理HCT116外泌体1μg/mL组、miR-21敲除HCT116外泌体1μg/mL组),分别干预人胚肺成纤维细胞HFL-1,Western blot、RT-PCR法分别检测α-平滑肌肌动蛋白(Alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、血小板源生长因子受体-A(Platelet-derived growth factor A,PDGFRA)、丙酮酸激酶M2(Pyruvate kinase M2,PKM2)蛋白和mRNA的表达。结果:经透射电镜观察到HCT116细胞上清中提取到的外膜囊泡呈杯托样结构,粒径分析显示其直径主要分布在80 nm~200 nm之间,Western blot法检测到外泌体中标志蛋白TSG101、Alix均有表达;PKH67荧光标记的外泌体可被HFL-1细胞摄取;健脾消癌方可降低HCT116细胞来源miR-21的表达,且呈时间、浓度依赖;与空白对照组比较,HCT116外泌体1μg/mL组、空白鼠血清处理HCT116外泌体1μg/mL组α-SMA、PDGFRA、PKM2蛋白和mRNA相对表达上调(P<0.05或P<0.01);与空白鼠血清处理HCT116外泌体1μg/mL组比较,健脾消癌方含药鼠血清处理HCT116外泌体1μg/mL组、miR-21敲除HCT116外泌体1μg/mL组α-SMA、PDGFRA、PKM2蛋白和mRNA相对表达下调(P<0.05或P<0.01)。结论:HCT116细胞来源外泌体中miR-21可诱导HFL-1细胞活化成CAFs,健脾消癌方可通过调控α-SMA、PDGFRA的表达,抑制CAFs的活化,调控CAFs中的糖酵解限速酶PKM2的表达,抑制结直肠癌肺转移。

重症急性胰腺炎合并腹腔感染外周血ICAM-1及miR-22-3p、miR-21-3p表达及其预测价值

目的分析血清细胞黏附分子-1(ICAM-1)、外周血微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)、miR-21-3p表达对重症急性胰腺炎患者合并腹腔感染的预测价值.方法选择2021年1月-2022年8月福建医科大学附属第二医院收治的90例重症急性胰腺炎合并腹腔感染患者为感染组,同期102例单纯重症急性胰腺炎患者为未感染组,统计两组外周血ICAM-1、miR-22-3p、miR-21-3p表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析预测重症急性胰腺炎患者合并腹腔感染的临床价值,并比较住院期间重症急性胰腺炎合并腹腔感染不同预后患者表达水平.结果感染组患者外周血ICAM-1、miR-22-3p、miR-21-3p表达水平高于未感染组(P<0.05);三指标联合检测预测重症急性胰腺炎患者腹腔感染的曲线下面积(AUC)为0.923、敏感度为92.22%、特异度为81.37%;死亡组患者三指标表达水平高于存活组(P<0.05).结论外周血ICAM-1、miR-22-3p、miR-21-3p对重症急性胰腺炎患者合并腹腔感染具有较好的预测价值,且可对患者预后产生影响.

芪葵颗粒联合火把花根片对G3A3期糖尿病肾病的疗效及对血清miRNA-21的影响

目的观察芪葵颗粒联合火把花根片对G3A3期糖尿病肾病(DKD)患者的疗效及其对血清miRNA-21的影响。方法随机、平行对照临床试验。纳入2020年7月至2022年6月南京中医药大学附属医院内分泌科门诊或住院的98例G3A3期DKD患者。将患者按照2∶1比例随机分为中药组和对照组,对照组给予常规西药治疗,中药组加用芪葵颗粒和火把花根片治疗,均治疗12周。观察两组患者治疗前后中医证候积分、血压、糖化血红蛋白、血脂、尿白蛋白肌酐比值(UACR)、估算肾小球滤过率(eGFR)、尿液转化生长因子β1、黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原,以及血清miRNA-21等的变化情况。结果最终98例G3A3期DKD患者完成研究,其中对照组32例,中药组66例。与治疗前比较,两组患者治疗12周后中医证候积分、血压、糖化血红蛋白、UACR均显著降低(P<0.05)。治疗12周后,中药组患者中医证候积分、胱抑素C和UACR较对照组降低更明显[4.60±2.09比6.75±2.14,(1.70±0.46)mg/L比(2.03±0.58)mg/L,625(426,1306)mg/g比781(560,1462)mg/g,均P<0.05]。治疗12周后,两组患者的血压、糖化血红蛋白、血脂和eGFR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中药组患者治疗12周后尿液转化生长因子β1(TGF-β1)、黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-Col)均较治疗前显著降低(P<0.05),且中药组患者治疗12周后尿液TGF-β1和LN与同期对照组比较明显降低[(139±46)μg/L比(172±51)μg/L,(20.5±9.4)比(28.7±11.5)μg/L,均P<0.05)。治疗12周后,两组患者血清miRNA-21均较治疗前显著升高(P<0.05),且中药组患者治疗后血清miRNA-21较对照组升高更明显(76.5%±10.6%比65.2%±8.3%,P<0.05)。结论芪葵颗粒联合火把花根片可改善G3A3期DKD患者临床症状和肾功能,降低尿蛋白排泄水平,其治疗作用可能为通过上调miRNA-21表达和抑制TGF-β1表达,降低肾小球系膜细胞外基质成分LN和Ⅳ型胶原而实现。